有絲分裂原活化蛋白激酶信號通路介導大鼠星形膠質細胞氧糖剝奪后水通道蛋白4的表達①

千超，劉鋒，肖學謙，李峰，高喜松，黨連鋒，張毓

有絲分裂原活化蛋白激酶信號通路介導大鼠星形膠質細胞氧糖剝奪后水通道蛋白4的表達①

千超，劉鋒，肖學謙，李峰，高喜松，黨連鋒，張毓

目的探討有絲分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)是否介導缺血后大鼠星形膠質細胞水通道蛋白4(AQP4)的表達。方法分離培養新生Sprague-Dawley大鼠腦星形膠質細胞。第2代細胞分成對照組、氧糖剝奪(OGD)組和阻斷組。后兩組復制OGD 5 h后復氧模型，12 h后阻斷組分別換入含U0126(1 μmol/L和10 μmol/L,U1組和U10組)、SP600125(1 μmol/L和10 μmol/L,SP1組和SP10組)和SB203580(1 μmol/L和10 μmol/L,SB1組和SB10組)的培養液。復氧后0.5 h、1 h、1.5 h、2 h、3 h、4 h、8 h和12 h檢測OGD組細胞體積，復氧后0.5 h、1 h、1.5 h、8 h和12 h Western blotting法檢測OGD組AQP4表達；復氧后24 h，檢測各組乳酸脫氫酶(LDH)活性，Western blotting法檢測各組AQP4，磷酸化細胞外調節蛋白激酶(p-ERK)、c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)和p38 MAPK(p-p38 MAPK)表達。結果復氧后1.5 h、2 h、3 h和4 h時，OGD組細胞體積較對照組顯著增大(P＜0.001)，OGD組AQP4水平較對照組顯著升高(P＜0.001)，并在復氧后1.5 h達到峰值。OGD組p-ERK、p-JNK和p-p38 MAPK、AQP4水平較對照組顯著增加(P＜0.001)，阻斷組p-ERK、p-JNK和p-p38 MAPK較OGD組顯著下降(P＜0.001)，SB10組AQP4較OGD組顯著下降(P＜0.001)。除SP1組、SB1組外，各干預組LDH活性較OGD組顯著下降(P＜0.01)，SB10組最低(P＜0.001)。結論MAPK信號通路，特別是p38 MAPK可介導大鼠星形膠質細胞AQP4蛋白表達，加重細胞壞死。

氧糖剝奪；星形膠質細胞；有絲分裂原活化蛋白激酶；信號通路；水通道蛋白4；水腫；大鼠

水通道蛋白4(aquaporins 4,AQP4)在中樞神經系統的水運輸中起重要作用[1-2]，并在腦星形膠質細胞中高表達[3]。近年研究表明，調節星形膠質細胞AQP4的表達可能是治療腦水腫的新策略[4]。絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)是調節細胞滲透壓的重要信號通路，動物研究表明，缺血性腦組織中MAPKs的表達及其磷酸化水平發生變化[5-6]；……