不同產(chǎn)地民族藥材大黃中蒽醌類成分的含量對比研究

烏仁圖雅 薩日蓋 薩茹拉 其力格爾

(內(nèi)蒙古鄂爾多斯市蒙醫(yī)研究所,內(nèi)蒙古 鄂爾多斯 017010 )

不同產(chǎn)地民族藥材大黃中蒽醌類成分的含量對比研究

烏仁圖雅 薩日蓋 薩茹拉 其力格爾

(內(nèi)蒙古鄂爾多斯市蒙醫(yī)研究所,內(nèi)蒙古 鄂爾多斯 017010 )

目的：比較不同產(chǎn)地大黃中的總蒽醌及游離蒽醌的含量差異。方法參考《中華人民共和國藥典》(2015年版)方法，色譜柱采用ZORABAX SB-C18柱(4.6 mm × 150 mm，5μm)，以甲醇-0.1%磷酸溶液(80%-20%)及甲醇- 0.1%磷酸溶液 (78：22)為流動(dòng)相，流速為1.0 mL/min，檢測波長為254 nm，對不同產(chǎn)地的3批大黃藥材進(jìn)行含量測定。結(jié)果不同產(chǎn)地大黃均含有5種蒽醌類衍生物，山西質(zhì)量最優(yōu)。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)考察了不同產(chǎn)地大黃的質(zhì)量差異，可為大黃的質(zhì)量評價(jià)及規(guī)范化種植提供參考。

大黃；蘆薈大黃素；大黃酸；大黃素；大黃酚；大黃素甲醚；高效液相色譜法；含量測定

大黃為蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L. 、唐古特大黃Rheum tanguticum Maxim.ex Balf. 或藥用大黃 Rheum officinale Baill.的干燥根和根莖。秋末莖葉枯萎或次春發(fā)芽前采挖，除去細(xì)根，刮去外皮，切瓣或段，繩穿成串陰干，烘干或切成縱橫較薄的片子曬干。

掌葉大黃主產(chǎn)于甘肅、青海、西藏、四川等地，主要為栽培，產(chǎn)量最大。唐古特大黃主產(chǎn)于青海、甘肅、西藏及四川地區(qū)，藥用大黃唐古特大黃主產(chǎn)于四川、貴州、云南、湖北、陜西等地，栽培或野生。以甘肅、青海產(chǎn)品為地道藥材(西大黃)，尤以甘肅武威(涼州)，張掖及河西地區(qū)所產(chǎn)的野生品，視為大黃中之珍品，稱為“涼黃”。商品中又將產(chǎn)于四川的川東與湖北、貴州及陜西毗鄰地區(qū)藥用大黃的栽培品稱為“南大黃”；將產(chǎn)于甘孜 、阿壩、涼山州、青海(德格)及云南等地藥用大黃的產(chǎn)品稱為“雅黃”。

大黃主要含蒽醌類衍生物。其中游離蒽醌衍生物有大黃酸(Rhein)、大黃素(Emodin)、大黃酚(Chrysophanol)’蘆薈大黃素(Aloeemodin)、大黃素甲醚(Physcion)等，為大黃的抗菌成分。結(jié)合性蒽醌類衍生物為游離蒽醌類的葡萄糖甙或雙葡萄糖甙和雙蒽酮甙。為大黃的主要瀉下成分，其中以雙蒽酮甙作用最強(qiáng)。雙蒽酮甙-番瀉葉甙A及B(Sennoside A、B,互為異構(gòu)體)、番瀉葉甙C (Sennoside C)。

大黃是蒙醫(yī)藥常用藥材，具有瀉熱通腸，涼血解毒，逐淤通經(jīng)的作用。主要用于實(shí)熱便秘，積滯腹痛，瀉痢不爽，濕熱黃疸，血熱吐衄，目赤，咽腫，腸癰腹痛，癰腫疔瘡，淤血經(jīng)閉，跌撲損傷，外治水火燙傷[1-3]。本試驗(yàn)以《中華人民共和國藥典》(2015版第一部)[4]所載HPLC方法為參考，通過調(diào)整色譜條件，測定和比較了山西大黃及批號不同的甘肅大黃中5種游離蒽醌和總蒽醌的含量，其結(jié)果對人工栽培大黃質(zhì)量控制具有較大意義，同時(shí)可為人工栽培大黃的臨床的合理應(yīng)用提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料

1.1 儀器：Agilent 1260型高效液相色譜儀(美國 Agilent 公司)；SK-3300LHC型超聲波清洗器(上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司)；RE-2000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠)；DV215CD型天平(美國OHAUS公司)。

1.2 試劑：蘆薈大黃素對照品(批號 110795- 201308)、大黃酸對照品(批號 110757- 200206)、大黃素對照品(批號 110756-201512)大黃酚對照品(批號 110796- 201319)、大黃素甲醚對照品(批號 110758-201415)均購自中國食品藥品檢定研究院供含量測定用。甲醇(色譜純)、水(娃哈哈牌純凈水)、其他試劑均為國產(chǎn)分析純。 3批大黃飲片分別購自(山西；批號：1305001)山東嘉泰中藥飲片有限公司，(甘肅-1；批號：20160302)安徽紀(jì)淞堂中藥飲片有限公司，(甘肅-2；批號：1508011173)河北藺氏盛泰藥業(yè)有限公司。

2 方法

2.1 色譜條件： 流動(dòng)相：甲醇- 0.1%磷酸溶液 (80%-20%)及甲醇- 0.1%磷酸溶液(78%-22%)；流速：1.0 mL/min；色譜柱：ZORABAX SB-C18柱(4.6 mm × 150 mm，5μm)；檢測波長：254 nm；進(jìn)樣量：10 μL。

2.2 對照品溶液制備： 精密稱取蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚對照品適量，置于容量瓶中，加甲醇溶解定容，制成濃度為含蘆薈大黃素17.4 μg/mL、大黃酸16 μg/mL、大黃素16μg/mL、大黃酚 16 μg/mL、大黃素甲醚 8 μg/mL 的混合對照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備

2.3.1 游離蒽醌供試品溶液：取大黃樣品各粉末(過四號篩)約0.5 g，精密稱定，置100 mL具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，稱定重量，加熱回流1h，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3.2 總蒽醌供試品溶液: 取大黃樣品各粉末(過四號篩)約0.15 g，精密稱定，置100 mL具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，加熱回流1h，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液5 mL置錐形瓶中，揮去溶劑，加8%鹽酸溶液10mL，超聲處理2 min，再加三氯甲烷10mL，加熱回流1 h，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗滌容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷層，酸液再用三氯甲烷提取3次，10 mL/次，合并三氯甲烷液，減壓回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状贾盟≈形崛芙猓D(zhuǎn) 移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 樣品含量測定： 精密量取按和“2.3”所制備的對照品溶液及供試品溶液10μL按“2.1”所建立的色譜條件對3批不同產(chǎn)地的大黃藥材進(jìn)行含量測定。計(jì)算含量時(shí)游離蒽醌以蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的總量計(jì)，總蒽醌以蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的總量計(jì)。

3 測定

總蒽醌在產(chǎn)地山西含量最高，為2.88%，其次是甘肅-1，含量為1.96%，甘肅-2含量為1.12%。 前兩產(chǎn)地的藥材含量符合藥典規(guī)定，后者則不符合。(結(jié)果見圖1，表1。)

總游離蒽醌在山西、甘肅-1和甘肅-2中的含量依次為2.37%、1.64%和0.84%，均高于藥典標(biāo)準(zhǔn)。(結(jié)果見圖2，表2。)

綜上述，總蒽醌和總游離蒽醌的總含量均在產(chǎn)地山西最高、其次是甘肅-1，它在產(chǎn)地甘肅-2含量最低。

表1 3批大黃中總蒽醌含量測定結(jié)果(%，n=3)

樣品號產(chǎn)地蘆薈大黃素大黃酸大黃素大黃酚大黃素甲醚總蒽醌1山西0．240．030．261．730．622．882甘肅-10．220．370．270．870．231．963甘肅-20．100．120．320．480．101．12

表2 3批大黃中總游離蒽醌含量測定結(jié)果(%，n=3)

樣品號產(chǎn)地蘆薈大黃素大黃酸大黃素大黃酚大黃素甲醚總游離蒽醌1山西0．170．030．191．440．542．372甘肅-10．180．360．210．710．181．643甘肅-20．100．220．100．340．080．84

4 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，不同產(chǎn)地的大黃之間有效成分的含量差異明顯，這說明其之間的質(zhì)量存在差別。原因可能是由于大黃的生長地域、采集時(shí)間、貯存條件不同引起次生代謝成分組成和含量的變化。

[1]羅布桑.蒙藥學(xué)[M].呼和浩特：內(nèi)蒙古人民出版社，2006.

[2] 王天青.常用中藥鑒定大全[M].哈爾濱：黑龍江科學(xué)技術(shù)出版社，1993.

[3] 陳發(fā)奎,等.中藥有效成分含量測定[M]. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2008.

[4] 國家藥典委員會(huì). 中華人民共和國藥典(一部).[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015.

R291.2

B

1006-6810(2017)06-0041-02

2017年3月8日收稿