早期乳腺癌患者血清中VEGF—C與前哨淋巴結狀態的相關性研究

張世玉+劉漢成+張宏旭

摘 要：目的 探討早期乳腺癌患者血清中血管內皮生長因子-C（VEGF-C）的表達水平與患者前哨淋巴結轉移及臨床病理學特征的相關性。方法 收集我科自2016年9月～2017年6月確診的146例早期乳腺癌患者，術前清晨均留取外周靜脈血送檢驗科，采用ELISA法測定血清VEGF-C水平，分析VEGF-C表達水平與前哨淋巴結轉移狀態及臨床病理參數（月經狀態、淋巴結轉移、腫瘤大小、血管內皮生長因子受體-EGFR）的關系。結果 早期乳腺癌患者VEGF-C的分布水平在前哨淋巴結類別上不同，前哨淋巴結有轉移組高于前哨淋巴結無轉移組，差異有統計學意義（P<0.05）。在淋巴結轉移類別上不同，淋巴結有轉移組高于淋巴結無轉移組，差異有統計學意義（P<0.05）。在腫瘤大小類別上，腫瘤大小介于2～5 cm組高于腫瘤<2 cm組，差異有統計學意義（P<0.05）。在月經狀態和EGFR表達類別上相同，差異無統計學意義（P>0.05）。結論 早期乳腺癌患者血清VEGF-C水平與前哨淋巴結轉移及腋窩淋巴結狀態呈正相關，血清VEGF-C的水平可以被認為是早期乳腺癌患者前哨淋巴結狀態的預測生物標志物。

關鍵詞：乳腺腫瘤；血管內皮生長因子-C；前哨淋巴結

中圖分類號：R737.9 文獻標識碼：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.02.024

文章編號：1006-1959（2018）02-0071-03

Abstract：Objective To investigate the correlation between the expression of vascular endothelial growth factor -C（VEGF-C）and sentinel lymph node metastasis and clinicopathological characteristics in patients with early breast cancer.Methods A total of 146 patients with early breast cancer diagnosed from September 2016 to June 2017 in our department were collected and their peripheral venous blood was collected in the early morning before operation.Serum VEGF-C was measured by ELISA method.To analyze the relationship between VEGF-C expression and sentinel lymph node metastasis and clinicopathologic parameters（menstrual status，lymph node metastasis，tumor size，vascular endothelial growth factor receptor-EGFR）.Results The distribution of VEGF-C in early breast cancer patients was different in the sentinel lymph node category.The metastasis of sentinel lymph node was higher than that in sentinel lymph node without metastasis，the difference was statistically significant（P<0.05）.In the different types of lymph node metastasis，lymph node metastasis group was higher than lymph node metastasis group，the difference was statistically significant（P<0.05）.In the category of tumor size，tumor size between 2～5 cm were higher than that of tumor <2 cm group，the difference was statistically significant（P<0.05）. In the menstrual status and the expression of EGFR in the same category，there was no statistically significant difference（P>0.05）.Conclusion Early breast cancer patients serum VEGF-C level was positively correlated with sentinel node status lymph node metastasis and lymph，the level of serum VEGF-C can be considered as predictive biomarkers of lymph node status in patients with early breast cancer sentinel.

Key words：Breast tumor；Vascular endothelial growth factor -C；Sentinel lymph node

乳腺癌（breast cancer）是女性最常見的惡性腫瘤之一，在女性最常見惡性腫瘤死亡原因中居第五位[1]。我國乳腺癌發病率年增幅速度是世界平均水平的2倍，嚴重威脅女性生命與健康[2]。腋窩淋巴結狀態是評估乳腺癌患者預后的一項主要因素。為確定腋窩淋巴結狀態，必須通過選擇行前哨淋巴結活檢術（SLNB）或腋窩淋巴結清掃術（ALND）來進行淋巴結的組織學分析，目前ALND逐漸被SLNB所取代。研究發現[3]，VEGF-C可以作為強有力的促淋巴管生成因子來促進腫瘤組織淋巴管的新生，增強淋巴管的通透性，利于腫瘤細胞的轉移擴散。本實驗通過研究血清VEGF-C水平以確定其是否可以作為前哨淋巴結狀態的一個預測因子。endprint

1資料與方法

1.1一般資料 回顧性研究2016年9月～2017年6月于我科確診的146例女性乳腺癌患者，年齡30～79歲，平均年齡（51.84±10.22）歲。納入標準：①術前均無放化療、內分泌治療史；②非炎性、哺乳期乳腺癌；③無血小板相關血液系統疾病病史；④無淋巴系統疾病病史；⑤無其他腫瘤病史；⑥臨床病理資料完整；⑦術前臨床分期（CTNM）為T1-2N0M0；⑧術前均完成血清VEGF-C檢測；⑨所有患者均行前哨淋巴結活檢術+乳腺癌改良根治術。排除標準：長期口服抗血小板藥物患者。

1.2方法 入組病例均于入院后24 h內術前清晨空腹抽取外周靜脈血5 ml，血液標本靜置2 h后，以3000 r/min離心5 min后取上清液。采用酶聯免疫吸附試驗ELISA法檢測血清VEGF-C。術中均應用亞甲藍+吲哚菁綠作為示蹤劑行前哨淋巴結活檢術，并每例成功取得了前哨淋巴結數（≥3枚），術中送冰凍病理，由兩名主任病理醫師進行制作、閱片。以下臨床病理學特征前哨淋巴結轉移（有、無）、淋巴結轉移（有、無）、腫瘤大小（cm）、EGFR（陰性、陽性）直接從病理報告中收集，病理取材及制片均由高年資技師完成，病理閱片由副主任病理醫師以上級別完成，最終病理報告由主任病理醫師審核。

1.3統計學方法 采用SPSS21.0軟件進行處理。非正態分布的計量資料以P50（P25，P75）表示，計量資料組間比較采用非參數檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1血清VEGF-C水平與臨床病理學特征的相關性 早期乳腺癌患者VEGF-C的分布水平，在月經狀態和EGFR表達類別上相同，差異無統計學意義（P>0.05）。腫瘤大小介于2～5 cm組高于腫瘤<2 cm組，差異有統計學意義（H=2.892，P<0.05），見表1。

2.2血清VEGF-C水平與早期乳腺癌患者前哨淋巴結及腋窩淋巴結狀態的相關性 VEGF-C分布水平在前哨淋巴結類別上不同，前哨淋巴結有轉移組高于前哨淋巴結無轉移組，差異有統計學意義（H=2.138，P<0.05）。VEGF-C分布水平在淋巴結轉移類別上不同，淋巴結有轉移組高于淋巴結無轉移組，差異有統計學意義（H=2.272，P<0.05），見表1。

3討論

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一。早期乳腺癌占乳腺癌患者的85%以上，早期乳腺癌患者腋窩淋巴結狀態對于患者手術方式的選擇、預后及術后輔助治療的選擇具有非常重要的影響[4]。依據前哨淋巴結活檢術后病理結果，決定行保留腋窩或不保留腋窩兩種術式。盡管接受前哨淋巴結活檢術的患者中只有1/3有腋窩淋巴結轉移，剩下的2/3決定給予何種輔助治療是基于其他已知的預后因素（年齡、月經狀態、組織學分級、分子亞型等）。但考慮到患者手術費用，手術并發癥及與SLNB技術相關的時間和復雜性，本實驗研究VEGF-C以確定其是否可以作為前哨淋巴結狀態的一個預測因子[5]。

近年來綜合各種臨床、解剖和病理變量因素，已開發了多種列線圖來預測前哨淋巴結及腋窩淋巴結的狀態，但臨床實用價值較低。如依據腫瘤大小、病理類型、Luminal分型等制作出的多因素Logistic回歸預測前哨淋巴結狀態模型：P=1/1+ExpΣ（5.319-1.038X1-2.724X2-1.841X3-1.687X4-3.113X5-1.418X6），預測乳腺癌SLN轉移的準確度為79.0%、特異度為87.0%，但公式復雜、臨床應用難度大[6]。因此，探索新的可以預測前哨淋巴結狀態的因子成為了臨床研究的熱點。

VEGF家族主要由VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E及PLGF組成，國外研究已證實VEGF-C、VEGF-D及受體VEGFR-3在淋巴管生成中的重要性[7]。VEGF-C可通過直接與VEGFR-3結合和改變淋巴管內皮細胞肌動蛋白的結構兩種方式來促進淋巴管的大量生成。Yin J等[8]研究發現乳腺癌的淋巴結轉移率隨著VEGFR-3陽性表達脈管的比例增加而增加，提示乳腺癌的淋巴結轉移是經VEGFR-3陽性表達脈管形成的。VEGF-C在乳腺癌淋巴擴散中的作用已經在使用小鼠模型的實驗中建立，其中使用RNAi抗VEGF-C能顯著降低淋巴結轉移風險[9]。在結腸癌小鼠模型中也觀察到在使用RNAi抗VEGF-C后對淋巴擴散的抑制[10]。國外也有研究通過對原發性腫瘤手術標本的免疫組織化學分析，發現VEGF-C的表達增加與周圍淋巴管毛細血管密度和淋巴結轉移的風險相關，其他實體瘤的研究已經證明了淋巴結擴散的風險與非小細胞肺癌、結腸癌、胃癌和食管癌等腫瘤血清VEGF-C水平的高水平存在統計學上的顯著關系[11]。在116例診斷為可手術的非小細胞肺癌患者的研究中，VEGF-C血清水平低于1850 pg/ml，預測了縱隔淋巴結腺癌切除術組織學研究中縱隔淋巴結陰性，特異性為77%。當VEGF-C的水平與增強CT的結果相結合時，這種特異性增加到80%[12]。

本研究結果顯示，早期乳腺癌患者血清VEGF-C水平與前哨淋巴結及腋窩淋巴結狀態均具有相關性，轉移組均較未轉移組血清VEGF-C水平高，差異有統計學意義（P<0.05）。本研究檢查了早期乳腺癌患者群體，接受非常相似的治療，并進行前瞻性評估并納入分析。這些特征使我們能夠在收集和儲存標本中獲得良好的質量用于測定VEGF-C，在進行前哨淋巴結活檢和獲得手術標本的同時進行評估。

綜上所述，VEGF-C血清水平可以被認為是早期乳腺癌患者前哨淋巴結狀態的預測生物標志物。VEGF-C積極參與了乳腺癌的新生血管及淋巴管的增殖過程，進而促進乳腺癌的生長和轉移，檢測血清VEGF-C水平可以更好的幫助臨床醫生預測乳腺癌前哨淋巴結及腋窩淋巴結狀態，為乳腺癌的早期診斷、制定個體化的治療方案提供重要依據。但本研究樣本量較小，且未能劃定可提示前哨淋巴結轉移的VEGF-C的具體參考值范圍，待進一步研究。endprint

參考文獻：

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收稿日期：2017-7-31；修回日期：2017-8-1

編輯/楊倩endprint