乙二胺四乙酸鹽依賴性血小板假性減少的實驗室糾正方法

郭書云，秦玉明，似學紅，梁樹芬*

(1.山西醫科大學第二醫院,山西 太原 030001；2.山西衛生健康職業學院，山西 太原 030012；3.太原市中心醫院，山西 太原 030009)

目前全血細胞分析是臨床上最常見的和較重要的實驗室檢測項目之一，其中參與凝血和止血功能的血小板數量的增高和減少，在臨床的出血與血栓性疾病的診斷中具有較高的應用價值。

隨著臨床全血細胞標本大批量的增加，全自動血細胞分析儀廣泛應用于實驗室。同時國際血液學標準委員會(ICSH)認可的全血細胞分析首選的抗凝劑為乙二胺四乙酸-K2(EDTA-K2)，會在某些情況下誘導血小板中的特殊蛋白質，使血小板產生聚集，導致EDTA依賴性血小板計數假性減少(EDTA-PTCP，EDP)，而EDTA依賴性血小板計數假性偏低容易使臨床醫生誤診誤判，從而導致過度醫療或無較治療，甚至可使接受溶栓治療的患者甚至不得不停用抗凝藥物，因此要及時確診EDP，防止臨床誤診?，F對972例首次血細胞分析檢查發現血小板<100×109個/L患者EDP的確認及血小板的糾正方法進行回顧性分析和總結，探討EDP實驗室發現概率和處理方法,報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1～10月到山西醫科大第二醫院就診需要進行全血細胞分析并且首次發現PLT計數<100×109個/L的病例972例，標本狀態正常，男428例，女544例。

1.2 方法

對于首次發現PLT計數<100×109個/L的血樣，在排除標本質量問題和檢測偶然誤差外，按照全血細胞分析復檢規則進行血涂片檢查。瑞氏‐吉姆薩法染色后油鏡(×100倍)觀察血小板分布情況 ，觀察是否有聚集現象。發現血小板多處聚集者即可確認為EDTA 依賴性血小板假性減少癥，原檢測結果為血小板假性減少。此時應采集枸櫞酸鈉抗凝血，重新上機檢測血小板，枸櫞酸鈉抗凝血測定的血小板數值乘以1.1，即可作為最終報告結果。

2 結果

回顧性統計分析首次發現血小板減少的972例病例中，EDTA依賴性假性血小板減少患者有46例， EDP患者的發生率為4.73%，男19例，女27例，年齡18～79歲。

3 討論

EDTA-K2是國內外全自動血液分析儀普遍采用的一種抗凝劑。EDTA鹽的主要作用是通過與水中鈣離子相結合形成穩定的螯合物，使鈣離子失去活性，中斷凝血功能，從而阻止血液凝固，達到有效地保持血細胞的形態并且防止血小板聚集的作用。

近年來，由多種原因引起的EDTA依賴性假性血小板減少癥常見報道[1]。EDP是由EDTA抗凝劑引起的發生在體外的血小板聚集現象。目前認為EDTA引起血小板聚集的原因是由于存在能夠識別血小板細胞膜糖蛋白Ⅱb//Ⅲa(GPⅡb/Ⅲa)受體的EDTA依賴性自身抗體。正常情況下抗原抗體結合位點隱藏在復合物內部，當遇到EDTA時，其位點發生改變，血小板被激活，導致聚集發生。

EDTA引起的血小板聚集程度并不相同，患者對EDTA的敏感度存在個體差異，這種差異與患者接受治療的藥物和自身疾病有關。EDP可見于正常人,但多數情況下伴某些疾病,如:癌癥,自身免疫性疾病,肺心病,肝病及一些原因不明的疾病。雖然EDP與多種疾病狀態有關，但至今未有證實哪種疾病能夠直接引起該現象的產生。EDTA作為抗凝劑在血常規分析中有著不可替代的優勢，所以要警惕EDP的發生。

在臨床工作中如遇到血小板減少，建議采用國際血液學復檢專家組推薦規則設置全自動血細胞分析流水線推片規則，血細胞分析儀報警提示“Platelet Clumps”或雖未報警但提示懷疑血小板假性減少的標本，推片顯微鏡檢發現血小板成簇聚集，排除采血不順暢等因素后確定為EDP者，改換枸櫞酸鈉抗凝血復查EDP患者血小板計數。然而多種抗凝劑均有誘導血小板聚集的可能性，櫞酸鈉、肝素也誘導PTCP的發生，建議采用手工計數血小板檢測作為EDP患者血小板計數復查報告依據，以便得出真實結果，避免因EDP造成的誤診[2]。

本研究EDP患者的發生率為4.73%，遠遠高于有關研究報道的EDP患者的發生率為0.07%～0.2%[3，4]。經對部分患者的咨詢發現，許多患者為基層醫院檢查診斷血小板減少，而未發現EDP，由此說明在基層醫院對EDP的認識和篩查經驗還不足，實驗室工作人員對假性血小板減少的意識有待提高，而血細胞分析中EDP的甄別和處理方法有待進一步規范化。

綜上所述，對于首次檢查血小板減少的患者一定要重視復查，如檢查標本是否有凝塊，改用枸椽酸鈉抗凝劑或手工計數血小板，同時制作血涂片，進行瑞氏染色，在顯微鏡下觀察血小板的形態和分布情況，確保每個環節的正確，避免誤診誤治。并告知EDP患者以后就診進行血細胞分析檢查時，提示檢驗科工作人員避免使用EDTA鹽抗凝劑，以便檢驗人員發出準確、可靠的血細胞分析結果，減少醫療糾紛。