缺血后處理心肌細胞線粒體比較蛋白質組學的研究

張 琳，周雯靜，黃建廷，喻 田

(貴州省麻醉與器官保護基礎研究重點實驗室，貴州 遵義 563099)

基礎醫學研究

缺血后處理心肌細胞線粒體比較蛋白質組學的研究

張 琳，周雯靜，黃建廷，喻 田

(貴州省麻醉與器官保護基礎研究重點實驗室，貴州 遵義 563099)

目的以大鼠心肌缺血再灌注損傷模型，利用蛋白質組學對純化的大鼠心肌細胞線粒體進行分析和鑒定，探討缺血后處理大鼠心肌細胞線粒體蛋白表達的變化。方法24只大鼠隨機分為正常組(Normal，Nor)、缺血再灌注損傷組(Control，Con)、缺血后處理組(ischemic postconditioning，IPO)、5-羥葵酸拮抗缺血后處理組(5-hydroxydecanoate，5-HD+IPO)，利用Langendorff灌注裝置構建各組大鼠離體心臟模型。以Nycodenz密度梯度離心法分離大鼠心肌線粒體，通過Western blot方法檢測其純度，提取各組線粒體蛋白，進行2D-DIGE分離，分析差異表達蛋白，進行MALDI-TOF-MS鑒定。結果與Nor組比較，Con組NADH脫氫酶亞基(NDUFA10)表達水平降低3.84倍；IPO和Con組比較：NDUFA10和琥珀酸脫氫酶-黃素蛋白(SDHA)的蛋白表達水平分別減少3.33倍和1.68倍。與IPO組比較，5-HD+IPO組的SDHA表達水平升高1.65倍。結論心肌缺血再灌注損傷降低了NDUFA10蛋白的活性，可能在缺血后處理線粒體NADH呼吸鏈穩定的維持過程中發揮作用，SDHA蛋白和線粒體敏感性K+通道(mitoKATP)可能同時在缺血后處理內源性保護機制中具有作用。

缺血后處理；線粒體；蛋白質組學；2D-DIGE；質譜分析；心肌保護

缺血后處理( ischemic postconditioning,IPO)，是指心肌缺血后，進行多次短時間再灌注/缺血的循環，再進行長時間的再灌注，從而產生減輕心肌缺血再灌注的損傷作用[1]。已有研究明確，與缺血預處理相似，在心臟再灌注早期進行缺血后處理可減輕心肌缺血再灌注造成的損傷，且在臨床上具有應用價值[2]。……