蠟樣芽胞桿菌BCJB01粉劑防治番茄根結線蟲的研究

王貽蓮，劉寶軍，李玲，扈進冬，李紀順*，張薇，盧德鵬

(1. 齊魯工業大學(山東省科學院)，山東省科學院生態研究所，山東省應用微生物重點實驗室，山東 濟南 250103；2.農業部農藥檢定所，北京 100026；3.山東泰諾藥業有限公司，山東 諸城262200)

根結線蟲(Meloidogynespp.)是一種高度專化型的土傳性病原物。據報道，我國約有50%的溫室蔬菜被根結線蟲為害，每年造成的經濟損失約4 億美元[1]。目前，生產上對番茄根結線蟲的防治仍以化學防治為主，隨著綠色食品、有機食品需求的增加，生物安全性高、環境友好的生防制劑成為近年來的研究熱點。大量研究表明，利用微生物防治及生態調控根結線蟲是最為安全、有效的防控措施[2]。但由于土壤環境復雜，土壤中存在的抑菌物質限制了微生物菌劑藥效的發揮，導致微生物菌劑田間防效較低，農民不愿采用。為提高微生物菌劑對番茄根結線蟲的防治效果，科研人員正在研究與其配套應用的施用技術。余真等[3]研究了以腐熟餐廚廢棄物有機肥為載體，添加淡紫擬青霉對番茄根結線蟲病的防治效果；肖同建等[4]利用新鮮雞糞作為生物熏蒸材料并結合拮抗菌X5覆膜日光消毒，研究了施用生防菌劑與日光消毒和生物熏蒸相結合防治根結線蟲的新技術；馬駿等[5]研究了有機添加劑對番茄根結線蟲病的防效。本文以番茄根結線蟲為研究對象，采用在整地時添加營養基質、有機肥和蠟樣芽胞桿菌BCJB01粉劑，移栽時再穴施該粉劑的處理方式，對BCJB01粉劑的配套應用技術進行了初步研究，以期為蠟樣芽胞桿菌菌劑的推廣應用提供技術支持。

1 材料與方法

1.1 供試菌劑、有機肥、營養基質及對照藥劑

微生物菌劑： BCJB01粉劑，活菌數量為15億cfu/g(自制)；對照藥劑：10%噻唑膦顆粒劑(日本石原產業株式會社)；有機肥：海藻生物有機肥(濟南澳利新型肥料有限公司)。營養基質：有機添加物(市售，主要成分暫不公開)。

1.2 供試作物

番茄，品種為“天寶一號”(濟南大江種子有限公司)。

1.3 防治對象

番茄根結線蟲(Meloidogynespp.)

1.4 試驗方法

試驗在山東省科學院生態研究所試驗田中進行，該試驗田已連續5年種植番茄，根結線蟲病株率在80%以上。在2016年6月10日開始整地，同時施用有機肥、營養基質、BCJB01粉劑及對照藥劑10%噻唑膦顆粒劑。6月24日移栽番茄苗，同時穴施BCJB01粉劑,空白對照和對照藥劑處理除外。至8月24日調查期間，試驗不再施用防治根結線蟲的藥劑。

1.5 試驗處理

設BCJB01菌劑共4個處理，常規農藥對照1個處理，空白對照1個處理，每處理3行，3次重復，隨機分布，每組處理面積約0.1畝(1畝=666.7 m2)。

空白對照：未施用BCJB01菌劑、有機肥及營養基質；

處理1:營養基質 300千克/畝+有機肥 200 千克/畝+ BCJB01菌劑 20 千克/畝；

處理2：有機肥200 千克/畝+ BCJB01菌劑 20 千克/畝；

處理3：營養基質 300 千克/畝+ BCJB01菌劑 20千克/畝；

處理4：BCJB01菌劑 20 千克/畝；

農藥對照：10%噻唑膦顆粒劑2 千克/畝。

1.6 調查及病害統計方法

2016年8月24日，調查植株受害級別，每處理組調查總株數不低于90株，記錄調查總株數和各級病株數，計算根結指數和防治效果；病株根結分級標準由輕到重劃分為5個等級[6]:0級，無根結；1級，有少數根結；2級，大部分根上有根結；3級，在蟲癭上有再生根結；4級，根結互相連接成根結團塊。

根結指數=[Σ(各級病株數×相應級數值)/(調查總株數×最高病級)]×100%；

防治效果=(對照根結指數-處理根結指數)/對照根結指數×100%。

數據統計分析用SPSS16.0 軟件進行，多重比較采用鄧肯氏新復極差檢驗法。

2 結果與分析

由表1可知，不同處理方式的BCJB01粉劑對番茄根結線蟲的防治效果存在差異。其中，在整地時同時添加有機肥和營養基質的處理對番茄根結線蟲的防治效果最好，防效為77.45%，優于對照藥劑10%噻唑膦顆粒劑；在整地時單加有機肥的處理好于單加營養基質的處理，對番茄根結線蟲的防治效果分別為61.73%和49.72%。單施用BCJB01粉劑處理對根結線蟲的防治效果最弱，防效為46.97%。

表1 不同處理方式的BCJB01粉劑對番茄根結線蟲的防治效果Table 1 Control effect of BCJB01 pulvis with different treatments on tomato root-knot nematode

注：每行數據后不同字母表示差異顯著(P≤ 0.05)。

3 結果與討論

近年來，利用芽胞桿菌防治根結線蟲的報道日益增加，但田間防治效果均不太理想，為穩定防治效果，人們開始研究與其配套應用的施用技術。肖同建等[4]應用蠟樣芽胞桿菌X5制劑與日光消毒和生物熏蒸相結合防治番茄根結線蟲，防效達82.7%；劉元兵等[7]報道，蠟質芽胞桿菌AT31產品在田間使用前利用二次發酵的方法可以有效地控制黃瓜根結線蟲病害，防效達73.46%。本研究采用在整地時添加營養基質、有機肥、微生物菌劑，移栽時再穴施微生物菌劑的處理方式，對蠟樣芽胞桿菌BCJB01粉劑的配套應用技術進行了初步研究，結果顯示，在整地時同時添加有機肥和營養基質的處理對番茄根結線蟲的防治效果最好，防效為77.45%，優于對照藥劑10%噻唑膦顆粒劑對番茄根結線蟲的防治效果；在整地時單加有機肥的處理對番茄根結線蟲的防治效果優于單加營養基質的處理。研究表明，同時添加有機肥和營養基質更有利于提高BCJB01粉劑對番茄根結線蟲的防治效果。

Thoden等[8]研究表明,使用有機添加劑是改善土壤狀況和防治植物寄生線蟲的有效途徑之一。但本研究中選用的營養基質(有機添加劑)對蠟樣芽胞桿菌BCJB01粉劑防效的提高并不明顯，這可能與選用的營養基質種類不同有關。本研究中選用的海藻生物有機肥，因其含有豐富的有機質，能夠提高蠟樣芽胞桿菌BCJB01粉劑對番茄根結線蟲的防治效果，防效提高了14.76%。研究發現，同時添加海藻生物有機肥和營養基質更有利于提高BCJB01粉劑對番茄根結線蟲的防治效果，防效提高了30.48%，可能兩者同時添加為蠟樣芽胞桿菌BCJB01的定殖生存提供了充足的營養。

[1]HUANG W K, SUN J H, CUI J K, et al. Efficacy Evaluation of FungusSyncephalastrumracemosumand nematicide avermectin against the root-knotnematodeMeloidogyneincognitaon cucumber[J]. PLOS ONE, 2014, 9(2): e89717.

[2]冀宇，武云鵬，王胤，等.功能型復合微生物菌劑防治黃瓜根結線蟲的研究[J].中國生物防治學報，2016，32(4)：493-502.

[3]余真，張又弛，羅文邃.餐廚垃圾制菌肥對番茄根結線蟲病的防效以及對土壤生物活性的影響[J]. 農業環境科學學報,2015，34(6):1217-1224.

[4]肖同建，李蕊，王小慧，等.施用生防菌菌劑與日光消毒和生物熏蒸相結合防治番茄根結線蟲的研究[J]中國生物防治學報，2012，28(2)：262-268.

[5]馬駿，文才藝，劉偉成,等.有機添加劑對番茄根結線蟲病的防效[J].北方園藝，2013(8)：130-131.

[6]王明霞，嚴從生，江海坤，等.番茄抗根結線蟲病基因(Mi)分子標記的評估[J].中國蔬菜，2009,1(18):21 -24.

[7]劉元兵，舒暢，高揚，等. 蠟質芽孢桿菌AT31防治根結線蟲的應用技術探討[J].農藥科學與管理，2015,36(10):52-57.

[8]THODEN T C,KORTHALS G W,TERMORSHUIZEN A J.Organic amendments and their influences on plant-parasiticand free-living nematodes:A promising method for nematode management[J].Nematology,2011,13(2):133-153.