解脲支原體和HR-HPV感染與宮頸病變的相關(guān)性研究

鐘匯 徐兩蒲 邱華紅 毛曉丹 孫蓬明

解脲支原體和HR-HPV感染與宮頸病變的相關(guān)性研究

鐘匯1徐兩蒲1邱華紅1毛曉丹2孫蓬明2

目的了解宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）和宮頸癌患者宮頸分泌物解脲支原體（UU）感染情況，探討UU、HR-HPV與宮頸病變的相關(guān)性。方法選取2012年1月—2016年1月福建省婦幼保健院因?qū)m頸癌或CIN住院的患者400例設(shè)為病例組，隨即抽取同期年齡匹配因良性疾病住院患者458例為對(duì)照組，采用液體培養(yǎng)法檢測(cè)UU感染情況以及PCR-反向點(diǎn)雜交技術(shù)進(jìn)行HPV基因分型。結(jié)果HR-HPV在病例組和對(duì)照組中感染率分別為88．5%和19．9%，病例組HR-HPV感染率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；UU在病例組和對(duì)照組中感染率分別為29．0%和9．2%，病例組UU感染率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；以HR-HPV不同的感染狀態(tài)進(jìn)行分組，在HR-HPV陽性組中，病例組中UU感染率與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0．05）；HR-HPV陰性組中，病例組中UU感染率與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0．05）。結(jié)論UU對(duì)HR-HPV導(dǎo)致的宮頸病變存在協(xié)同作用。

高危型人乳頭瘤病毒；解脲支原體；宮頸病變

宮頸癌是危害世界婦女健康和生命的生殖道惡性腫瘤之一，據(jù)報(bào)道，每年全球新增病例達(dá)47萬多人，其中我國(guó)占28.7%[1]，從宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）開始到宮頸癌過程經(jīng)過幾年甚至十幾年，現(xiàn)已明確高危型人乳頭狀病毒（HR-HPV）的感染是宮頸癌發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素，大部分女性在感染病毒數(shù)月后能夠自行清除，僅有小部分婦女感染HR-HPV進(jìn)而導(dǎo)致宮頸病變[2]，這可能因其中存在其他病原體感染提高HPV易感性使其持續(xù)反復(fù)感染，進(jìn)而發(fā)生癌變。

解脲支原體是寄生于女性泌尿生殖道較為常見的一種條件致病性微生物，是引起女性非淋菌性尿道炎、盆腔炎的主要病原體。有研究表明[3]，支原體感染可能與CIN的發(fā)生有關(guān)，但UU是HR-HPV導(dǎo)致CIN/宮頸癌的輔助因素還是一個(gè)獨(dú)立因素，需要進(jìn)一步探討，故本文將我院住院收治的經(jīng)病理確診的400例宮頸癌/CIN患者設(shè)為病例組，另挑選458例年齡匹配良性疾病患者為對(duì)照組，對(duì)其HR-HPV和UU的感染情況進(jìn)行回顧性分析和探討，結(jié)果如下。

1 資料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取我院2012年1月—2016年1月入院收治經(jīng)病理確診的400例CIN/宮頸癌患者為病例組，年齡22～68歲，平均年齡（46.5±10.8）歲，將其分為宮頸癌（180例）、CINIII（90例）、CINII（70例）、CINI（60例）四個(gè)亞組；另選同期458例與病例組年齡匹配的婦科良性疾病患者為對(duì)照組，年齡24～65歲，平均（45.5±12.5）歲。所有患者詳細(xì)登記臨床資料，白帶常規(guī)檢查排除滴蟲、念珠菌、細(xì)菌性陰道病及淋球菌，取標(biāo)本前3天未進(jìn)行任何陰道灌藥清洗等，1周未用過抗生素。

1.2 研究方法與試劑

1.2.1 標(biāo)本采集 由專業(yè)婦科醫(yī)生用窺陰器暴露宮頸，用干棉球擦去陰道或?qū)m頸口過多分泌物，用無菌長(zhǎng)棉拭子插入宮頸管內(nèi)，緩慢旋轉(zhuǎn)3圈采集宮頸分泌物后取出，用于UU培養(yǎng)；另再用宮頸細(xì)胞收集專用宮頸刷插入宮頸口，順時(shí)針旋轉(zhuǎn)3～5圈，收集宮頸脫落上皮細(xì)胞，放入專用試管中保存用于HRHPV檢測(cè)。

1.2.2 UU檢測(cè) 采用培養(yǎng)基試劑盒，選擇性液體肉湯培養(yǎng)法，通過肉湯顏色變化判讀結(jié)果，以＞1 000顏色變化單位（CCU）/ml表示陽性。所用試劑來自法國(guó)梅里埃公司。

1.2.3 HPV基因分型檢測(cè) 采用深圳亞能生物技術(shù)有限公司提供的HPV PCR-反向點(diǎn)雜交基因分型檢測(cè)試劑盒，經(jīng)過HPV提取、PCR擴(kuò)增、雜交、洗膜、顯色等過程。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病例組和對(duì)照組HR-HPV、UU的感染率

病例組HR-HPV的感染率為88.5%，對(duì)照組HR-HPV的感染率為19.9%，病例組HR-HPV感染率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=402.850，P=0.000）。其中病例組分為宮頸癌、CINIII、CINII、CINI組四個(gè)亞組，感染率分別為97.2%、90.0%、81.4%、68.3%，均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì) 學(xué) 意 義（χ2=318.047，P=0.000；χ2=171.788，P=0.000；χ2=114.063，P=0.000；χ2=65.619，P=0.000），HR-HPV的感染率隨著宮頸病變級(jí)別的增加而升高（P＜0.001），見表1。

病例組UU的感染率為29.0%，高于對(duì)照組的9.2%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=55.884，P=0.000）。其中病例組分為宮頸癌、CINIII、CINII、CINI組四個(gè)亞組、UU感染率分別為30.6%、31.1%、28.6%、21.7%，均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=45.837，P=0.000；χ2=32.499，P=0.000；χ2=22.053，P=0.000；χ2=8.729，P=0.006），而四個(gè)亞組組間UU感染率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.980，P＞0.05），見表1。

2.2 UU感染在不同HR-HPV感染情況中與宮頸病變發(fā)生的關(guān)系

以HR-HPV感染狀態(tài)的不同進(jìn)行分層，HR-HPV陽性組中，病例組UU感染率與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；HR-HPV陰性組中，病例組UU感染率與對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

3 討論

宮頸癌是女性生殖道發(fā)病率最高的惡性腫瘤，隨著流行病學(xué)的深入研究，人們認(rèn)識(shí)到從CIN到宮頸癌的發(fā)生進(jìn)展是漫長(zhǎng)、多因素共同作用的結(jié)果。而HR-HPV感染是宮頸癌發(fā)生的主要原因，而本文結(jié)果提示，病例組HR-HPV的感染率為88.5%，高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。且HR-HPV的感染率隨著宮頸病變級(jí)別的增加而逐漸升高（P＜0.001），再次證明了HR-HPV感染與宮頸病變的關(guān)系。然而HPV感染很普遍，但只有5%～10%感染者演變?yōu)镠R-HPV的持續(xù)感染狀態(tài)進(jìn)而導(dǎo)致CIN/宮頸癌，這其中可能有其他原因參與其中，比如個(gè)人的免疫狀態(tài)以及其他感染因素為宮頸病變的共刺激因子。

支原體是大小介于細(xì)菌和病毒之間，能夠通過除菌濾器，無細(xì)胞壁的原核細(xì)胞生物。支原體屬中最常見為UU，在40%～80%正常性成熟女性生殖道中均可分離出UU[4]，其生物合成能力差，大多數(shù)寄生在女性宮頸上皮細(xì)胞內(nèi)。Lukic[5]等研究發(fā)現(xiàn)238例CIN患者中UU感染率隨著宮頸病變級(jí)別增加而增高。也有學(xué)者持反對(duì)意見，陳曦曦[6]研究發(fā)現(xiàn)310例CIN患者及274例正常女性的UU感染率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且CINI、CINII、CINIII各組與對(duì)照組相比，差異也均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。而本文中病例組UU的感染率為29.0%，對(duì)照組UU的感染率為9.2%，病例組UU感染率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001），病例組包括宮頸癌、CINIII、CINII、CINI四個(gè)亞組，UU感染率分別為30.6%、31.1%、28.6%、21.7%，均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示UU感染可能與宮頸病變有關(guān)，與陳曦曦[6]結(jié)果不一致，而病例組四組組間UU感染率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，結(jié)果提示UU感染與宮頸病變級(jí)別的進(jìn)展程度無關(guān)，這些差異可能原因?yàn)椋海?）標(biāo)本差異，病例組亞組組成例數(shù)不同；（2）方法不同，本文采用常規(guī)培養(yǎng)法。

表1 病例組與對(duì)照組HR-HPV和UU感染率對(duì)比

表2 不同HR-HPV感染情況中UU與宮頸病變的關(guān)系

目前有研究報(bào)道支原體能夠引起機(jī)體慢性炎癥并促進(jìn)腫瘤發(fā)生[7]，UU能侵入細(xì)胞表面，黏附于宮頸上皮細(xì)胞的表面受體，這種黏附特性容易造成持續(xù)感染，感染后不容易被清除，進(jìn)而激活人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生炎癥介質(zhì)等致病。是由于UU感染引起宮頸慢性炎癥直接誘發(fā)宮頸病變還是UU與HR-HPV相互作用提高宮頸病變風(fēng)險(xiǎn)，本文進(jìn)一步以不同的HR-HPV感染情況進(jìn)行分層，在HR-HPV陽性組中，病例組UU感染率與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而HR-HPV陰性組中，病例組與對(duì)照組UU感染率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），結(jié)果提示UU感染在HR-HPV陰性并不能增加宮頸癌變的風(fēng)險(xiǎn)，由此可以推斷UU感染在HR-HPV導(dǎo)致宮頸癌變過程中有協(xié)同作用，推測(cè)原因可能為[8-9]：UU會(huì)特異性寄生于婦女宮頸柱狀上皮細(xì)胞，能夠躲避機(jī)體的免疫防御，造成慢性持續(xù)感染，產(chǎn)生各種炎癥因子，提高HR-HPV的易感性，易造成HR-HPV的重復(fù)持續(xù)感染，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生周期失控，進(jìn)而發(fā)生一系列改變。而具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

總之，HR-HPV感染是宮頸病變的發(fā)生進(jìn)展主要原因，但并不是單一原因，UU可輔助HR-HPV導(dǎo)致宮頸癌變發(fā)生。因此臨床在早癌篩查中，檢測(cè)HR-HPV的同時(shí)，應(yīng)該注意UU的常規(guī)檢測(cè)，早發(fā)現(xiàn)、早治療。

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Study on the Correlation Between Ureaplasma Urealyticum and HRHPV in Cervical Lesion

ZHONG Hui1XU Liangpu1QIU Huahong1MAO Xiaodan2SUN Pengming21 Laboratory Department, Health Center for Women and Children of Fujian Province, Fuzhou Fujian 350001, China; 2 Gynecology Tumour Laboratory

ObjectiveTo explore the infection of UU in patients with CIN and cervical cancer, also the relationship of infection of UU, HRHPV genotype and cervical lesion.MethodsFour hundreds patients in Fujian Maternal and Children Hospital with CIN or cervical cancer were selected to be case group from January 2011 to January 2016.Control group was matched for age, including 458 cases of patients with gynecological benign diseases treatment. All cases were taken cervical exfoliated cells for HPV genotyping detection by means of PCR-reverse dot hybridization technique and also UU detection by means of liquid culture method.ResultsCompared infection rates of HR-HPV and UU between case and control group, the infection rates of case group (88.5%, 29.0%) were higher than the control group(19.9%, 9.2%), the difference had statistical significance (P＜ 0.05).When HR-HPV was positive, the infection rate of UU was significant different between the case group and the control group(P＜ 0.05). When HR-HPV was negative, the infection rate of UU had no statistically significant difference between the case group and the control group(P＞ 0.05).ConclusionThere may be interaction between UU and infection of HR-HPV to cause cervical lesion.

high-risk human papillomavirus; ureaplasma urealyticum;cervical lesion

R446

A

1674-9316（2017）20-0122-03

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．20．064

1 福建省婦幼保健院檢驗(yàn)科，福建 福州350001；2 婦科腫瘤實(shí)驗(yàn)室

孫蓬明