血清IL-32、PRL、MMP-9 在子宮內(nèi)膜異位癥合并不孕患者中的表達及意義分析

徐逸塵 王智慧

子宮內(nèi)膜異位癥患者因內(nèi)分泌、免疫、胚胎發(fā)育等多方面原因?qū)е屡韪骨晃h(huán)境、子宮內(nèi)膜容受性及輸卵管運輸能力等改變,造成該類患者不孕幾率增加,報告指出約50%的子宮內(nèi)膜異位癥患者可發(fā)生不孕,是導致育齡期女性不孕的重要因素之一［1］。故探尋可能影響子宮內(nèi)膜異位癥患者不孕的生物學指標,是現(xiàn)階段臨床醫(yī)學研究重點。泌乳素(prolactin,PRL)是常規(guī)生殖激素之一,可促進乳腺腺泡發(fā)育；基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)可降解細胞基底膜與外基質(zhì)；血清白細胞介素-32(interleukin-32,IL-32)屬于新型促炎細胞強誘導物,在炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)中具有重要作用［2,3］。既往研究指出,子宮內(nèi)膜異位癥合并不孕的發(fā)生機制與生殖激素、內(nèi)分泌紊亂等密切相關(guān),由此考慮上述血清指標是否在子宮內(nèi)膜異位癥合并不孕發(fā)生與進展調(diào)控中具有某種作用,搜索臨床相關(guān)文獻,更多的是研究上述血清單個指標或其中兩種指標聯(lián)合在子宮內(nèi)膜異位癥合并不孕患者中的意義,并未發(fā)現(xiàn)上述三種指標聯(lián)合評估［4,5］。鑒于此,本研究通過觀察子宮內(nèi)膜異位癥合并不孕患者的血清IL-32、PRL 及MMP-9 表達情況,并分析子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)生不孕癥的相關(guān)因素,旨在評估子宮內(nèi)膜異位癥患者不孕發(fā)生風險。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020 年2 月～2021 年12 月期間在蘇州市相城人民醫(yī)院婦科住院治療的40 例單純子宮內(nèi)膜異位癥患者作為A 組,年齡26～37 歲,平均年齡(31.48±1.15)歲；美國生育學會修訂的子宮內(nèi)膜異位癥分期標準(R-AFS)分期［6］：Ⅰ～Ⅱ期23 例,Ⅲ～Ⅳ期17 例。另選取同時期36 例子宮內(nèi)膜異位癥合并不孕患者作為B 組,年齡26～35 歲,平均年齡(31.37±1.11)歲；R-AFS 分期：Ⅰ～Ⅱ期21 例,Ⅲ～Ⅳ期15 例。兩組一般資料比較,差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05),具有可比性。見表1。所有納入患者均無體外受精(IVF)史、子宮內(nèi)膜異位癥手術(shù)史。

表1 兩組一般資料比較(,n)

表1 兩組一般資料比較(,n)

注：兩組比較,P＞0.05

1.2 納入及排除標準

1.2.1 納入標準 子宮內(nèi)膜異位癥診斷參照《子宮內(nèi)膜異位癥的診治指南》［7］中相關(guān)標準；不孕診斷參照《子宮腺肌病伴不孕癥診療中國專家共識》［8］中相關(guān)診斷；入組前6 個月內(nèi)未服用激素類藥物；患者臨床資料保存完善。

1.2.2 排除標準 子宮內(nèi)膜異位癥手術(shù)史,或合并其他子宮內(nèi)膜病變,如子宮內(nèi)膜癌；合并其他婦科疾病,如盆腔炎、卵巢囊腫等；合并其他可能導致患者不孕的因素,如精子異常、排卵障礙等；防治宮內(nèi)節(jié)育器；合并免疫性或高泌乳素血癥等內(nèi)分泌疾病。

1.3 方法 入院次日,采集兩組患者空腹靜脈血5 ml,高速離心(3000 r/min,10 min)后,取上層清液,采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清IL-32、MMP-9(試劑盒由武漢優(yōu)爾生商貿(mào)有限公司提供,批號：20202220282)水平,采用免疫熒光法檢測血清PRL(試劑盒由上海新波生物技術(shù)有限公司提供,型號：AutoDelfia 型)水平。

1.4 觀察指標 比較兩組患者血清IL-32、PRL、MMP-9 表達水平,分析子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)生不孕的相關(guān)因素及血清IL-32、PRL、MMP-9 表達預測子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)生不孕的價值。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS24.0 統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差()表示,采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。繪制ROC 曲線圖分析血清IL-32、PRL、MMP-9 表達預測子宮內(nèi)膜異位癥患者合并不孕的價值,AUC＜0.5 無預測價值,0.5～0.7 預測價值較低,0.7～0.9 預測價值中等,＞0.9 預測價值較高；檢驗水準α=0.05。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血清IL-32、PRL、MMP-9 表達水平比較 B 組患者血清IL-32、PRL、MMP-9 表達水平分別為(49.02±6.75)ng/L、(22.56±5.48)μg/L、(394.12±72.15)ng/ml,均高于A 組的(28.23±4.15)ng/L、(18.56±4.42)μg/L、(270.56±42.12)ng/ml,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組血清IL-32、PRL、MMP-9 表達水平比較()

表2 兩組血清IL-32、PRL、MMP-9 表達水平比較()

注：與A 組比較,aP＜0.05

2.2 子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)生不孕的多因素回歸分析將子宮內(nèi)膜異位癥患者是否合并不孕情況作為因變量(1=合并,0=未合并),將血清IL-32、PRL、MMP-9 表達作為自變量并賦值。見表3。經(jīng)Logistic 回歸分析結(jié)果顯示,血清IL-32、PRL、MMP-9 表達均是子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)生不孕的影響因素(OR＞1,P＜0.05)。見表4。

表3 自變量說明與賦值

表4 子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)生不孕的多因素回歸分析

2.3 血清IL-32、PRL、MMP-9 表達預測子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)生不孕的價值分析 將子宮內(nèi)膜異位癥患者是否合并不孕癥的情況作為狀態(tài)變量(1=合并,0=未合并),將患者入院時血清IL-32、PRL、MMP-9 表達作為檢驗變量,繪制患者ROC 曲線,得到AUC,其中血清IL-32、PRL、MMP-9、聯(lián)合檢測的AUC 分別為0.907、0.727、0.915、0.960＞0.7,均有一定的預測價值。見表5,圖1。

表5 血清IL-32、PRL、MMP-9 表達預測子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)生不孕的價值分析

圖1 血清IL-32、PRL、MMP-9 表達預測子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)生不孕的ROC 曲線圖

3 討論

子宮內(nèi)膜異位癥是育齡期女性常見疾病之一,近年來發(fā)病率呈逐年上升且年輕化趨勢,也是導致育齡期女性發(fā)生不孕的主要因素［9］。故探尋可能影響子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)生不孕的有效指標,對降低患者不孕率尤為重要。

血清IL-32 是新近發(fā)現(xiàn)的前炎癥細胞因子,可由T細胞、單核細胞自然殺傷細胞(NK 細胞)等產(chǎn)生,在自身免疫性疾病、感染性疾病中的研究較多,其在體內(nèi)生物學作用體現(xiàn)：參與誘導各種趨化因子與細胞因子、誘導T 細胞凋亡、增強宿主防御［10,11］。目前有關(guān)血清IL-32 在子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)疾病中研究較少。血清PRL 是由子宮內(nèi)膜、垂體等組織分泌的神經(jīng)肽激素,非妊娠狀態(tài)下機體血清PRL 表達＜20 ng/ml,當其表達升高時,下丘腦-垂體-性腺生殖軸抑制垂體促性腺激素分泌,繼而影響卵巢周期,導致患者月經(jīng)紊亂、排卵異常等癥狀［12,13］。血清MMP-9 屬于基質(zhì)金屬蛋白酶家族中分子量最大的明膠酶,被激活的MMP-9 可降解細胞外基質(zhì)膠原,活化整合素,增加細胞間粘附作用,此外其在促進新血管生成方面價值顯著［14,15］。本研究結(jié)果顯示,B 組患者血清IL-32、PRL、MMP-9 表達水平分別為(49.02±6.75)ng/L、(22.56±5.48)μg/L、(394.12±72.15)ng/ml,均高于A 組的(28.23±4.15)ng/L、(18.56±4.42)μg/L、(270.56±42.12)ng/ml,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。由此提示血清IL-32、PRL、MMP-9 表達可能在子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)生不孕癥過程中發(fā)揮作用。但這一關(guān)系并未明確,較缺乏臨床相關(guān)研究證實,仍需進一步觀察驗證。

為驗證上述猜測,經(jīng)Logistic 回歸分析結(jié)果顯示,血清IL-32、PRL、MMP-9 表達均是子宮內(nèi)膜異位癥患者發(fā)生不孕的影響因素(OR＞1,P＜0.05)。研究結(jié)果還顯示,血清IL-32、PRL、MMP-9 表達對預測子宮內(nèi)膜異位癥合并不孕患者有一定的價值。分析原因可能與下列因素有關(guān)：當血清IL-32 過表達時,其通過P38有絲分裂原蛋白激酶磷酸化途徑、核因子κB 途徑、半胱氨酸天冬蛋白酶(caspase)-1 途徑及caspase-3 途徑激活慢性免疫系統(tǒng),繼而誘導并加重炎癥反應(yīng),影響患者卵泡發(fā)育,導致不孕［16］。血清PRL 過表達則會引起下丘腦-垂體軸生殖內(nèi)分泌紊亂綜合征,即高泌乳素血癥,導致黃體生成素與卵泡刺激素活性下降,對卵泡刺激作用減弱,導致優(yōu)勢卵泡發(fā)育、排卵,一方面黃體是卵泡發(fā)育的重要基礎(chǔ)條件,優(yōu)勢卵泡發(fā)育不良后導致黃體生成受阻,而黃體功能不全將直接影響機體受孕,另一方面血清RPL 高表達抑制孕酮與雌二醇分泌,間接影響黃體功能,降低受孕成功幾率［17,18］。細胞外基質(zhì)降解是子宮內(nèi)膜異位癥患者子宮內(nèi)膜細胞轉(zhuǎn)移與定植的重要環(huán)節(jié),血清MMP-9 通過將細胞外基質(zhì)降解,加強細胞間粘附,幫助子宮內(nèi)膜細胞的異位定植與增殖［19,20］。鑒于上述原因考慮,針對子宮內(nèi)膜異位癥患者可通過監(jiān)測血清IL-32、PRL、MMP-9 表達,評估患者發(fā)生不孕的風險,并通過給予血清IL-32、PRL、MMP-9 高表達患者給予針對性干預手段,降低子宮內(nèi)膜異位癥患者不孕發(fā)生風險。

綜上所述,血清IL-32、PRL、MMP-9 表達對子宮內(nèi)膜異位癥患者合并不孕有一定的預測價值,臨床可通過對血清IL-32、PRL、MMP-9 高表達的子宮內(nèi)膜異位癥患者采取針對性的干預措施,旨在降低患者不孕癥發(fā)生率。但本研究因納入樣本數(shù)量有限,且回顧性分析時局限性較大,故研究所得結(jié)論的真實性與可信度還需在未來開展大樣本的前瞻性研究加以驗證。