丙型肝炎患者血清自身抗體的分析

武杰

【摘要】 目的 觀察丙型肝炎病毒（HCV）感染者血清中自身抗體情況， 分析自身免疫反應在丙型肝炎中的作用。方法 100例丙型肝炎患者作為研究組， 選取同時期體檢中心進行體檢的50例健康者作為對照組。以間接免疫熒光法（IIF）檢測兩組受檢者血清中抗核抗體（ANA）、抗可提取性核抗原抗體（ENA）、免疫印跡法檢測抗線粒體抗體（AMA）、抗肝抗原抗體（LMA）；以實時熒光定量聚合酶鏈反應（PCR）法檢測兩組受檢者血清丙型肝炎病毒核酸（HCV-RNA）含量。結果 研究組中檢測出1項或以上自身抗體陽性者48例， 自身抗體陽性率為48.0%（48/100）；對照組中檢測出1項或以上自身抗體陽性者2例， 自身抗體陽性率為4.0%（2/50）。研究組自身抗體陽性率顯著高于對照組， 差異有統計學意義（P<0.05）。研究組HCV-RNA陽性38例， 自身抗體陽性23例（60.53%）， 研究組HCV-RNA陰性62例， 自身抗體陽性25例（40.32%）， 對比差異有統計學意義（P<0.05）。結論 HCV感染后會出現自身免疫反應， 且HCV-RNA陽性患者反應更明顯， HCV感染者須進行血清自身抗體檢測， 以便更好接受治療。

【關鍵詞】 丙型肝炎；血清自身抗體；感染

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.25.040

丙型病毒性肝炎（viral hepatitis type C）簡稱為丙型肝炎、丙肝， 是一種由HCV感染引起的病毒性肝炎， 主要經輸血、針刺、吸毒等傳播， 據世界衛生組織統計， 全球HCV的感染率約為3%， 估計約1.8億人感染了HCV， 每年新發丙型肝炎病例約3.5萬例[1]。丙型肝炎呈全球性流行， 可導致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化， 部分患者可發展為肝硬化甚至肝細胞癌（HCC）， 嚴重危害患者的健康及生命安全， 已成為嚴重的社會和公共衛生問題[2， 3]。近年來， 隨著臨床醫學的不斷研究發現， HCV 感染者血清中多可檢測出導致多種組織器官功能紊亂的自身抗體， 進而加重丙型肝炎癥狀[4]。本文通過對100例丙型肝炎患者血清自身抗體的檢測， 總結HCV感染患者與自身抗體的關系， 以供臨床參考?，F報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2015年5月～2016年4月收治的100例丙型肝炎患者作為研究組， 所有患者經臨床檢查均確診為丙型肝炎， 其中男58例， 女42例， 年齡22～78歲， 平均年齡（52.45±12.20）歲， HCV-RNA陰性62例， HCV-RNA陽性38例。同時， 選取同時期于本院體檢中心進行體檢的健康者50例作為對照組， 所有受檢者經檢查排除病毒感染、自身免疫疾病及其他引起免疫功能改變的疾病患者， 且3個月

內未使用任何免疫制劑。其中男29例， 女21例， 年齡20～72歲，

平均年齡（48.81±11.52）歲。兩組一般資料對比差異無統計學意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 ①采用間接免疫熒光法（indirect immunofluore-scence， IIF）檢測血清中抗核抗體（anti-nuclear antibody， ANA）、抗線粒體抗體（anti-mitochondrial antibody， AMA）。間接免疫熒光樣本前處理儀IF Sprinter及所有試劑均購自德國歐蒙實驗免疫制品有限公司。所有檢測步驟均按照說明書嚴格進行。ANA、AMA的靶抗原分別為HEP-2細胞和猴肝組織的冰凍切片、鼠腎組織的冰凍切片， 將稀釋至1∶100的血清與生物載片一起溫育30 min， 放入異硫氰酸熒光素標記的抗體， 進行再次溫育30 min， 之后洗片， 甘油封片， 于熒光顯微鏡下觀測結果[2]。②采用免疫印跡法檢測抗可提取性核抗原（anti-extractable nuclear anti-gen， ENA）、抗肝抗原抗體譜。所有試劑均購自德國歐蒙實驗免疫制品有限公司。所有檢測步驟均按照說明書嚴格進行。將檢測膜條置于溫育槽內， 放入1.5 ml樣本緩沖液， 孵育5 min， 去除槽內液體；放入1.5 ml

已稀釋至1∶100的血清樣本， 孵育30 min， 去除槽內液體， 以

1.5 ml緩沖液清洗膜條3次， 1次清洗時間為5 min；放入1.5 ml

底物液， 溫育10 min， 用蒸餾水清洗膜條3次， 1次清洗時間為1 min。晾干后觀察膜條結果[3， 4]。

1. 3 觀察指標及判定標準[5] 觀察患者的陽性率。陽性：組織或細胞內有特征性綠色熒光出現或滴度≥1∶100。

1. 4 統計學方法 采用SPSS18.0統計學軟件對數據進行統計分析。計量資料以均數± 標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗；計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 兩組受檢者自身抗體陽性情況對比 研究組中檢測出1項或以上自身抗體陽性者48例， 其中AMA 6例， ANA 32例， SMA 1例， ENA 8例， LMA 1例， 自身抗體陽性率為48.0%（48/100）；對照組中檢測出1項或以上自身抗體陽性者2例， 其中AMA 1例， ANA 1例， 自身抗體陽性率為4.0%（2/50）。研究組自身抗體陽性率顯著高于對照組， 差異有統計學意義（P<0.05）。

2. 2 研究組患者HCV-RNA與自身抗體陽性關系對比 研究組HCV-RNA陽性38例， 自身抗體陽性23例（60.53%）；研究組HCV-RNA陰性62例， 自身抗體陽性25例（40.32%）。對比差異有統計學意義（P<0.05）。

3 討論endprint

丙型肝炎是由丙肝病毒引起的一種肝臟疾病， 是一種通過血液傳播病毒的疾病， 最常見的感染方式[6-8]：不安全注射做法；對醫療器械的消毒不夠徹底；輸入未經篩查的血液和血液制品。該病毒可造成急性或慢性肝炎感染， 其嚴重程度從持續幾周的輕微病癥到終身嚴重疾病不等。大量慢性感染者會出現肝硬化或肝癌。每年大約有70萬人死于與丙型肝炎相關的肝臟疾病[4]。

近年來， 臨床醫學研究發現肝炎病毒與自身免疫有一定關系， 病毒感染能夠誘發自身免疫性疾病， 而自身免疫則由靶細胞的抗原成分改變或病毒蛋白與正常組織細胞的同源性而導致， 進而使患者出現自身免疫反應[9， 10]。有數據統計， 在眾多自身免疫性疾病中檢測到AMA具有一定的診斷價值， 而約有1/3的慢性肝病患者血清中可檢測出以ANA、AMA、SMA為主的自身抗體， 其可加重損傷肝細胞， 誘發自身免疫性肝炎、原發性膽汁性肝硬化等自身免疫性疾病， 這也使自身免疫成為HCV損傷機體的重要因素之一[5]。本文通過對自身抗體與丙型肝炎的研究， 也證實了這一點。

綜上所述， HCV感染后可損害免疫系統， 進而誘發自身免疫反應， 并進一步加重損害肝臟， 使病情加劇甚至威脅患者生命安全。因此， HCV感染者有必要檢測自身抗體， 一旦抗體呈陽性， 就表明自身抗體已導致體內免疫功能出現紊亂， 這時HCV感染者應立即就醫， 并積極配合醫生進行治療， 以便早發現、早治療。所以自身抗體檢測與研究對臨床醫學治療丙型肝炎具有重要意義， 值得臨床大力推廣應用。

參考文獻

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[收稿日期：2017-05-16]endprint