高危型HPV病毒載量與宮頸癌及癌前分型的相關性分析

謝 春，朱海東

(商丘醫學高等專科學校，河南商丘 476000)

臨床發現，人乳頭瘤病毒(HPV)有誘發乳頭狀瘤轉化為鱗狀上皮細胞癌的傾向。文獻報道，全球大約有80%的女性查出HPV陽性，其中大部分可以自限性的消除，少部分會持續性進展，最終只有1%左右進展成為子宮頸癌[1]。因此，檢測出其中的危險人群，研究出一個有效的分流依據成為篩查的最終目的。高危型HPV(HR-HPV)主要是指感染HPV 16或HPV 18型病毒[2]。有研究報道感染HR-HPV病毒的載量與不同亞型可以造成不同的疾病轉歸[3]。因此本研究采用高靈敏度的檢測技術HC-Ⅱ(PCR)檢測HR-HPV DNA的載量及分型，分析病毒載量及分型宮頸病變的關系，希望能為宮頸癌的早期篩查提供一定參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2013年3月至2015年3月在本院婦科初診篩查HPV病毒陰性的2 287例患者的臨床資料，平均年齡(39.98±8.86)歲。納入標準：(1)有性生活史可以接受婦科檢查；(2)非妊娠期；(3)5年內未做過子宮頸癌檢查，初診篩查病毒載量小于1.0 rlu/co；(4)生理學上具有完整宮頸；(5)簽訂知情同意書。排除標準：初診感染HPV病毒陽性載量大于或等于1.0 rlu/co,或有其他疾病不適合進行此項研究者。

1.2方法

1.2.1分組方法 采用HC-Ⅱ檢查病毒HPV載量，以病毒載量大于或等于1.0 rlu/co為陽性，<1.0 rlu/co為陰性[4]。病毒陽性組中以感染HPV載量分為3組，低載量：1～<500,中載量：500～1 000,高載量：>1 000。采用導流雜交技術法檢測病毒HPV的亞型，其中HPV 16 和HPV 18為高危型病毒亞型，其他亞型如31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73 和 82為非高危型病毒亞型，若存在HPV 16或HPV 18與其他亞型混合感染時則歸入高危型組，反之無HPV 16或HPV 18則歸入非高危型組。對所有研究病例采用以上兩種檢測方法，并進行陰道鏡活檢，陰道鏡下未發現明顯異常時，則分別行四個象限活檢+頸管診刮術同時送病理檢查。取出的活檢組織送病理科進行制片，并雙人獨立閱片，病理診斷的級別以CIN來命名，即分為病理陰性、宮頸上皮輕度非典型增生(CINⅠ)，宮頸上皮中度非典型增生(CINⅡ)，宮頸上皮重度非典型增生(CIN Ⅲ) 和宮頸癌。

病毒陽性組203例患者依據病毒載量分為3組，分別低載量組137例，中載量40例，高載量26例；依據病理結果宮頸活檢，分為病理陰性組即慢性糜爛性宮頸炎76例，CINⅠ 45 例，CIN Ⅱ 37 例，CIN Ⅲ 32 例和子宮頸癌13例。

1.2.2隨訪 進行24個月的不做任何干預的隨訪，隨訪時對全部研究病例進行陰道鏡檢查。隨訪觀察HPV病毒載量及分型與CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宮頸癌的關系。

1.3統計學處理 采用SPSS19.0軟件進行統計學分析,計數資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗；指標之間關系分析采用Pearson相關性分析； 采用多因素 Logistic 回歸性分析檢驗危險因素，以P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1病毒載量與病理分級的關系 與病毒陰性組相比，病毒陽性組患者發生CIN Ⅲ或宮頸癌變的概率均較高，差異有統計學意義(P<0.05)；病毒陽性組患者感染HPV病毒的載量越高，CIN程度越高，兩者呈正相關(r=0.743，P<0.05)，見表1。

表1 感染病毒載量與子宮頸病變程度關系[n(%)]

2.2宮頸癌及癌前病變風險因素分析 經Logistic回歸分析結果顯示：病毒載量越高發生CINⅢ及宮頸癌的危險系數隨之升高，病毒低、中、高載量組發生CINⅢ及宮頸癌的危險系數是病毒陰性組的19.24倍、24.42倍和42.02倍(表2)。其中子宮頸病變典型病理分級的病理圖見圖1。

表2 感染HPV載量與子宮頸癌變的風險因素[n(%)]

A:CINⅠ；B：CINⅡ；C:CINⅢ;D:子宮頸癌

圖1子宮頸病變典型病理分級

2.3病毒亞型與宮頸病變的關系 HPV 16和18與非HPV 16和18患者發生CIN Ⅲ或宮頸癌的危險系數分別是病毒陰性組的17.24(14.45～854.54)和3.42(2.45～272.45)。

3 討 論

子宮頸癌是婦科最常見的惡性腫瘤，原位癌高發年齡在30～35歲，浸潤癌在45～55歲[5]。有研究表明，近年來宮頸癌發病漸趨年輕化[6]。近幾十年，宮頸液基薄層細胞分析初步篩查的普遍應用，使宮頸癌及其癌前病變得以早發現、早治療，從而降低了宮頸癌的發病率和病死率。

WHO 2013年發布的《子宮頸癌前病變篩查和管理指南》中建議在有條件采用HR-HPV檢測的地域采用此方法進行子宮頸癌的初篩[6-7]。本研究采用的HC-Ⅱ與導流雜交技術法對HR-HPV載量以及分型進行檢測，兩者均有較高靈敏度與特異度，研究結果驗證了通過HR-HPV檢測來評價宮頸癌風險性是可靠的,初篩HR-HPV陽性后的分流可篩查出需要提前干預的風險人群，所以HR-HPV的載量檢測在宮頸癌前病變與癌變篩查中具有重要意義。2015年ASCCP篩查指南指出，經過HPV初步篩查陽性后，分流出高危型亞型HPV 16或HPV 18，且隨訪這部分人群是否有HPV病毒的持續感染，是否只是一過性自限性的感染，以此分流出風險人群加以干預，可見HPV 感染的持續監測更為重要。有研究報道，在國內廣大經濟欠發達及衛生資源匱乏的地區，HPV病毒感染的持續監測不易實現，而衛生資源非常匱乏的地區HR-HPV陽性人群分流的方法也一直被關注[8]。本研究證明感染HR-HPV DNA高載量，即大于1 000 rlu/co可以作為預測HR-HPV持續感染與病情進展的危險因素。本研究通過經過初次基線篩查檢測HR-HPV 載量與HR-HPV 病毒亞型，隨訪的結果顯示，采用 HC-Ⅱ將HPV陽性患者的病毒載量分為低載量組、中載量組與高載量組，分析后發現病毒載量是預測CINⅢ與宮頸癌變發生風險的有效指標，同時發現分流出的HPV 16/18亞型具有同樣的預測效果，與以往文獻報道相一致[9]。朱雨等[10]在中國經濟不發達地區進行的調查研究，也證實了病毒載量的閾值設定對CINⅢ及癌變的預測能力。已有大量的研究報道， HPV 16或HPV 18高載量持續感染是宮頸病變進展為宮頸癌的危險因素[11]。

綜上所述，HPV檢測HPV 16/18 分型與病毒載量大于或等于1 000 rlu/co可作為宮頸癌及癌前病變的高危因素，HR-HPV高病毒載量對CINⅢ與癌變有一定的預測價值，對于此類患者應盡早干預。

[1]MORROW M P,KRAYNYAK K A,SYLVESTER A J,et al.Augmentation of cellular and humoral immune responses to HPV16 and HPV18 E6 and E7 antigens by VGX-3100[J].Mol Ther Oncolytics,2016,3(3):16025-16025.

[2]KREVOLIN M D,HARDY D,PANE J,et al.Development and validation of a preanalytic procedure for performing the cobas HPV test in SurePath preservative fluid[J].J Mol Diagn,2017,19(2):288-294.

[3] TAN L S,FREDRIK P,KER L,et al.High-risk HPV genotypes and P16INK4a expression in a cohort of head and neck squamous cell carcinoma patients in Singapore[J].Oncotarget,2016,7(52):86730-86739.

[5]王煥妮，王慧儒，胡鵬，等．宮頸上皮內瘤變Ⅱ～Ⅲ級患者HPV感染的分型及特點[J]．廣西醫科大學學報，2014，31(2)：220-222．

[7]常小壘，郭科軍，張頤，等．HPV亞型與子宮頸癌前病變及癌變的關系探討[J]．中國醫科大學學報，2014，43(8)：720-723,727．

[8]張濤，毛世華，唐良萏，等．宮頸上皮內瘤變及早期宮頸癌組織中P16、HPVL-1殼蛋白的表達及與HR-HPV載量相關性研究[J]．實用婦產科雜志，2016，32(7)：536-539．

[9]胡金甫，汪輝，李科珍，等．Survivin、Bcl-2、HPV16/18在宮頸癌中的表達及相關性研究[J]．中國婦幼保健，2014，29(5)：781-784．

[10]朱雨，郭瑞霞，李留霞，等．宮頸錐切術后病理由CINⅢ升級為宮頸癌的相關預測因素分析[J]．現代婦產科進展，2017，26(1)：49-51．

[11]徐啟英，郭桂蘭．沙仁高娃.人子宮頸癌基因在子宮頸上皮內瘤變和子宮頸鱗癌中的表達及其與HPV16整合狀態的關系[J]．中國婦產科臨床雜志，2016，17(6)：505-507．