雙抗原夾心酶聯免疫吸附試驗對丙型肝炎病毒抗體檢測靈敏度及特異性的影響

李亞勤

（河南省偃師市中醫院檢驗科偃師471900）

雙抗原夾心酶聯免疫吸附試驗對丙型肝炎病毒抗體檢測靈敏度及特異性的影響

李亞勤

（河南省偃師市中醫院檢驗科偃師471900）

目的：探究雙抗原夾心酶聯免疫吸附試驗對丙型肝炎病毒抗體（抗-HCV）檢測靈敏度及特異性的影響。方法：選取2016年5月～2017年4月我院進行手術和血液透析前抗-HCV檢測的患者270例，經血液篩查（熒光定量PCR法）抗-HCV陽性12例，抗-HCV陰性258例，采用雙抗原夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）和間接ELISA分別對270例患者血清進行抗-HCV檢測，比較兩種檢測方法的特異性、靈敏度。結果：雙抗原夾心ELISA法靈敏度、特異性均高于間接ELISA法（P＜0.05）。結論：雙抗原夾心酶聯免疫吸附試驗可提高丙型肝炎病毒抗體檢測靈敏度及特異性，可作為臨床血液標本篩查首選方法。

丙型肝炎；雙抗原夾心酶聯免疫吸附試驗；間接酶聯免疫吸附法

丙型肝炎是常見傳染性疾病，是感染丙型肝炎病毒（HCV）后導致的全球性傳染病。據統計[1]，HCV感染率在3%左右，每年全世界約1.8億人感染HCV，每年新發丙型肝炎約占3.5萬。HCV主要通過血液進行傳播，為避免因遺漏或未查出HCV陽性的感染患者，造成手術器械或透析儀器污染而引起HCV院內感染爆發等嚴重后果，要求對手術患者術前以及血液透析患者透析前進行抗-HCV檢測[2]。本研究旨在探討雙抗原夾心ELISA試驗及間接ELISA實驗對丙型肝炎病毒抗體檢測靈敏度及特異性的影響。現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2016年5月～2017年4月我院進行手術和血液透析前抗-HCV檢測的患者270例為研究對象。其中，男116例，女154例；年齡23～64歲，平均年齡（43.47±5.62）歲。所有患者血液經熒光定量PCR法（金標準）檢測出抗-HCV陽性12例，抗-HCV陰性258例。血清標本采集均符合標準，排除嚴重心肺疾病，患者簽署同意書。本研究經我院倫理委員會批準。

1.2 試劑與設備EzMateTM401全自動加樣系統由上海勱瑞生物科技有限公司提供，酶免分析系統由濟南華舜儀器有限公司提供，MW-12T洗板機由深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司提供。間接ELISA試劑盒由上海榮盛生物技術有限公司提供，雙抗原夾心ELISA試劑盒由北京萬泰生物藥業股份有限公司提供。

1.3 方法清晨空腹抽血5 ml，以3 000 r/min離心15 min，留取血清，分別采用間接ELISA試劑盒與雙抗原夾心ELISA試劑盒進行檢測，嚴格按說明書進行操作。OD值＜臨界值為陰性，OD值≥臨界值為陽性，臨界值=陽性對照均值×0.1－陰性對照均值[3]。1.4觀察指標觀察兩種方法陽性、陰性檢測情況，以抗-HCV的陽性檢出率和陰性檢出率評價這兩種方法的靈敏度和特異性。

1.5 統計學分析數據處理采用SPSS22.0統計學軟件，計量資料以表示，采用t檢驗，計數資料用率表示，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

270份標本分別通過雙抗原夾心ELISA法和間接ELISA法進行檢測，12份抗-HCV陽性標本雙抗原夾心ELISA法的陽性檢出率為91.67%（11/12），間接ELISA法的陽性檢出率為41.67%（5/12），雙抗原夾心ELISA法和間接ELISA法分別有1份和7份假陰性標本，雙抗原夾心ELISA法靈敏度高于間接ELISA法，P＜0.05，差異具有統計學意義；258份抗-HCV陰性標本雙抗原夾心ELISA法的陰性檢出率為98.84%（255/258），間接ELISA法陰性檢出率為94.57%（244/258），雙抗原夾心ELISA法特異性為98.84%，高于間接ELISA法94.57%，P＜0.05，差異具有統計學意義。見表1。

表1 兩種方法檢測結果比較（份）

3 討論

丙型肝炎可引起肝臟慢性炎癥病變、纖維化，甚至轉變成肝硬化、肝癌，預測未來20年由HCV感染引起肝衰竭、肝癌病死率將持續上升，已成為危害社會和公共衛生安全問題之一[4]。HCV是丙型肝炎發病主要原因，主要通過血液等途徑傳播，臨床目前主要采用ELISA實驗檢測抗-HCV判定血液是否含有HCV病毒。ELISA實驗可分為間接ELISA實驗和雙抗原夾心ELISA實驗。但間接ELISA法存在一定假陽性，主要由于實驗所用試劑均以二抗作酶結合物，而血清中IgG含量高，故少量的非特異性吸附可造成假陽性結果，血清中類風濕因子等也可能干擾檢測結果。此外，間接ELISA實驗需通過稀釋樣本的措施降低實驗反應過程的板底值，易對試劑造成污染，降低檢測靈敏度，且操作復雜，檢測時間較長，不利于大規模開展篩查，臨床應用受限。雙抗原夾心ELISA法是利用酶標記抗原代替酶標記二抗，檢測的是包括IgG、IgM等在內的總抗體，彌補了間接法的缺陷，且可對抗體進行兩次特異性反應，降低間接法酶標抗引起的假陽性[5]。

本研究結果顯示，雙抗原夾心ELISA法靈敏度、特異性均高于間接ELISA法（P＜0.05）。說明雙抗原夾心酶聯免疫吸附試驗可提高丙型肝炎病毒抗體檢測靈敏度及特異性，是檢測丙型肝炎病毒抗體較為理想的方法。

[1]武麗娟.3種酶聯免疫吸附試驗試劑檢測丙型肝炎抗體結果分析[J].國際檢驗醫學雜志,2014,35(23):3246-3248

[2]陜柏峰,張劍英,張柳明,等.雙抗原夾心法檢測抗丙型肝炎病毒抗體的應用研究[J].山西醫藥雜志,2016,45(16):1940-1941

[3]于國英,黃群,馬玉秀.慢性丙型肝炎抗病毒治療進展[J].臨床肝膽病雜志,2015,31(4):626-629

[4]黃乙清.丙型肝炎病毒抗體的兩種檢測方法結果比較[J].海南醫學, 2016,27(23):3935-3936

[5]van Rooijen M,Heijman T,de Vrieze N,et al.Earlier Detection of Hepatitis C Virus Infection Through Routine Hepatitis C Virus Antibody Screening ofHuman Immunodeficiency Virus-Positive Men Who Have Sex With Men Attending ASexually Transmitted Infection Outpatient Clinic:A Longitudinal Study[J].Sexually Transmitted Diseases,2016,43(9):560-565

R446.61

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10.13638/j.issn.1671-4040.2017.08.060

2017-07-15）