遲發型阿爾茨海默病患者腦脊液神經絲輕鏈蛋白含量測定的meta分析

管細紅 黃文娟 鄢 茵 董永海

阿爾茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)是一種進行性發展的神經系統退行性疾病，臨床中常以記憶障礙、人格及行為改變等癡呆表現為基本特征，65歲以后發病的稱之為遲發性AD。目前該病的病因未明，曾有研究報道AD與腦脊液中神經絲蛋白含量有一定聯系，尤其是與其中的輕鏈蛋白(neurofilament light，NFL)關系密切[1-3]。然而既往研究結論參差不齊[4-11]。通過文獻搜索發現，目前國內外尚無腦脊液中NFL水平與遲發性AD關系的系統評價，因此本研究擬采用meta分析的方法，綜述NFL對遲發性AD的影響，以期為進一步研究AD的危險因素及提出相應的防治策略提供參考依據。

材料與方法

1.文獻篩選標準

(1)納入標準：①病例-對照研究；②AD的病例診斷標準依據精神疾病診斷與統計手冊或美國國立神經病語言障礙卒中研究所AD及相關疾病協會標準；③研究對象年齡大于65歲；④研究中報告了病例組和對照組的樣本量、均數、標準差或者可以通過報告數據進行相互轉換可計算效應值的數據；⑤語種限于中文和英文；⑥文獻發表時間截止至2017年1月。

(2)排除標準：①重復發表文獻或者來源于同一個樣本；②動物實驗；③數據不全。

2.文獻篩選策略

電子檢索PubMed、EMBase、中國知網、維普數據庫、萬方數據庫中有關遲發性AD腦脊液中NFL含量的病例對照研究。中文檢索詞為：阿爾茨海默病/老年性癡呆，神經絲輕鏈蛋白，病例對照研究；英文檢索詞為：neurofilamentlight/NFL，Alzheimer/AD/dementia，case-control study。

3.文獻篩選與資料提取

由本課題組的兩位研究人員依據既定的文獻納入和排除標準獨立篩選文獻并提取數據資料。文獻提取基本信息包括第一作者姓名、發表時間、研究地區、病例組和對照組的樣本量以及腦脊液中NFL的均數和標準差等。

4.質量評價方法

應用觀察性研究偏倚風險評估工具Newcastle-Ottawa Scale(NOS)量表進行三方面的質量評價：研究人群的選擇、組間可比性、暴露因素的測量。若NOS得分為1～3分，則文獻質量評為低質量；4～6分為中等質量；7～9分為高質量。

5.統計分析

應用Stata 12.0進行統計分析，效應統計量為標準化均數差(SMD)。若經異質性檢驗分析，P>0.10認為各研究間無異質性；P≤0.10，各研究間存在異質性。異質性的大小用統計量I2判定：≤25%為低異質性， 25%～75%為中異質性，>75%為高異質性。若異質性較小，采用固定效應模型進行meta分析；若異質性較大，則采用隨機效應模型。發表偏倚的評估采用Egger′s回歸檢驗。采用敏感性分析(單個研究逐一排除后重新計算效應量大小)評估結果的穩定性。

結 果

1.納入文獻的基本情況

依據既定的文獻檢索策略，共篩選出435篇電子文獻，通過進一步的排出不符合納入標準的文獻后，最終共有8篇文獻納入meta分析中。文獻檢索流程見圖1。

篩選出的8篇文獻，發表時間跨度為1999-2016年，同時發現其中的7篇來源于瑞典地區[4-6,8-11]，1篇來源于荷蘭[7]，其他國家的研究并未發現。共納入研究對象1905人，其中遲發型AD患者1468人，對照437人。

圖1 文獻檢索流程圖

2.納入文獻的質量

通過運用NOS量表進行文獻質量評價，表1顯示2篇文獻得6分[8,11]，2篇得7分[4,6]，4篇得8分[5,7,9-10]。總體來看，納入的文獻質量為中至高質量。

3.腦脊液中NFL水平與遲發型AD關系的meta分析

meta分析結果顯示，各研究間存在異質性(P<0.001)；I2=98.2%。采用隨機效應模型進行統計量的合并，結果顯示SMD=2.49，95%CI=1.13～3.85。森林圖見圖2。

4.發表偏倚評價

Egger′S回歸圖顯示(圖3)，截距穿過0點，同時檢驗結果顯示t=1.98，P=0.095>0.05；均提示無發表偏倚。

表1 納入研究文獻的基本資料

*：NA：不詳。

圖2 腦脊液中NFL水平與遲發型AD關系的森林圖

圖3 腦脊液中NFL水平與遲發型AD關系的Egger′s回歸圖

5.敏感性分析

逐一剔除單個文獻后合并其余研究的效應量，然后與總的效應量進行比較，結果顯示本研究的穩健性較好(圖4)。

圖4 腦脊液中NFL水平與遲發型AD關系的敏感性分析圖

討 論

AD是癡呆中最常見的一種類型，預計2030年我國將有1603 萬人患 AD[12-13]。隨著對AD臨床研究的不斷深入，各種生物標志物逐漸被發現，腦脊液中的NFL就是近幾年新興的一種生物標志物。

既往有關遲發型AD患者腦脊液NFL水平的研究由于各個研究樣本量比較小，研究對象特征不一等多方面的限制，研究結論不盡相同。本研究運用meta分析的方法盡可能地合并同質研究，結果顯示遲發型AD患者腦脊液中的NFL水平高于正常對照組(SMD=2.49,95%CI=1.13～3.85)，差異有統計學意義，提示腦脊液中較高水平的NFL可能是遲發型AD發病的一個危險因素。目前腦脊液NFL雖然尚未廣泛用于臨床診斷，但此研究結果將對AD輔助診斷具有重要意義。

在納入的8篇文獻研究中，7篇來自瑞典，說明瑞典地區對AD疾病NFL生物標志物的研究關注度較高，而在其他國家尚未引起重視。Jong[7]以荷蘭某醫院的76～90歲遲發型AD患者為研究對象，發現AD患者腦脊液中NFL含量僅為15.2pg/mL，并且發現與對照組相比無統計學差異。而在瑞典地區的7個研究中AD患者腦脊液的含量范圍348～1995pg/mL，并且與對照組比較均有統計學差異。可見在遲發型AD患者中腦脊液含量水平變化范圍比較大，其原因可能與AD患病進程有關[5]。

本研究存在幾個不足之處：①由于病例對照研究在因果推論上的自身局限性，后期仍需要前瞻性的隊列研究進一步證實研究結論；②由于樣本量較少，因此得出結果的可靠性仍需今后大樣本量的研究進行驗證； ③納入的研究主要來于瑞典地區，本研究結果在其他國家是否能得到相同的結論尚需多中心的研究證實。

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