免疫組化技術在病理診斷中的應用分析

418000湖南醫藥學院醫學院病理教研室，湖南醫藥學院第一附屬醫院病理科(懷化)

近年來，腫瘤的診斷水平不斷提高，但很多腫瘤細胞的形態和組織結構類似，僅依據形態學觀察無法保證診斷準確率[1]。免疫組織化學技術(IHC)簡稱免疫組化，是當前病理學診斷的常用方法。本研究采用IHC對腫瘤患者組織標本進行診斷，以探討該技術用于腫瘤診斷的價值，為臨床治療提供依據，現報告如下。

資料與方法

2015年11月-2017年6月收治腫瘤患者60例，男34例，女26例；年齡28～75歲，平均(47.20±2.59)歲；發病至入院1.2～8.4個月，平均(4.20±1.14)個月；包括轉移性腫瘤36例，肝癌16例，肺癌5例，血管瘤3例。用隨機數值法將患者分為觀察組和對照組，各30例。兩組性別、年齡、病程和腫瘤類型等臨床資料比較，差異無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。患者均簽署知情同意書。

方法：①對照組：采用活檢穿刺法診斷：進行針對性穿刺活檢，于超聲下完成活檢過程，并與標準組織比較。②觀察組采用免疫組化技術進行診斷：取患者組織(大小1 cm×2 cm×0.2 cm)浸泡于甲醛溶液中，2 h后先后采用透明液、脫水液和浸蠟液進行相應處理1 h，將組織埋于石蠟內，經常規切片(厚度以2 μm為宜)后對組織進行免疫組化染色，于37℃下孵育10 min，經蒸餾水沖洗、高壓鍋修復和PBS洗滌，于常溫下孵育2h， 采 用 PBS洗 滌 ， 加 入UltrasenSitiveTM SP試劑，之后DBA顯色，后使用樹膠封固[2]。

觀察指標：免疫組化染色呈棕黃色則為陽性[3]。采用我院自擬的問卷調查表調查滿意度，包括3項，至少2項≥70分為滿意。

統計學方法：采用SPSS 18.0軟件對本次研究數據進行分析，相關指標評分等計量資料以(x±s)表示，計數資料比較采用χ2檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義。

結 果

診斷結果：觀察組診斷陽性率較對照組高，差異有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組診斷結果比較

滿意度調查結果：觀察組滿意度各項分值及滿意率均高于對照組(P＜0.05)，見表2。

討 論

IHC是組織化學的分支，是通過標記特異性抗體或抗原檢測被檢組織內抗原或抗體分布情況的技術，有較高的靈敏性、特異性和簡便性，能結合形態和功能代謝、定性、定位和定量、細胞水平和超微結構以及基因水平和蛋白水平進行檢測。近年來該技術日趨成熟，隨著抗原修復技術、敏感性更高的檢測系統的建立，自動免疫染色系統，尤其是即用型試劑盒抗體的商品化，IHC在病理診斷中的應用日益廣泛，常用于各類型腫瘤的病理診斷。有報道顯示其診斷效果理想。與常規技術相比，免疫組化技術可在診斷過程中觀察組織切片中抗原的數量及分布情況，對其進行定位、定性及定量研究[4]。該技術所用標本主要分為組織標本和細胞標本，石蠟切片是制作組織標本最常用方法，該方法能保存好組織形態，利于長時間保存和進行染色對照觀察，并可對切片組織進行修復。此外，研究指出，采用IHC技術對患者無傷害，因而易被其接受，診斷配合度較高。本研究結果顯示，采用免疫組化技術診斷的觀察組患者的陽性率高達83.33%，顯著高于對照組，且各相關指標評分和滿意度高于對照組，表明其應用于腫瘤病理診斷可提高病理診斷陽性率，對患者身心無負面影響，且檢查依從性和滿意度較高。該結論與既往報道一致。

表2 兩組患者滿意度比較(x±s，分)

IHC可用于鑒別腫瘤組織起源，判定未分化惡性腫瘤性質，鑒別診斷各種小圓形細胞、卵圓形細胞、大細胞、上皮樣細胞與多行性細胞腫瘤，確定轉移性腫瘤的原發部位，及時發現微小轉移病灶，鑒別各類淋巴瘤、淋巴組織增生性疾病與淋巴瘤，并能對其他各系統腫瘤進行診斷，尤其是近年來新型實用性抗體的不斷出現使該技術成為重要的病理診斷輔助工具，同時也是疾病診斷的重要依據和相關診斷標準的重要內容，在病理學中的地位日益突出[5]。但當前免疫組化技術仍存在局限性，主要表現為抗體解釋及其特異性方面，在具體操作中須以適當陽性或陰性為對照，如對照組質控不到位，可能對診斷結果產生影響。此外對技術操作流程的規范性有很高要求，并須考慮假陽性和假陰性的干擾[6]。因此，應重視制定并實施相關質控措施，確保試劑處于最佳濃度，進一步規范操作，努力保持抗原修復的一致性和免疫染色質量，并須熟悉抗體的陽性定位，以提高診斷效果。

綜上所述，IHC在腫瘤診斷中具有重要的應用價值，臨床醫生和病理技術人員應善于總結經驗，確保操作流程的標準化和規范化，提高診斷效果，以指導臨床診治工作。

[1]程曉菊.質量控制對免疫組化制片技術質量的影響[J].中國社區醫師,2017,33(7):5-8.

[2]Jinlai Dong,Lina Song,Jun-Jie Yin,et al.Co3O4 Nanoparticles with Multi-Enzyme Activities and Their Application in Immunohistochemical Assay[J].ACS applied materials& interfaces,2014,6(3):1959-1970.

[3]王學高.病理診斷中免疫組化技術的應用探討[J].中國保健營養,2017,27(9):431.

[4]魯波,任麗芳,李美平,等.雙拼對照法在免疫組織化學染色中應用[J].臨床與實驗病理學雜志,2014,30(3):337-338.

[5]李文龍.試論免疫組化技術在病理診斷工作中的應用進展[J].心理醫生,2015,21(10):75-76.

[6]姬國強.免疫組化技術和常規技術在腫瘤病理診斷中的效果對比[J].中國當代醫藥,2015,22(23):46-48.