瑪咖不同提取物對雄性小鼠交配能力的影響

陳愷 韋會平(通訊作者)

（攀枝花學院醫學院 四川 攀枝花 617000）

瑪咖（LepidiummeyeniiWalp）為十字花科獨行菜屬一年生草本植物，原產于海拔3500米以上的秘魯安第斯山脈地區，在原產地作為當地主要農產品已有上千年的栽培歷史，因其具有增強生育力和提高性功能的作用而聞名于世[1]。上世紀80年代聯合國糧農組織(FAO)建議世界各國推廣瑪咖種植[2]，2011年開始，該作物被衛生部作為新資源食物被引入國內，開始在我國大量推廣人工種植。2012-2014年，瑪咖被引入到四川攀枝花市高山地區進行規模化種植，并因其穩定的產量和較高的品質聞名國內外。2015年后，因為我國各地盲目大規模發展瑪咖種植及國內外市場變化等原因，瑪咖產業一落千丈，面臨破產。目前，關于瑪咖的實際藥用保健價值眾說紛紜。有人認為瑪咖較高的藥用價值不容否認，也有人認為瑪咖根本就沒有什么真正的藥用功效。本文以攀枝花產瑪咖為研究對象，通過動物試驗觀察其對雄性動物交配能力的影響，研究期藥效活性部位，為進一步深入研究其化學成分和藥效提供參考。

1.材料與方法

1.1 藥品與試劑

瑪咖由攀枝花三博士科技有限公司提供，為產自四川省攀枝花市海拔3300的格薩拉風景區的正品曬干黃瑪咖。苯甲酸雌二醇由寧波第二激素廠生產（批號20151121）。萬艾可由美國輝瑞公司生產（批號1183028）。其它試劑均為市售分析純。SZX7型體視顯微鏡(日本，Olympus公司)；DMIL-LED 型倒置顯微鏡（德國，Leica 公司），SC-100-01-02-C 型一次性精子計數板（荷蘭，Leja 公司），Direct-Q5 型MilliQ 超純水器（美國，Millipore 公司）。其它有低溫高速離心機、電子天平、微量移液器、手術器械、眼科剪、眼科鑷、持針鉗、酒精燈等。

1.2 試驗動物

6～8周齡清潔級昆明系小鼠，購于重慶市中藥研究所動物中心（動物合格證號SCXK(渝)20150006），雌、雄各半，體重18-22g。雌鼠群養，雄鼠單籠飼養，控制光照時間為每日7∶00～18∶00，飼喂普通飼料，自由飲水。

1.3 瑪咖提取物的制備

瑪咖樣品粉碎，過40目篩，依次分別用10倍體積的石油醚、無水乙醇、蒸餾水在50℃下磁力攪拌回流提取3次，每次30min，回收溶劑，再分別用1%聚山梨酯溶解，得到醚提取物、醇提取物、水提取物三種不同的混懸劑。另取等量瑪咖粉末樣品，混合用蒸餾水作溶劑進行提取，同樣的方法制備得到混合水提取物的混懸劑。所有混懸劑瑪咖含量均相當于生藥250mg/mL.

1.4 試驗方法

60只成年雄性小鼠隨機平均分為6組：對照組（0.9%生理鹽水）、萬艾可組（0.013g/kg BW）、醚提取物組（5 g生藥/kg BW）、醇提取物組（5g生藥/kg BW）、水提取物組（5g生藥/kg BW）及混合水提取物組（5g生藥/kg BW）。除萬艾可組于試驗前1h灌胃給藥外，其余各組均連續灌胃給藥28d。灌胃容積均為0.2mL/10gBW，qd。實驗前48h雌鼠皮下注射苯甲酸雌二醇（0.02mg/只），再于晚上7～11時將雄性小鼠混合放入籠中5min，使其適應環境，然后每籠加入1只雌鼠，觀察并記錄捕捉潛伏期（雄鼠第1次捕捉雌鼠的時間）、20min內雄鼠捕捉雌鼠的次數、交配潛伏期（雄鼠第一次與雌鼠交配的時間）、20min內交配次數[3]。數據以（±s）表示，使用SPSS 17.0 版軟件，通過t檢驗進行組間比較。

2.結果與分析

試驗結果見表1。瑪咖醚提取物組、醇提取物組對雄鼠捕捉潛伏期、捕捉雌鼠次數、交配潛伏期及20min內交配次數無顯著影響（P＞0.05），而水提取物組、混合水提取物組均可顯著降低雄鼠捕捉潛伏期和交配潛伏期，并增加捕捉雌鼠次數和20min內交配次數。混合水提取物組和水提取物組相比，前者的捕捉潛伏期和交配潛伏期顯著低于后者，前者的捕捉雌鼠次數和20min內交配次數顯著高于后者。

表1 瑪咖不同提取物對雄性小鼠交配能力的影響（±s，n=10）

表1 瑪咖不同提取物對雄性小鼠交配能力的影響（±s，n=10）

注：與對照組比較，*代表P＜0.05，**代表P＜0.01

組別 捕捉潛伏期（s） 捕捉次數 交配潛伏期（s） 交配次數對照組 132.3±12.14 8.7±1.42 317.3±14.26 4.2±1.23醚提取物組 133.1±14.51 8.4±2.11 322.4±19.21 4.5±1.45醇提取物組 132.8±12.65 8.8±1.47 318.4±15.39 4.4±1.12水提取物組 119.5±11.12* 9.9±1.22* 300.2±10.54* 5.9±0.89*混合水提取物組 105.3±10.16** 11.1±1.83** 283.4±18.21** 7.2±1.64**萬艾可組 94.6±11.21** 13.5±1.79** 251.3±12.66* 8.3±1.25**

3.結論與討論

本試驗中，瑪咖醚提取物組、醇提取物組對雄鼠捕捉潛伏期、捕捉雌鼠次數、交配潛伏期及20min內交配次數無顯著影響，而水提物則能顯著降低雄鼠捕捉潛伏期和交配潛伏期、增加捕捉雌鼠次數和20min內交配次數。這說明，瑪咖水提物能顯著提高雄性小鼠的性功能。以往的很多試驗都證明，瑪咖能顯著提高試驗動物的性功能[3-9]。本試驗結果與曹東、王曦晨等人的研究結果相同[3-4]。

本試驗中，瑪咖在用石油醚、乙醇先行提取后，再用水提取得到的水提取物，和不用石油醚、乙醇先行提取，而直接用水提取得到的混合水提取物的藥用功效存在顯著差異。后者的雄鼠捕捉潛伏期、交配潛伏期均顯著低于前者，捕捉雌鼠次數、20min內交配次數均顯著高于前者。這充分說明在用石油醚、乙醇和水依次提取瑪咖的過程中，可能有部分藥用活性成分進入了石油醚或乙醇的提取物中，導致水提取物的藥用功效顯著降低。而混合水提取物中，存在多種成分的共同作用，導致其對雄鼠性功能的影響更為顯著。

有研究資料表明，關于瑪咖提高雄性小鼠精子數量的機制，可能與其中含有的瑪咖酰胺、瑪咖烯以及豐富的精氨酸和果糖等關系密切[10-11]。王曦晨等人的研究表明，瑪咖水提浸膏具有提高半去勢大鼠的交配能力和陰莖勃起功能的作用，其機制可能與調整失衡的血清性激素水平有關[4]。我們以往對攀產瑪咖的測定分析表明，瑪咖中生物堿、水溶性多糖、精氨酸、Zn的含量都較高[12]。現代科學研究證明，這些成分本身與動物的性能力、精子的生成或活力等都有一定關系。本試驗中，瑪咖混合水提取物對雄性小鼠性交配能力的影響要顯著高于水提取物，這證明瑪咖對小鼠性功能的影響極有可能是這些成分共同作用的結果。

綜上所述，本試驗充分表明，瑪咖能顯著提高雄性小鼠的交配能力，藥用活性成分主要存在于水提物中，且可能是多種成分共同作用的結果。

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