人臍帶血干細胞輔助自體顆粒脂肪面部移植術臨床觀察

朱凱林

（武漢名韓醫療美容門診部 湖北 武漢 430050）

本院從2015年1月-2017年2月，收治面部凹陷需要填充脂肪患者40例，采用人臍帶血干細胞混合自體脂肪顆粒修復患者顏面部凹陷畸形，以期為臍帶血干細胞應用于自體脂肪顆粒填充提供更多的理論依據，并對其進行隨訪。以評價該技術的長期臨床療效。

1.臨床資料

40例，均為女性，年齡25～42歲，平均年齡32歲；采用人臍帶血干細胞混合脂肪顆粒方法，美容性面部年輕化豐全面術22例、全面部皮下軟組織萎縮癥豐面治療5例、面部萎縮癥矯治13例；所有受術者在術前、術后均拍攝照片和隨訪；客觀測量驗證顆粒脂肪注射移植術后的壽命。

2.手術方法

2.1 hUCBSC混懸液制備

足月分娩健康產婦（乙型肝炎病毒標志、艾滋病、梅毒抗體等檢測陰性）臍帶血由湖北省干細胞庫提供，產婦及家屬均簽署知情同意書，實驗方案經醫院醫學倫理委員會批準。取新鮮臍帶血（6h內用畢），用磷酸緩沖液（PBS）等倍稀釋后置于50ml離心管中，按1∶1比例加至人淋巴細胞分離液，4℃、2000r/min離心20min后臍帶血分5層，中間白膜層即為單個核細胞：用移液器小心吸取富含單個核細胞的懸液放人另一離心管內，4℃、1000r/min離心15min，PBS洗滌3次；用低糖DMEM培養液懸浮，計數細胞濃度為5×105/m1,hUCBSC混懸液制備成功。

2.2 脂肪組織制備

顆粒脂肪組織準備常規吸脂后脂肪組織離心（1200g*10min）。離心后液體由上至下分為油脂層、脂肪層、沉淀層（含大量血細胞成分）。吸出油脂層，棄去。將脂肪層重新收集至50ml離心管，加人等量生理鹽水，混勻。離心（1200g，5min）。收集脂肪層中顆粒脂肪組織，備用。

2.3 干細胞一脂肪復合組織形成和移植

將臍帶血干細胞液和顆粒脂肪組織混合，混勻10min，使干細胞充分附著顆粒脂肪，形成干細胞一脂肪復合組織。移植部位以1%利多卡因浸潤麻醉，用微量可控注射器進行干細胞一脂肪復合組織局部注射，注射深度為皮下層，進行多點均勻注射。注射后局部適度加壓包扎。

2.4 臨床療效評價

通過術前和術后照相，對比變化。評價標準：明顯改善（原有癥狀消失或明顯減輕）、有效（原有癥狀部分消失，需重復治療）和無效（原有癥狀無變化）。皮膚檢測∶采用VISIA專業皮膚圖像分析系統（美國）檢測術前術后皮膚皺紋、斑點、毛孔、紋理的變化。在正面遮照條件下分析密度和大小，由系統自帶軟件轉化為定量數據。通過定量數據評價術前和術后變化。患者主觀評價∶采用問卷調查方式進行，評價標準分為滿意（自覺改善明顯，效果持久）、有效（自覺有部分改善）、不滿意（自覺無明顯改善，或改善維持時間過短）。

3.結果

干細胞一脂肪復合組織移植后，通過12個月臨床隨訪，觀察癥狀均有不同程度的改善，其中，明顯改善者20例，有效者17例。皮膚在皺紋、斑點、毛孔、紋理4個方面定量分析數據均降低，顯示移植后皮膚特性發生改變。37例患者對治療效果滿意或自覺有效，3例面部老化患者自覺效果不明顯，總滿意率92.5%（圖1）。無患者出現感染、排斥和其他不良反應發生。

圖1 干細胞一脂肪復合組織修復右面部凹陷前后對比

4.討論

人臍帶血干細胞是臍帶以及胎盤近胎兒側血管內的血液，包括間充質干細胞以及造血干細胞，其是一種具有多向分化潛能以及高度自我更新能力的干細胞。臍帶血干細胞取材方便，來源廣泛，增殖分化能力強，免疫原性弱，移植物抗宿主病發生率低，越來越多地被應用于臨床治療各種類型的疾病[4-6]。人臍帶血干細胞發揮作用的機制可能包括向功能細胞分化和分泌生長因子兩方面。

人臍帶血干細胞可以分泌多種生長因子，如表皮生長因子、成纖維細胞生長因子、血管內皮生長因子，進而使膠原合成和血管生成增加，使皮膚質地發生變化[7]，且人臍帶血干細胞在真皮層的微環境中，可分化為成纖維細胞，而皮膚成纖維細胞在皮膚衰老過程中亦發揮關鍵作用。成纖維細胞是細胞外基質蛋白、糖蛋白、粘附分子和各種細胞因子的來源[8]，并直接影響角質形成細胞、脂肪細胞和肥大細胞。本研究探討人臍帶血干細胞在臨床中的應用，將體外培養的人臍帶血干細胞回注到患者皺紋部位的真皮淺層，如頸紋、魚尾紋、鼻唇溝、眉間紋等，結果顯示，皺紋均得到明顯改善。可見，人臍帶血干細胞可進行除皺治療，其在面部年輕化中的應用將受到更多的關注。

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