結直腸癌患者血清和組織中EGFR、HER—2表達水平及臨床意義

俞華　陳駿毅　周凌　柳漢榮

[摘 要] 目的：檢測結直腸癌（Colorectal cancer，CRC）患者血清和組織中表皮生長因子受體（EGFR）、人類表皮生長因子受體-2（HER-2）表達水平，并探討其臨床意義。方法：選取我院2013年6月至2016年6月收治的94例CRC患者（CRC組）、85例結直腸腺瘤患者（腺瘤組）及同期70名健康體檢者（對照組），檢測受試者血清EGFR、HER-2水平，比較CRC組原發病灶、癌旁組織及腺瘤組病灶組織EGFR、HER-2表達水平。結果：CRC組血清EGFR、HER-2水平高于腺瘤組，腺瘤組血清指標檢測結果高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）；Dukes分期C期/D期及有淋巴結轉移的CRC患者，其血清EGFR、HER-2陽性率均分別高于Duke分期A期/B期及無淋巴結轉移的患者，差異有統計學意義（P<0.05）。CRC組病灶組織EGFR、HER-2高表達率高于腺瘤組病灶組織，腺瘤組病灶組織EGFR、HER-2高表達率高于CRC組癌旁組織，差異有統計學意義（P<0.05）。結論：CRC患者血清及組織中EGFR、HER-2陽性率均較高，且陽性率與淋巴結轉移及分期相關。

[關鍵詞] 表皮生長因子受體；人類表皮生長因子受體-2；結直腸癌；診斷

中圖分類號：R735.3 文獻標識碼：A 文章編號：2095-5200（2017）05-085-03

DOI：10.11876/mimt201705035

結直腸癌（Colorectal cancer，CRC）發病率居惡性腫瘤第三位且呈年輕化趨勢[1-2]。既往研究表明，表皮生長因子受體（EGFR）調節紊亂可導致細胞進入不受調控、持續分裂狀態，腫瘤細胞惡性增殖；而人類表皮生長因子受體-2（HER-2）已被證實與乳腺癌、卵巢癌、肺癌等多種惡性腫瘤的發生發展具有密切關聯[3]。本研究觀察EGFR、HER-2在CRC患者血清和病灶組織中表達水平，分析其與結直腸癌發生物學行為的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2013年6月至2016年6月收治的94例CRC患者、85例結直腸腺瘤患者及同期70名健康體檢者，分別納入CRC組、腺瘤組、對照組，受試者均經各項檢查確診CRC、結直腸腺瘤或確認體健[4]，排除術前接受藥物或放療治療的CRC、結直腸腺瘤患者。CRC組男51例，女43例，年齡35～74歲，平均（61.25±8.13）歲；腺瘤組男48例，女37例，年齡32～81歲，平均（60.94±8.26）歲；對照組男37例，女33例，年齡29～80歲，平均（61.33±8.07）歲。3組受試者年齡、性別比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本臨床研究已征得我院醫學倫理委員會批準，受試者及家屬均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

1.2.1 血清指標檢測 抽取各組受試者入組次日清晨空腹肘靜脈血3 mL，使用酶聯免疫吸附法（ELISA法）測定其血清EGFR、HER-2吸光度，并根據標準曲線計算樣本EGFR、HER-2濃度，試劑盒均購自上海川翔生物科技有限公司。陽性參考值：EGFR≥6.5 mg/L為陽性，HER-2≥5.9 mg/L為陽性[5]。

1.2.2 免疫組化檢測 取CRC組、腺瘤組患者術中病灶標本及癌旁正常組織標本，以10%福爾馬林固定48 h，石蠟包埋、4 μm切片，依次行脫蠟、脫水處理，而后采用免疫組化染色法檢測其組織EGFR、HER-2表達。根據標本陽性著色程度、陽性細胞比例判斷EGFR、HER-2表達情況[6-7]：1）陽性著色程度：0分：未見明顯著色；1分：可見淺黃色細胞；2分：可見棕黃色細胞；3分：可見棕褐色細胞；2）陽性細胞比例：0分：陽性細胞比例<5%；1分：5%≤陽性細胞比例<10%；2分：10%≤陽性細胞比例<50%；3分：50%≤陽性細胞比例<80%；4分：陽性細胞比例≥80%；3）總分：總分=陽性著色程度×陽性細胞比例，總分0分為陰性，1～4分為弱陽性，陰性與弱陽性均判定為低表達；總分5～8分中陽性，9～12分為強陽性，中陽性、強陽性均判定為高表達。

1.3 研究方法

比較CRC組原發病灶、癌旁組織及腺瘤組病灶組織EGFR、HER-2表達水平，并分析組織EGFR、HER-2表達水平與CRC組患者臨床病理參數的關系，其中臨床病理參數包括年齡、性別、分化程度、腫瘤部位、Dukes分期及淋巴結轉移等[8]。數據輸入SPSS18.0進行分析，性別、陽性表達等計數資料以（n/%）表示，χ2檢驗，年齡、血清指標表達水平等計量資料以（x±s）表示，兩兩比較采用t檢驗，3組比較采用F檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清中EGFR、HER-2

CRC組血清EGFR、HER-2水平高于腺瘤組，腺瘤組血清指標檢測結果高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。

2.2 組織EGFR、HER-2

CRC組病灶組織EGFR、HER-2高表達率高于腺瘤組病灶組織，腺瘤組病灶組織EGFR、HER-2高表達率高于CRC組癌旁組織，差異有統計學意義（P<0.05）。

3 討論

惡性腫瘤的發生發展涉及一系列原癌基因與抑癌基因的突變及錯配修復基因缺陷的積累[9-10]。EGFR是一種Ⅰ型受體酪氨酸激酶，由原癌基因表達，主要分布于細胞膜表面，在細胞生長、分化與凋亡的調節中扮演著重要角色[11]。其所介導的信號傳導具有多向性，且在多種惡性腫瘤中呈現過表達、突變狀態：Boccaccio等[12]發現，EGFR膜外區域可結合多種配體，激動表皮生長因子、轉化生長因子，誘導胃癌的增殖、侵襲與轉移，故胃癌組織EGFR含量與病變進展程度具有密切關聯。本組CRC病灶組織EGFR高表達率為90.43%，說明EGFR在CRC細胞的惡性增殖過程中亦發揮了重要作用。Van等[14]指出，由于編碼EGFR的細胞外區域的配基可被酶水解脫落，故檢測外周血中EGFR水平亦能夠反映機體EGFR表達狀態。在本次研究中，CRC患者血清EGFR陽性率為80.85%，且隨著其陽性率的升高，患者Dukes分期逐漸升高并伴有淋巴結轉移，ERGF表達與癌癥浸潤及淋巴結轉移存在相關性。endprint

作為一種具有蛋白酪氨酸激酶活性的跨膜蛋白，HER-2可與其他受體結合，形成二聚體并發揮信號轉導功能。自HER-2受體高表達首次在乳腺癌組織中發現以來，近年來關于HER-2在胃癌、膀胱癌、食管癌等惡性腫瘤的生長、增殖與分化中發揮的重要作用也已得到廣泛關注[15-16]。

與此同時，HER-2能夠誘導EGFR過表達的發生，協同發揮加速細胞增殖、腫瘤形成作用[17]。本研究CRC組病灶組織HER-2高表達率為92.55%，血清HER-2陽性率為84.41%，均說明HER-2在CRC的發生、發展中可能也扮演著重要角色。Sethi等[18]發現，隨著CRC患者遠處轉移灶的增加與腫瘤進展程度的加劇，其血清HER-2水平呈逐漸升高態勢，且腫瘤細胞抵抗化療和激素治療的能力更強。

綜上所述，CRC患者血清及組織EGFR、HER-2均呈高表達且呈一致性，因此，早期篩查血清EGFR、HER-2水平對于CRC的早期篩查具有積極意義，而定期監測血清EGFR、HER-2變化亦有望為患者預后評估提供便捷依據，值得進一步關注。

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