纖維支氣管鏡刷檢結合液基細胞學檢查在肺癌診斷中的價值

熊丹 汪鳳鳳

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·腫瘤診治·

纖維支氣管鏡刷檢結合液基細胞學檢查在肺癌診斷中的價值

熊丹 汪鳳鳳

目的 探討液基細胞學檢查(liquid based cytology test,LCT)在肺癌支氣管鏡刷檢檢查中的應用價值。方法 分析我院353例肺癌患者，對比氣管鏡刷檢傳統涂片細胞學檢查和刷檢液基細胞學檢查和組織學檢查，進行分型歸納，計算敏感度和分型符合率。結果 液基細胞學診斷肺癌的敏感度為73.65%，傳統涂片診斷肺癌的敏感度為60.34%,兩者差異有統計學意義。纖支鏡刷檢液基細胞學診斷肺癌分型與組織學活檢病理有較高的一致性。其中鱗癌68.82%,腺癌84.69%,小細胞癌70.75%,大細胞癌75%;均優于傳統涂片。結論 將液基細胞學技術運用于纖維支氣管鏡刷檢細胞學檢查可以提高支氣管刷檢診斷肺癌的陽性率, 而且與肺癌組織學分型的符合率較高。

纖維支氣管鏡檢查在肺癌的診斷中作用重大，大多數中央型肺癌在支氣管鏡下可發現，支氣管鏡檢查陽性率高。部分周圍型肺癌也可通過遠端刷檢取得病理。組織活檢與刷檢同步進行可提高陽性率[1]。纖維支氣管鏡刷檢運用普遍，但傳統制片技術診斷率不高，液基細胞學檢查是采用液基薄層細胞檢測系統檢測并進行細胞學分類診斷，最早應用于宮頸癌細胞學檢查, 并使宮頸病變的檢出率有了顯著提高,目前已替代了傳統宮頸涂片[2]。常規涂片由于血液、粘液、炎癥等因素影響,常使樣本模糊,存在假陰性可能。液基細胞檢查提高了細胞樣本的檢測質量，可以明顯提高癌變細胞的檢測率[3]。現將支氣管鏡刷檢同時進行液基細胞學檢查和傳統涂片細胞學檢查，并與組織病理學檢查結果對照，進行比較，探討該方法在肺癌診斷中的應用價值。

資料與方法

一、材料

選取2012年01月01日-2015年01月01日期間在靖江市人民醫院就診經組織病理學(氣管鏡活檢或手術病理 )確診肺癌的353例患者，行纖維支氣管鏡檢查包括活檢及刷檢。其中男性216例，女性137例，年齡38歲-76歲。鱗癌186例，腺癌83例，小細胞癌6例，大細胞癌3例。

二、方法

通過纖維支氣管鏡刷檢常規涂片2張, 將采樣刷頭插入裝有保存液的瓶中,然后往保存液瓶中加入消化液, 充分搖勻、震蕩,靜置30分鐘, 離心收集細胞, 由湖北孝感亞光膜式離心制片機制片, HE染色。將細胞學診斷分為陰性，陽性。陽性者對瘤細胞按如下作出分型:鱗癌, 腺癌,小細胞癌，大細胞癌。對分型不清的腫瘤細胞及難以判斷瘤細胞來源的可通過免疫細胞化學方法鑒別診斷。所有液基涂片標本與傳統涂片對比。

三、統計學方法

應用SPPS19.0軟件，采用χ2檢驗，P<0.05 有統計學意義。

結 果

一、 各種癌細胞的細胞形態

①鱗癌細胞：多單個散在，大小形狀不等，可呈圓形、多邊形、梭形，特點是胞質一般呈嗜酸性，有的明顯角化，核圓形或不規則形，染色質均勻分布，常深染如墨水狀，核仁不明顯。(見圖1、2)。

圖1 鱗癌 傳統涂片，HE染色×400

②腺癌細胞：常聚集成實性團，或有一定排列的腺樣結構，細胞大小規律，胞質豐富，多呈嗜堿性，有的可見粘液空泡，細胞核多呈圓形，位于細胞中央或偏一側，可互相重疊，染色質較細，核仁較顯著。(見圖3、4)。

圖2 鱗癌 液基細胞學制片 HE染色×400

圖3 腺癌 傳統涂片，HE染色×400

圖4 腺癌 液基細胞學制片 HE染色×400

③小細胞癌細胞：多松散聚集成堆，細胞小，胞質稀少如裸核狀，核深染，呈圓形或雀麥形，有的呈短梭形或帶棱角。(見圖5、6)。

④大細胞癌細胞：多聚集成堆，或松散排列，細胞較大，呈圓形或多角鑲嵌狀，核圓形，位于細胞中央，可見明顯核仁，但無鱗癌及腺癌的任何特征。

二、353例組織病理學確診的患者中刷檢液基細胞學診斷為癌的260例, 傳統涂片診斷為癌的213例。液基細胞學的敏感度為73.65%，傳統涂片的敏感度為60.34%,液基細胞學與傳統涂片的敏感度的差異有統計學意義(χ2=14.15，P<0.01)。(見表1)。

圖5 小細胞癌 傳統涂片HE染色×400

圖6 小細胞癌液基細胞學制片 HE染色×400

總計陽性陰性敏感度χ2P液基制片3532609373.65%傳統涂片35321314060.34%14.15<0.01

三、刷檢液基細胞學與傳統涂片對各型肺癌診斷一致性的比較。

與組織學比較，刷檢液基細胞學診斷符合率為鱗癌68.82%,腺癌84.69%,小細胞癌70.75%,大細胞癌75%;傳統涂片診斷符合率為鱗癌57.53%,腺癌62.24%，小細胞癌69.23%。刷檢液基細胞學與組織學活檢有較高的一致性。其中液基細胞學在腺癌分型診斷率最高，明顯優于傳統涂片(χ2=12.669，P<0.01)；液基細胞學在鱗癌分型診斷率與傳統涂片對比有統計學意義(χ2=5.096，P=0.024)；液基細胞學在大細胞癌分型診斷率與傳統涂片對比有統計學意義(χ2=4.8，P=0.028)；液基細胞學在小細胞癌分型診斷率與傳統涂片對比無統計學意義(χ2=0.037，P=0.848)。(見表2)。

表2 液基細胞學與傳統涂片對肺癌診斷分型一致性的比較

討 論

液基細胞學技術簡稱LCT，是近年來應用于臨床細胞病理學診斷的一項新技術，是一種將脫落細胞保存在液體中，并通過特殊設備將細胞均勻分散貼附在載玻片上制成涂片的技術。利用全自動設備將細胞涂成均勻的薄層標本，大大減少阻礙視線的血液、粘液和炎細胞的數量，從而制成細胞分散的薄層樣本。在宮頸等婦科標本中廣泛應用并取得了較好的效果。纖維支氣管鏡檢查是臨床上最常用的診斷肺癌的方法，刷檢傳統涂片法發現癌細胞的陽性率低，采用LCT 技術檢查能最大限度的收集腫瘤細胞并保持細胞的完整性，同時將紅細胞破壞、炎細胞及粘液溶解，提高了制片質量，使腫瘤細胞容易被發現，細胞圖像清晰可見，核仁等細胞結構清晰易見，三維立體感突出[4-5]，從而腫瘤細胞檢出陽性率提高，明顯高于刷檢普通涂片。液基細胞學與傳統細胞學評價方法保持一致，并且保持了生物特性、細胞結構的一致性。總結來說，與傳統涂片相比，LCT有以下優點：①細胞平鋪均勻，細胞形態結構保存完好，三維立體突出，不容易變形，細胞量充足。②涂片質量高，涂片背景清晰厚薄均勻，紅細胞大多破壞消失，黏液絲溶解，炎細胞減少，異常細胞易被發現。我們的結果顯示其靈敏度高于傳統方法，具有統計學意義。刷檢液基細胞學診斷有一定比例的假陰性，這主要是因為氣管鏡下不能直視的遠端腫瘤病灶只能采取盲刷，極有可能刷不到腫瘤細胞[1]。文獻報道[6-7]刷檢液基細胞學檢查在對肺癌分型的診斷方面亦有優勢，尤其是腺癌。與本組實驗結論相同。其主要原因在于腺癌細胞在傳統涂片中和因炎癥等因素刺激增生的正常細胞, 以及肺內組織吞噬細胞等，很難鑒別，但在液基制片中由于三維立體感明顯，可見腺管狀、乳頭狀排列而易診斷。液基制片中細胞顯示清晰，背景干凈，對比性強，即使單個鱗癌細胞也易發現，并且易于分型[8]。

綜述所述，纖維支氣管鏡刷檢液基細胞學檢查不僅提高了刷檢的陽性率，而且分型診斷亦有較高的準確率，值得推廣應用于肺癌的診斷。

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214500 江蘇 靖江，靖江市人民醫院呼吸科

2016-04-28]