YAP調控Wnt信號通路影響肝癌細胞凋亡的研究

崔 宏， 楊楠木， 賀 濤， 萬百順， 韓 風

河南省腫瘤醫院 鄭州大學附屬腫瘤醫院肝膽胰腺外科，河南 鄭州 450052

論著·肝相關疾病

YAP調控Wnt信號通路影響肝癌細胞凋亡的研究

崔 宏， 楊楠木， 賀 濤， 萬百順， 韓 風

河南省腫瘤醫院 鄭州大學附屬腫瘤醫院肝膽胰腺外科，河南 鄭州 450052

目的探討Yes相關蛋白(Yes associated protein, YAP)對肝癌細胞凋亡的影響。方法Western blotting方法檢測人肝癌細胞HuH-7、HepG2、SNU-449和人正常肝細胞7702中YAP的表達水平。在肝癌細胞中轉染YAP小干擾RNA1(YAP siRNA1組)和YAP小干擾RNA2(YAP siRNA2組)，同時轉染對照siRNA(siRNA-NC組)，未轉染組只加入轉染試劑，培養48 h后，Western blotting檢測細胞中YAP水平，篩選出干擾效率較高的YAP siRNA2繼續研究。MTT檢測細胞增殖，流式細胞術檢測細胞凋亡，激光掃描共聚焦顯微鏡法檢測活性氧(ROS)水平，Western blotting檢測細胞中β-連環蛋白(β-catenin)、Wnt信號通路下游靶基因(C-myc)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)蛋白水平。結果人肝癌細胞HuH-7、HepG2、SNU-449中YAP表達水平均高于人正常肝細胞7702，且在HepG2細胞中YAP的表達水平最高。YAP siRNA1、YAP siRNA2能夠成功干擾肝癌細胞中YAP的表達水平，且YAP siRNA2的干擾效率最高。YAP siRNA2組細胞存活率和細胞中β-catenin、C-myc水平均低于未轉染組，凋亡率和細胞中Cleaved Caspase-3、ROS水平均高于未轉染組(P<0.01)。結論干擾YAP表達后能夠促進肝癌細胞凋亡，抑制肝癌細胞增殖，Wnt信號通路是其可能的作用機制之一。

肝癌；凋亡；增殖；Yes相關蛋白

肝細胞癌又稱為肝癌,是目前世界范圍內的第5大惡性腫瘤[1]。肝癌在中國的死亡率在全部惡性腫瘤中位居第2位[2]。肝癌的發生與癌基因有關，這些癌基因能夠促進肝癌細胞的增殖，抑制肝癌細胞的凋亡導致肝癌細胞中癌癥發生有關的信號通路異常激活引起肝癌的惡化[3-4]。Yes相關蛋白(Yes associated protein, YAP)是一種癌基因，在宮頸癌、肝癌、腎癌等多種癌癥的形成過程中發揮促進作用[5-7]。……