MTA1、RECK在結腸息肉癌變過程中的表達及意義

吳義娟 陳現亮 呂 卓 趙慧敏 韓寶娟

(河北醫科大學附屬邢臺人民醫院消化內科，河北 邢臺 054000)

結腸息肉是一種結腸的良性腫瘤，是結腸癌的癌前病變，息肉的病理類型與息肉惡變密切相關，積極診斷和治療結腸息肉是控制、減少結腸癌發病的重要途徑。但目前結腸息肉癌變的機制研究較少，且其具體機制尚不明確。近年來許多研究結果顯示腫瘤轉移相關基因(MTA)1、逆轉誘導的富含半胱氨酸，含有kazal域的蛋白(RECK)與多種惡性腫瘤的發生、發展、浸潤和轉移密切相關〔1～5〕。本研究采用免疫組織化學法(SABC)檢測不同病理類型結腸息肉及結腸癌中MTA1、RECK的表達，探討其在結腸息肉癌變過程中的作用。

1 材料與方法

1.1臨床資料 2010～2015年邢臺市人民醫院腫瘤外科手術切除結腸癌標本104例，男79例，女25例，年齡31～83歲，平均61.24歲；腸鏡活檢結腸息肉標本114例(絨毛狀腺瘤44例，管狀腺瘤70例)，男82例，女32例，年齡28～74歲，平均56.66歲；正常結腸黏膜組織30例，男18例，女12例，年齡20～70歲，平均58.42歲。

1.2方法 免疫組化染色按SABC試劑盒操作說明書進行。鼠抗人MTA1單克隆抗體購自美國Santa Cruz公司，羊抗鼠辣根過氧化物酶標記二抗；兔抗人RECK單克隆抗體購自福州邁新生物技術開發有限公司，工作濃度為即用型；防脫片劑3-氨丙基三乙氧硅烷(APES)及二氨基聯苯胺(DAB)顯色劑均購自北京中杉生物技術有限公司；以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為陰性對照，用已知的陽性切片作為陽性對照。

1.3結果判斷 MTA1蛋白陽性表達于細胞核，表現為棕黃色顆粒；RECK蛋白在胞質或胞核呈棕黃色著色為陽性表達。病理染色標本均由2名病理醫師判斷，判斷標準：染色強度按棕色的深淺可分為0分、1分、2分及3分，陽性細胞比例0%為0分、1%～30%為1分、31%～60%為2分、>60%為3分；最后將著色強度及著色范圍相加，0～2分為陰性，3～6分為陽性。

1.4統計學處理 應用SPSS13.0軟件進行χ2檢驗。

2 結 果

2.1MTA1、RECK在不同結腸黏膜組織中的表達 MTA1在正常結腸黏膜、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、結腸癌組中的陽性表達率分別為84.61%(88/104)、63.64%(28/44)、42.86%(30/70)、6.67%(2/30)；結腸癌與絨毛狀腺瘤間差異有統計學意義(P<0.05)，絨毛狀腺瘤與管狀腺瘤間差異有統計學意義(P<0.05)，管狀腺瘤與正常結腸組織間差異有統計學意義(P<0.05)，即由正常結腸組織、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤至結腸癌中MTA1陽性表達率呈逐漸上升趨勢。RECK在正常結腸黏膜、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、結腸癌組中的陽性表達率分別為100.00%(30/30)、78.57%(55/70)、77.27%(34/44)、53.85%(56/104)；結腸癌與絨毛狀腺瘤間差異有統計學意義(P<0.05)，絨毛狀腺瘤與管狀腺瘤間差異有統計學意義(P<0.05)，管狀腺瘤與正常結腸組織間差異有統計學意義(P<0.05)，即由正常結腸組織、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤至結腸癌中RECK陽性表達率呈逐漸下降趨勢。

2.2MTA1、RECK在結腸息肉癌變過程中的表達 在結腸息肉中MTA1的陽性表達率分別為39.02%(32/82，輕度)、81.25(26/32，中重度)，差異有統計學意義(P<0.05)。RECK在結腸息肉(輕度異型增生)、結腸息肉(中重度異型增生)的表達率分別為90.24%(74/82)、46.88%(15/32)，中重度異型增生結腸息肉中RECK陽性表達率明顯低于輕度異型增生結腸息肉，差異有統計學意義(P<0.05)。

3 討 論

MTA1是1993年Pencil等〔6〕應用差異雜交技術從具有轉移潛能的鼠乳腺癌細胞株13762NF中篩選克隆出來的基因，通過影響染色質的狀態來調節轉錄，調控組蛋白脫乙酰基從而發揮其生物學作用。MTA1是MTA家族的一員，其與腫瘤的侵襲和轉移密切相關〔7～9〕。MTA1是一種關鍵的癌蛋白，有研究顯示MTA1在人類腫瘤中表達上調，其高表達與腫瘤的高侵襲特征如高病理分級、血管形成和預后不良等相關。MTA1 可能通過以下機制在腫瘤發展進程中發揮作用：①MTA1 基因與組蛋白去乙酰化酶結合重塑染色質的結構，實現轉錄相關蛋白的下調〔10〕；②MTA1 基因能夠改變細胞角蛋白纖維系統，使細胞獲得更強的侵襲及轉移特征〔11〕。本研究結果提示MTA1的高表達是結腸腺癌發展過程中的早期事件。

RECK基因是1998年Takahashi等〔12〕在v-Kiras轉染的NIH3T3細胞中發現的一種新的腫瘤抑制基因，具有抑制基質金屬蛋白酶表達與活性的功能。研究表明，RECK基因的表達受多種癌基因的調控〔13〕。在9號染色體短臂上，特別是RECK基因定位的9p13-p12區域上的基因，與許多腫瘤的發生、發展及浸潤轉移密切相關。近年來研究顯示RECK基因參與了許多腫瘤的發生和發展，包括肺癌、肝癌、頭頸部鱗狀細胞癌、乳腺癌及膀胱異型細胞癌等〔14～19〕。且該基因與惡性腫瘤的浸潤、轉移和預后密切相關。本研究結果提示MTA1、RECK參與正常組織、癌前病變、癌組織的發生、發展，在結腸息肉的癌變過程中起重要作用。