miR-101-3p靶向調控SOX9影響肝癌細胞增殖凋亡的研究

崔 宏， 楊楠木， 賀 濤， 萬百順， 韓 風

河南省腫瘤醫院 鄭州大學附屬腫瘤醫院肝膽胰腺外科，河南 鄭州 450052

miR-101-3p靶向調控SOX9影響肝癌細胞增殖凋亡的研究

崔 宏， 楊楠木， 賀 濤， 萬百順， 韓 風

河南省腫瘤醫院 鄭州大學附屬腫瘤醫院肝膽胰腺外科，河南 鄭州 450052

目的探討miR-101-3p對肝癌細胞增殖凋亡的影響及其對靶基因性別決定區Y框蛋白9(sex determining region Y-box 9, SOX9)的調控作用。方法肝癌細胞轉染miR-101-3p模擬物(miR-101-3p mimics組)、模擬物陰性對照(mimics control組)、SOX9小干擾RNA(SOX9 siRNA組)、siRNA對照(siRNA control組)，同時以只加入轉染試劑的細胞為對照組，RT-PCR檢測細胞中miR-101-3p水平，噻唑藍(MTT)檢測細胞增殖情況，流式細胞術檢測細胞凋亡情況，Western blotting檢測細胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、SOX9表達，靶基因預測庫預測miR-101-3p靶基因，熒光素酶報告基因鑒定靶基因。結果miR-101-3p mimics能夠促進肝癌細胞中miR-101-3p表達，SOX9 siRNA能夠抑制肝癌細胞中SOX9的表達。miR-101-3p mimics組細胞凋亡率高達(35.69±5.27)%，細胞存活率只有(76.34±4.63)%，細胞中Cleaved Caspase-3表達增多。靶基因預測庫和雙熒光素酶報告基因預測并鑒定miR-101-3p的靶基因是SOX9。miR-101-3p mimics能夠抑制SOX9 mRNA和蛋白表達。SOX9 siRNA組細胞中SOX9蛋白表達下降，Cleaved Caspase-3蛋白水平升高，細胞凋亡率高達(29.58±2.58)%，而細胞存活率只有(69.47±5.26)%。結論miR-101-3p能夠負調控靶基因SOX9，從而促進肝癌細胞凋亡，抑制肝癌細胞增殖。

肝癌；凋亡；增殖；miR-101-3p；性別決定區Y框蛋白9

肝癌的發病率在全部惡性腫瘤中位居第二位[1]，嚴重危害著人類的生命健康。miRNA是一種非編碼的小分子RNA，能夠通過堿基互補的方式調控靶基的轉錄和翻譯過程[2-4]。miRNA與腫瘤的發生有關。miR-145、miR-22、miR-375等能夠促進癌細胞的凋亡，抑制癌細胞的增殖，在癌癥組織中表達下調[5-7]。……