乙型肝炎病毒標志物免疫學檢驗的質量控制管理

潘雪夜

長春市第六醫院檢驗科,吉林長春 130052

乙型肝炎是一種常見的傳染性疾病,嚴重威脅著人民的身體健康。乙肝病毒(HBV)標志物俗稱兩對半,包括HBsAg和抗-HBs、HBeAg和抗-HBe、抗-HBc,乙肝病毒標志物檢驗是臨床重要的檢測項目。HBV病毒侵人人體血液引發病毒血癥,隨血液進入肝細胞轉錄復制,釋放病毒抗原性物質,引發機體產生免疫反應形成抗原抗體復合物造成肝細胞造成損傷[1-2]。臨床免疫學檢驗是一種常用的檢驗手段,包括免疫原與血清制備、抗原抗體反應、化學發光免疫、放射免疫等檢測技術,是一種重要的臨床疾病檢驗方式,檢測結果是臨床重要的診斷治療依據[3-4]。加強乙型肝炎病毒標志物的免疫學檢驗可以盡早發現感染者,及早治療。該文選擇吉林省衛生廳臨床檢驗中心下發的200份乙肝質量控制血清為檢測對象,探討進行乙肝病毒標志物免疫檢驗質量控制管理的相關措施。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇吉林省衛生廳臨床檢驗中心對乙型肝炎病毒檢測進行質量控制管理研究下發的200份乙肝質量控制血清為檢測對象,將其隨機分為觀察組、對照組,每組100份。

1.2 方法

1.2.1 檢驗方法及措施 兩組血清樣本均采用常規(ELIsA)方法進行檢驗。試劑: HBsAg試劑盒(上海榮盛生物有限公司生產),質控品(省臨床檢驗中心發放);儀器:洗板機和酶標儀(上海三科儀器廠生產)。

1.2.2 檢測質量控制管理措施 對照組按照常規臨床免疫檢驗質量控制管理措施。觀察組:檢測過程進行全面的質量控制管理,①定期檢定實驗室檢測儀器設備,做好檢測儀器的定期保養,保持實驗室環境、檢測儀器完好;②做好室間質量控制管理,選擇可靠的室間質控試劑和質控品,以確保檢測的規范化;③做好室內質量控制,做好檢測標本的來源控制,在具體的加樣、孵育、冼板、顯色和測定操作過程中嚴格標準化,加強樣本保存控制管理。具體措施:(1)定期進行實驗室環境維護,確保實驗室內空間充分、照明良好、空調運轉正常;加強實驗儀器設備的校準、保養維護,定期校準微量加樣器、酶標儀和溫度計,以確保實驗結果不因儀器出現偏差。(2)室間質量控制,試劑質量和質控品是做好室間質量控制的保證。檢驗試劑決定檢測結果的準確性和可靠性,要選擇國家食藥監督局注冊批準、信譽高的廠家,避免經常更換廠家。質控品為檢驗必需品,包括試劑盒內部和外部對照質控品。內部質控品為試劑盒內部的對照血清,用于判斷每次實驗有效性,只能用于同批號試劑盒中。外部質控品是強陽性、弱陽性、陰性質控血清,為試劑盒外部單獨購買,用于判斷該批樣品檢測的有效性。(3)室內的質量控制 ①樣本的控制 一要避免溶血及細菌污染,溶血釋放的血紅蛋白有過氧化物酶活性,可與底物作用造成假性結果。細菌分泌的酶類物質可分解抗原抗體蛋白質對檢測造成非特異性于擾;樣本分離不全,血清中殘留的纖維蛋白原與試劑可發生非特異性反應出現假陽性;取樣試管若含肝素及乙二胺四乙酸(EDTA)鹽可因肝素強大負電荷及EDTA鹽抑制辣根過氧化物酶活性出現錯誤結果。塑料試管可吸附抗原類物質,久置出現假陰性;血清中某些干擾物如類風濕因子(抗IgG抗體)也可發生非特異性反應。②操作過程的控制,反應孔的放置要盡量單種類排放,避免反應孔置于一個載孔板上可能導致的交叉污染;定量加樣器在使用一定時間后彈簧會失去一定彈性,要定期進行校正;加樣頭要盡量一次性使用,若要反復使用則必須消毒浸泡、反復沖洗、烘干后再使用;孵育:加樣完畢要先充分混勻封板并放入恒溫箱,選擇水浴加熱以防止邊緣效應并嚴格控制溫度;洗板:洗板機要定期維護保養并檢測殘留,防止堵塞及細菌滋生;清洗液要嚴格按說明書配置。③標本保存標本檢測完畢后要吸取上層血清,置-20℃冰箱保存30 d,以便有異議時復查。凍融標本混勻要采取反復顛倒方式避免劇烈震蕩。此外要避免停電反復凍融所致的蛋白分子機械剪切力破壞。(4)臨床免疫檢驗分析后的質量控制措施:標本檢驗完成后要對檢驗結果進行審查,對于異議標本要及時核對。

1.3 評價方法

預期結果以省疾控中心的檢驗結果為標準,按陰陽性進行報告并報告檢測樣品的CD值和判定值(s/co)比值,s/co≥l時陽性,＜l時陰性[5-7]。

1.4 統計方法

采用SPSS 16.0統計學軟件進行調查數據的處理分析,計數資料采用[n(%)]表示,采用χ2檢驗;P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

觀察組準確96例,錯誤4例,準確率為96%,對照組準確74例,失誤26例,準確率為74%。兩組對比觀察組明顯優于對照組,經統計學處理,差異有統計學意義(χ2=17.294,P＜0.05)。

表1 兩組檢驗準確率對比[n(%)]

3 討論

乙型肝炎是一種常見的傳染性疾病,嚴重威脅著人民的身體健康。乙肝病毒(HBV)標志物俗稱兩對半,包括HBsAg和抗-HBs、HBeAg和抗-HBe、抗-HBc是臨床重要的檢測項目。臨床免疫學檢驗是一種重要的檢驗方式,包括抗原抗體反應、免疫原與血清制備、放射免疫、化學發光免疫等技術,其結果的準確性是臨床診斷的重要依據。乙型肝炎病毒標志物檢驗是醫學常見的疾病檢驗,如何更有效地進行檢驗的質量管理,提高檢驗質量是一項十分重要的任務[8-10]。

該次研究可以看出,進行乙型肝炎病毒血清標志物質量控制可以明顯提高檢驗的準確率。①要定期維護實驗室環境并定期保養檢測儀器。②要加強實室間質量控制,選擇合適的試劑和質控品,并注意不要太頻繁更換之,以盡可能提高檢驗結果的準確性、可靠性、可重復性。③室內質量控制是進行控制的十分重要的步驟,要加強樣本來源控制,避免出現溶血、細菌感染,取樣試劑盒也要嚴格控制鋼制對結果造成干擾,出現假陽(陰)性,對于可導致出現假性結果的內源性干擾因素如一些自身抗體、類風濕因子等,也要注意區分;對于操作過程也要主要控制,反應空的放置順序要避免加樣過程中各種成分的相互干擾和影響,操作過程中定量加樣器、加樣頭等各種儀器的使用也要主要做好消毒和維護保養;加樣完成之后的孵育過程要做到充分混勻,加熱盡量選擇熱水浴等;洗板液的配置要嚴格遵守標準,洗板機要定期維護保養,避免細菌滋生。樣本的保存要注意低溫、冷藏、無菌。④在檢驗結束之后要加強檢驗結果的審核,并做好記錄。最重要的是要了解影響實驗室測定質量的實驗過程的所有步驟,實驗室測定過程中要對該實驗室存在的最薄弱的環節加以注意并積極預防。該研究中,經過有效的質量控制管理,觀察組檢測準確率為96%,明顯優于對照組的74%,兩者對比差異有統計學意義。

綜上所述,加強乙肝病毒標志物的質量控制管理,建立有本實驗室針對性的、科學可行的室內質控管理方法,同時做好室間質量控制管理,不僅可明顯提高檢驗結果的準確性,又可有力促進檢驗過程的標準化,保障檢驗結果的準確性。

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