DEK基因在肝癌中的表達(dá)及靶向抑制其表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞增殖及凋亡的影響

林云志，唐 浩，周亞龍，趙曉彪，曾 凱

解放軍第187醫(yī)院肝膽外科，海南 ?？?571158

DEK基因在肝癌中的表達(dá)及靶向抑制其表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞增殖及凋亡的影響

林云志，唐 浩，周亞龍，趙曉彪，曾 凱

解放軍第187醫(yī)院肝膽外科，海南 ?？?571158

目的探討DEK基因在肝癌中的表達(dá)及RNA干擾抑制其表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞增殖及凋亡的影響及機(jī)制。方法以人正常肝細(xì)胞HL-7702作為對(duì)照，RT-PCR檢測(cè)人肝癌HepG2、Huh-7、SMMC-7721、SNU-475細(xì)胞中DEK mRNA表達(dá)；DEK-siRNA轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞，同時(shí)轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照和空白對(duì)照，轉(zhuǎn)染48 h后Western blotting檢測(cè)各組細(xì)胞中DEK、Cleaved caspase 3、β-catenin、Cyclin D1蛋白表達(dá)；CCK8實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)細(xì)胞的增殖及凋亡情況。結(jié)果各個(gè)肝癌細(xì)胞中DEK mRNA表達(dá)均顯著高于正常細(xì)胞，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);DEK基因在HepG2細(xì)胞中表達(dá)最高，選擇作為后續(xù)研究對(duì)象；轉(zhuǎn)染DEK-siRNA后DEK蛋白表達(dá)顯著降低；DEK-siRNA組細(xì)胞存活率及β-catenin、Cyclin D1蛋白表達(dá)顯著低于空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組，細(xì)胞凋亡率和Cleaved caspase 3蛋白表達(dá)顯著高于空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論抑制肝癌HepG2細(xì)胞中DEK基因可降低癌細(xì)胞的增殖及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，其機(jī)制與Wnt/β-catenin信號(hào)通路的調(diào)控有關(guān)。

肝癌；DEK基因；增殖；凋亡；Wnt/β-catenin信號(hào)通路

肝癌是常見(jiàn)的原發(fā)性惡性腫瘤之一，具有早期診斷困難、發(fā)展迅速、惡性程度高、治療困難、病死率高等特點(diǎn)，對(duì)人類的健康和生存造成了嚴(yán)重的威脅[1]。肝癌的發(fā)生是多種因素協(xié)同作用的結(jié)果，與多種基因的表達(dá)異常有直接或間接聯(lián)系。因此，尋找引發(fā)肝癌發(fā)生的關(guān)鍵分子并探索治療手段成為目前肝癌研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。DEK基因位于人類6號(hào)染色體短臂上，是一個(gè)磷酸化的蛋白[2]。最近的研究[3-4]表明，DEK基因在結(jié)腸癌、宮頸癌等多種人類腫瘤中有高表達(dá)，其表達(dá)與腫瘤的發(fā)生相關(guān)，可能作為腫瘤生物治療的新靶點(diǎn)。但DEK基因?qū)Ω伟┑挠绊懠白饔脵C(jī)制尚不明確。因此，本研究通過(guò)RNA干擾技術(shù)沉默肝癌細(xì)胞中DEK基因的表達(dá)，并研究沉默后肝癌細(xì)胞的增殖及凋亡情況，并進(jìn)一步探討其機(jī)制，以期為該病的分子診斷及靶向治療提供理論基礎(chǔ)?！?br>