miR-205通過靶向調控caspase-3表達調節神經膠質瘤的生物學行為

王 瀟

(四川友誼醫院腫瘤科，四川 成都 610000)

·論著·

miR-205通過靶向調控caspase-3表達調節神經膠質瘤的生物學行為

王 瀟

(四川友誼醫院腫瘤科，四川 成都 610000)

目的探討微小RNA-205、天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶3(cyserinly aspartate-specific protease,caspase-3)表達水平對神經膠質瘤生物學行為的影響及其可能的作用機制。方法采用實時熒光定量PCR檢測30例神經膠質瘤組織及正常腦組織中miR-205表達水平；采用脂質體轉染技術分別將miR-205 模擬物(miR-205 mimics)、對照(control mimics)、miR-205抑制物(miR-205-inhibitor)導入至U251細胞中，以Transwell實驗觀察細胞侵襲能力；采用生物信息學及熒光蛋白報告基因實驗驗證miR-205對caspase-3的靶向調控作用；采用RNA干擾技術研究U251細胞中caspase-3蛋白表達水平及細胞克隆數量變化。結果神經膠質瘤組織miR-205表達值低于正常腦組織(P<0.05),30神經膠質瘤組織中28例miR-205下調2倍以上。將miR-205模擬物或miR-205抑制劑轉染入U251細胞中發現，在miR-205的表達水平上，miR-205模擬物顯著高于對照，miR-205抑制物低于對照，差異有統計學意義(P<0.05)。miR-205模擬物轉染U251細胞后caspase-3蛋白表達高于對照轉染后細胞(P<0.05)。miR-205模擬物+pcDNA3-Wt共轉染組熒光值顯著高于對照及miR-205模擬物+pcDNA3-Mut(P<0.05)。轉染miR-205模擬物組，其細胞克隆形成明顯少于對照組及空白組，而轉染miR-205 inhibitor后，其細胞克隆形成則多于空白組(P<0.05)。結論多數神經膠質瘤存在miR-205表達下調現象，而miR-205可能通過靶向調控caspase-3影響膠質瘤細胞的侵襲、增殖、克隆形成能力，這將為進一步認識及治療神經膠質瘤提供有力依據。

神經膠質瘤；微RNAs；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3

神經膠質瘤是顱內最常見的一種腦腫瘤，在我國發病率占顱內腫瘤的40%～50%[1]。由于神經膠質瘤浸潤性生長的特點，手術無法完全切除，而放化療又易對神經系統產生毒性，該病一直處于高復發率、高病死率及低治愈率的局面[2]。因此，從分子機制角度對疾病進行干預或許可為目前的治療困境提供新的思路。微小RNA(microRNA，miRNA)在腫瘤發生及發展中占有重要調控作用，如miR-205在肺癌[3]、乳腺癌[4]、腎癌[5]等惡性腫瘤中呈現低表達，且對癌癥的增殖、侵襲、凋亡具有調控作用。但目前miR-205在神經膠質瘤中的研究涉及較少。因此，本研究將從組織及細胞水平對miR-205在神經膠質瘤中的作用及相關機制進行初步探討，以期為神經膠質瘤治療提供新的藥物靶點。……