23 763例新生兒聽力篩查聯合耳聾基因檢測在臨床中的應用

李天潔，梁建梅，王向東，王清澤，秦麗欣，楊宏潔，封紀珍*

(1.河北省石家莊市婦幼保健院優生遺傳科，河北 石家莊 050081；2.河北省石家莊市婦幼保健院婦二科,河北 石家莊 050081；3.河北省石家莊市平安醫院功能科,河北 石家莊 050021；4.河北省辛集市婦幼保健院檢驗科,河北 石家莊 052360；5.河北省石家莊市婦幼保健院保健部,河北 石家莊 050081)

·論著·

23 763例新生兒聽力篩查聯合耳聾基因檢測在臨床中的應用

李天潔1，梁建梅2，王向東3，王清澤4，秦麗欣2，楊宏潔5，封紀珍1*

(1.河北省石家莊市婦幼保健院優生遺傳科，河北 石家莊 050081；2.河北省石家莊市婦幼保健院婦二科,河北 石家莊 050081；3.河北省石家莊市平安醫院功能科,河北 石家莊 050021；4.河北省辛集市婦幼保健院檢驗科,河北 石家莊 052360；5.河北省石家莊市婦幼保健院保健部,河北 石家莊 050081)

目的通過對石家莊市23 763例新生兒聽力篩查及耳聾基因檢測數據的分析，探討聽力篩查聯合耳聾基因檢測在臨床中的應用價值。方法新生兒于出生后3 d同步進行聽力篩查及常見耳聾基因檢測。其中聽力篩查采用初篩耳聲發射(otoacoustic emission，OAE)和復篩OAE+自動聽性腦干反應兩步法，常見耳聾基因檢測采用熒光聚合酶鏈式反應法(熒光PCR)，最后對聯合篩查結果進行統計分析。結果23 763例新生兒中有20 443例通過了聽力初篩，初篩通過率為86.03%(20 443/23 763)；3 087例參加復篩的新生兒中有2 964例通過了復篩，復篩通過率為96.02%(2 964/3 087)。23 763例新生兒中有960例攜帶常見耳聾基因突變，隨機人群常見耳聾基因突變率為4.04%(960/23 763)；123例未通過聽力篩查的新生兒中有20例攜帶常見耳聾基因突變，高危人群攜帶率為16.26%(20/123)，高危人群組常見耳聾基因突變攜帶率高于隨機人群組(P<0.05)。最終在37例進行聽力學診斷的新生兒中確診中度耳聾1例，重度耳聾4例，確診為聽力損失的5例新生兒中有1例為235delC純合突變型，1例為235delC/299-300delAT復合雜合突變型，2例為IVS7-2A>G純合突變型，1例為IVS7-2A>G/2168A>G復合雜合突變型。結論將聯合篩查應用于臨床可以擴大聽力障礙的防治范圍，有效提高新生兒耳聾的檢出率，有助于提早發現新生兒聽力障礙并實施早期個性化靶向預防，為患兒提供有針對性的醫療咨詢與干預。

聽力檢查；基因檢測；嬰兒，新生

聽力障礙是新生兒常見的出生缺陷，聽力障礙在新生兒期的發生率為1‰～1.86‰[1]。聽覺是語言發育的基礎，聽力障礙會影響語言發育，嚴重者還有行為異常，給患兒的交流和學習帶來困難[2]。新生兒聽力篩查工作的廣泛開展使得人們能早日發現聽力障礙患兒，極大程度降低了因聾致啞的發生率。常見耳聾基因檢測有助于明確聽力障礙患兒的遺傳學病因，并能提早發現遲發性耳聾，避免藥物性耳聾，以達到預防后天耳聾發生的目的。因此，將聽力篩查聯合耳聾基因檢測應用于臨床有助于聽力障礙的早發現、早診斷、早治療[3]，這對降低出生缺陷、提高人口素質有著及其重要的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年1月—2017年5月在河北省石家莊市婦幼保健院出生并進行聽力篩查聯合常見耳聾基因檢測的新生兒23 763例，男性12 398例，女性11 365例。

1.2 篩查方法 新生兒出生3d后采用初篩耳聲發射(otoacousticemissionOAE)進行聽力初篩，未通過初篩的新生兒于出生42d采用OAE+自動聽性腦干反應(automatedauditorybrainstemresponse,AABR)進行聽力復篩，未通過復篩的新生兒于出生3個月進行聽力學診斷。常見耳聾基因檢測于新生兒出生后3d采足跟血3滴于專用濾紙片上自然晾干，應用熒光PCR法對常見耳聾基因GJB2(235delC、299-300delAT)、SLC26A4(IVS7-2A>G、2168A>G)、mtDNA12SrRNA(1555A>G)進行檢測。

1.3 隨訪方法 對于目標隨訪對象定期召回檢查，不能回院者定期電話隨訪。

1.4 統計學方法 應用SPSS19.0統計學軟件分析數據，計數資料比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 聽力篩查結果 23 763例新生兒中20 443例通過了聽力初篩，初篩通過率為86.03%(20 443/23 763)。初篩未通過的3 320例新生兒中有3 087例于出生后42d接受了聽力復篩，其中2 964例通過了復篩，復篩通過率96.02%(2 964/3 087)。未通過復篩的123例新生兒家屬被告知于新生兒3個月時進行聽力學診斷，僅有37例前來確診，最終在37例進行聽力學診斷的新生兒中確診5例聽力損失，其中3例為前庭導水管擴張綜合征，2例為先天遺傳性耳聾。

2.2 常見耳聾基因檢測結果 23 763例新生兒(隨機人群組)中共檢出960例耳聾基因突變攜帶者，隨機人群常見耳聾基因突變攜帶率為4.04%(960/23 763)；未通過聽力篩查的123例新生兒(高危人群組)中有20例攜帶常見耳聾基因突變，高危人群常見耳聾基因突變攜帶率為16.26%(20/123)。高危人群組常見耳聾基因突變攜帶率高于隨機人群組，差異有統計學意義(χ2=46.445，P=0.000)。見表1，2。

確診為聽力損失的5例新生兒中有1例為235delC純合突變型，1例為235delC/299-300delAT復合雜合突變型，2例為IVS7-2A>G純合突變型，1例為IVS7-2A>G/2168A>G復合雜合突變型。其中攜帶235delC雜合/299-300delAT雜合復合雜合突變型的新生兒為中度耳聾，其余4例均為重度耳聾。

表1 23 763例新生兒常見耳聾基因突變結果Table 1 Mutation results of common deafness gene in 23 763 newborns

表2 123例未通過聽力篩查的新生兒耳聾基因突變結果Table 2 Mutation results of deafness genes in 123 infants unpassed the hearing screening

3 討 論

3.1 聽力篩查聯合耳聾基因檢測意義重大 OAE是一種聲能量，它產生于耳蝸，并經過聽骨鏈和鼓膜傳導到外耳道[4]，只有在中耳功能正常的前提下才能檢測到此聲信號。OAE的臨床意義為提供了一條檢測耳蝸放大功能和外毛細胞功能完整性的途經，但它并不能檢測出聽覺中樞及神經傳導通路有無病變[5]。AABR則是OAE的有效補充[6],能全面反映耳蝸、聽神經傳導通路和腦干聽覺功能狀態。因此，臨床常用初篩使用OAE，未通過者使用AABR進行復篩的聯合篩查方式以提高檢測的準確率[7]。但是即便OAE聯合AABR進行檢測，聽力篩查只能反映篩查當時的聽力情況，不能反映篩查時尚無表型的耳聾，耳聾基因檢測則進一步提高了聽力篩查的檢出率，不但可以提前檢出遲發性耳聾和藥物性耳聾，而且可以對患者進行遺傳咨詢與生活指導[8]。本研究共計聯合篩查23 763例新生兒，受試者來源于石家莊市區及周圍各縣區，所得聽力篩查通過率及耳聾基因攜帶率有地域代表性，基因篩查中以GJB2基因235delC位點突變頻率最高，在先天遺傳性耳聾患者檢測時應首先考慮篩查該位點。

3.2 復篩通過率高的原因分析 本研究未通過初篩的新生兒3 320例中有3 087例于產后42 d接受了聽力復篩，2 964例通過了AABR篩查，復篩通過率為96.02%(2 964/3 087)。對于通過復篩的2 964例新生兒而言，有可能是因為新生兒外耳道和中耳腔存在羊水、胎脂、胎性殘積物滯留，對傳入的聲刺激和傳出的反應信號造成衰減，導致耳聲發射能量減弱或消失，造成了聽力篩查“未通過”的假象。隨著吃奶、哭鬧等帶動軟骨運動，可以使一部分羊水和胎性殘積物排除，從而在產后42 d復篩時順利通過[9]。另外，早產兒和低體質量兒聽力傳導和神經系統發育可能不成熟[10]，住院期間聽力篩查未通過屬暫時性，隨著身體各器官的發育，產后42 d復查時聽力篩查通過率會明顯提高。

3.3 耳聾基因檢測對臨床的指導意義

3.3.1 提早確診時間、提高確診率 新生兒耳聾基因檢測可以將遺傳性耳聾的確診時間提前到出生后2周，并避免了不確定因素的影響，提高了診斷效率[11]，提高了患兒家長對遺傳性耳聾的認識。耳聾基因檢測還可對出生時通過了聽力篩查但未通過基因檢測的新生兒行進一步基因診斷及聽力學監測[12]，避免遲發性耳聾和藥物性耳聾的發生。

3.3.2 未通過聽力篩查的新生兒是高危人群 本研究結果顯示高危人群組常見耳聾基因突變攜帶率高于隨機人群組(P<0.05)。說明未通過聽力篩查的新生兒是攜帶耳聾基因突變的高危人群，應引起家長的高度重視，應對患兒家長進行遺傳性耳聾的宣教及育兒指導，對攜帶有耳聾基因突變的新生兒應定期進行聽力學檢測，密切關注其聽力變化情況。

3.3.3 特殊病例跟蹤 本研究中有1例235delC純合突變型新生兒通過了聽力篩查并于后期3年的隨訪及聽力學檢測中均證明聽力發育良好，其父母均為235delC雜合突變型且純音聽閾測試結果正常，三人基因檢測結果均得到測序驗證。有研究顯示通過了聽力篩查的攜帶有GJB2純合突變基因型的新生兒最終確診聽力損失的時間為12～60個月[13]，但這只是基于歐美人群高發的35delG位點。之后國內也曾有攜帶235delC純合突變的新生兒在出生時通過了新生兒聽力篩查的報道[14]。無論是35delG還是235delC，其致聾特點均是因堿基的缺失導致了基因的框移突變，使翻譯過程過早終止，從而引發蛋白質功能障礙，導致聽力損失[15],因此，不排除該新生兒患有遲發性耳聾的可能，對此家長也應引起重視，定期對新生兒進行聽力檢測，并跟蹤隨訪。

綜上所述，將新生兒聽力篩查聯合耳聾基因檢測應用于臨床，能發現部分聽力篩查不能發現的遲發性耳聾和藥物性耳聾高危患兒，擴大重點隨訪-干預對象，有效提高隨訪率并指導臨床提早作出預警，做到早發現、早診斷、早治療，降低聾啞患兒的發生率，具有長遠的現實意義[16]。

[1] 李倩,王秋菊.新生兒聾病易感基因篩查的研究進展[J].聽力學及言語疾病雜志,2015,23(1):91-96.

[2] 王秋菊,趙亞麗,蘭蘭,等.新生兒聾病基因篩查實施方案與策略研究[J].中華耳鼻喉頭頸外科雜志,2007,42(11):809-813.

[3] 封紀珍,李素芳,李天潔,等.石家莊市新生兒聽力及耳聾基因聯合篩查結果分析[J].河北醫科大學學報,2015,36(11):1271-1275.

[4] 段聰軍.新生兒耳聲發射、AABR與耳聾基因聯合篩查的臨床應用[J].中國婦幼保健,2015,30(26):4515-4517.

[5] 陶崢,吳皓,李蘊.新生兒普遍聽力篩查假陰性分析[J].聽力學及言語疾病雜志,2007,15(1):16-18.

[6] 徐素香,嚴菊花,韓霞,等.AABR在嬰兒聽力篩查中的應用[J].中國民族民間醫藥,2010,19(5):59，64.

[7] Lin HC,Shu MT,Lee KS. Comparison of hearing screening programs between one step with transient evoked otoacoustic emission(TEOAE) and two step with TEOAE and automated auditory brainstem response[J]. Laryngoscope,2005,115(11):1957-1962.

[8] 劉穎,楊杰,楊淑梅,等.聽力損失高危新生兒聽力與耳聾易感基因聯合篩查效果[J].中華圍產醫學雜志,2016,19(7):497-501.

[9] 歷建強,紀育斌,丁海娜,等.1469例新生兒TEOAE與AABR聽力篩查結果分析[J].聽力學及言語疾病雜志,2010,18(3):233-235.

[10] 趙恒靜,李紅輝,蘇瓊鵬.NICU 1956例患兒聽力篩查陽性率分析[J].中國臨床新醫學,2009,2(6):567-569.

[11] 封紀珍,李天潔,肖會者.5018例新生兒耳聾基因檢測結果分析[J].臨床兒科雜志,2015,33(2):196-197.

[12] 王秋菊.新生兒聽力及基因聯合篩查——中國模式與未來發展[J].臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志,2014,28(22):1733-1736.

[13] Norris VW,Arnos KS,Hanks WD,et al. Does universal newborn hearing screening identify all children with GJB2 (Connexin 26) deafness? Penetrance of GJB2 deafness[J]. Ear Hear,2006,27(6):732-741.

[14] 楊威,陳觀明,付四清.新生兒聽力篩查與GJB2基因235delC突變篩查的聯合實施[J].中國婦幼保健,2011,26(9):1395-1396.

[15] 余嘯,陳波蓓,項海杰,等.221例攜帶GJB2基因突變的非綜合征型耳聾先證者及家系成員基因型與聽力損失程度的相關分析[J].中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志,2013,48(12):991-995.

[16] 周佳霖,歷建強,羅仁忠,等.聽力復篩未通過的新生兒常見聾病易感基因篩查結果分析[J].聽力學及言語疾病雜志,2011,19(1):14-17.

(本文編輯：趙麗潔)

Clinical application of hearing screening combined with deafness gene detection in 23 763 neonates

LI Tian-jie1, LIANG Jian-mei2, WANG Xiang-dong3, WANG Qing-ze4, QIN Li-xin2, YANG Hong-jie5, FENG Ji-zhen1*

(1.DepartmentofEugenicsandGenetics,theHospitalofMaternalandChildrenHealthCareofShijiazhuangCity，HebeiProvince，Shijiazhuang050081，China； 2.DepartmentofGynaecology,theHospitalofMaternalandChildrenHealthCareofShijiazhuangCity，HebeiProvince，Shijiazhuang050081，China； 3.DepartmentofFunctional，thePinganHospitalofofShijiazhuangCity，HebeiProvince，Shijiazhuang050021，China； 4.DepartmentofClinicalLaboratory，theHospitalofMaternalandChildrenHealthCareofXinjiCity，HebeiProvince，Xinji052360，China；5.DepartmentofHealth,theHospitalofMaternalandChildrenHealthCareofShijiazhuangCity，HebeiProvince，Shijiazhuang050081，China)

ObjectiveToexplorethevalueofhearingscreeningcombineddeafnessgenesdetectioninclinicalapplicationbyanalyzingthedatafrom23 763newbornsinShijiazhuang.MethodsNewbornbabiesundergosimultaneoushearingscreeningandcommondeafnessgenetestingat3dafterbirth.Thetwo-stepscreeningmethodwasusedinhearingscreening.Otoacousticemission(OAE)wasusedatthebeginningofthescreenandOAE+automatedauditorybrainstemresponsewasusedonthosewhofailedthefirstscreening.CommondeafnessgenesweredetectedbyfluorescentPCR.Finallyweanalyzedthestatisticaldatasofcombinedscreening.Results20 443fromthe23 763newbornspassedfirsthearingscreeningandthepassingratewas86.03%(20 443/23 763). 3 087newbornsreceptthesecondhearingscreeningand2 964passedit.Thesecondpassingratewas96.02%(2 964/3 087). 960newbornscarriedmutationsofcommondeafnessgenesandthecarrierratewas4.04%(960/23 763)fromtherandompopulationof23 763.Thecarrierratewas16.26%(20/123)inthose123infantsunpassedthehearingscreeningwhowerecalledhighriskpopulation.Significationdifferenceswereobservedbetweenthetwogroupsofrandomandhighrisk(P<0.05).Finally5caseswerediagnosedashearinglossinthe37newbornswhowererecalledforaudiologicaldiagnosis.Wefounda235delChomozygousmutationanda235delC/299-300delATcompoundheterozygousinGJB2geneand2casesofIVS7-2A>GhomozygousmutationandaIVS7-2A>G/ 2168A>GcompoundheterozygousinSLC26A4geneamongthe5hearingloss.The235delC/299-300delATcompoundheterozygouswasdiagnosedasmoderatedeafnessandtheotherswereprofoundhearingloss.ConclusionThesynchronousdetectionforclinicalapplicationcouldexpandthescopeofdeafnesspreventionandimprovethedetectionrateofneonataldeafnesseffectively.Itcontributestotheearlydetectionofneonatalhearingdisordersandprovidesearlyindividualizedtargetedprevention.Itcanprovidetargetedmedicaladviceandinterventionforchildrenwithhearingdisorders.

hearingtests；genetictesting；infant,newborn

2017-07-12；

2017-08-16

河北省醫學科學研究重點課題(20170216)

李天潔(1982-)，女，河北安國人，河北省石家莊市婦幼保健院主管檢驗師，醫學碩士，從事耳聾基因等新生兒疾病及孕產婦疾病的篩查研究。

*通訊作者。E-mail：litianjie616@163.com

R764.04

A

1007-3205(2017)09-1054-04

10.3969/j.issn.1007-3205.2017.09.015