血清MicroRNA—122作為膿毒癥診斷特異性標志物的研究

劉初銘 羅剛

【摘要】 目的 觀察膿毒癥患者的血清中MicroRNA-122的表達量在病程中的動態變化情況， 并且對此變化情況與膿毒癥的發病程度之間關系進行探討。方法 選取88例膿毒癥患者作為觀察組， 其中一般膿毒癥患者40例作為一般膿毒癥組、重癥膿毒癥患者48例作為重癥膿毒癥組;另選同期88例體檢健康人作為對照組， 采用熒光定量聚合酶鏈反應（PCR）對對照組入組時及觀察組入組第1、3、5、7、14天血清中MicroRNA-122的表達量進行檢測， 觀察所有研究對象MicroRNA-122表達情況， 并比較觀察組中不同組別的臨床資料差異。結果 重癥膿毒癥組序貫器官衰竭評定量表（SOFA）評分（9.7±

3.4）分、急性生理學與慢性健康狀況評估Ⅱ（APECHEⅡ）評分（18.9±6.5）分明顯高于一般膿毒癥組的（7.1±2.0）、（13.9±5.2）分， 慢性腎臟疾病發生率37.50%明顯高于一般膿毒癥組的12.50%， 差異均具有統計學意義（P<0.05）。觀察組入組第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表達量均明顯低于對照組， 差異均具有統計學意義（P<0.05）。同時間， 重癥膿毒癥組患者血清miRNA-122表達量均明顯高于一般膿毒癥組， 差異均具有統計學意義（P<0.05）。結論 血清中MicroRNA-122的表達量可以作為膿毒癥診斷的特異性標志物， 還能夠對膿毒癥患者的疾病嚴重程度做出預警， 具有推廣應用的價值。

【關鍵詞】 血清MicroRNA-122;膿毒癥;診斷特異性標志物;研究

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.12.024

膿毒癥是一種由于受到一些微生物感染所導致的臨床綜合癥， 如果不能及時發現， 及時治療， 就有可能發展成膿毒癥休克， 甚至會使患者的多個器官出現功能性障礙[1， 2]。所

以， 作者選擇了對膿毒癥患者血清中MicroRNA-122的表達量的動態變化情況進行觀察， 從而進一步探討了此變化情況與膿毒癥的發病程度之間的關系。具體報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2015年10月～2017年10月在本院進行治療的88例膿毒癥患者作為觀察組， 其中一般膿毒癥患者40例作為一般膿毒癥組、重癥膿毒癥患者48例作為重癥膿毒癥組;另選同期88例體檢健康人作為對照組。觀察組年齡19～85歲， 平均年齡（55.4±18.6）歲。對照組年齡22～81歲，

平均年齡（57.2±17.1）歲。觀察組與對照組年齡等一般資料比較差異無統計學意義（P>0.05）， 有可比性。

1. 2 方法

1. 2. 1 實驗主要儀器與試劑 儀器：MJ-Mini梯度PCR儀;試劑：mir Vana miRNA提取試劑盒、miRccute miRNA cDNA第一鏈合成試劑盒、熒光定量檢測試劑盒;系統：實時熒光定量檢測系統 [3]。

1. 2. 2 數據采集 對觀察組患者的姓名、年齡、性別、病史等做好詳細的記錄。患者入院后的第1天對患者的具體病情進行估計并且做出評分[2]。將對照組的姓名、性別、年齡等基本信息也做好詳細記錄。

1. 2. 3 PNA提取和逆轉錄（RT）-PCR 對所有研究對象采靜脈外周血， 其中對照組入組時采血， 觀察組入組第1、3、5、7、14天采血。將血液中血清分離出來放在-80℃的冰箱內保存， 等待測量。按照mirVana miRNA試劑盒對血清中的總RNA進行提取。對提取出來的總RNA進行反轉錄， 隨后對RT的反應體系進行配制， 將配制好的反應體系搖勻后再反轉錄（具體操作步驟可以參照試劑盒的使用說明書）。根據PCR試劑盒的說明書對PCR的反應體系進行確定 [4]。

1. 3 觀察指標 ①比較觀察組中不同組別的臨床資料差異， 指標包括SOFA評分、APECHEⅡ評分、慢性腎臟病發生

情況。②比較對照組與觀察組不同時間血清MicroRNA-122表達情況的差異。③一般膿毒癥組與重癥膿毒癥組相同時間點血清MicroRNA-122表達情況的差異。

1. 4 統計學方法 采用SPSS19.0統計學軟件進行數據分析。正太分布計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗;非正態分布的計量資料采用中位數（四分位數）表示， 采用Mann-Whitney U檢驗;計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 一般膿毒癥組與重癥膿毒癥組臨床資料比較 重癥膿毒癥組SOFA評分（9.7±3.4）分、APECHEⅡ評分（18.9±

6.5）分明顯高于一般膿毒癥組的（7.1±2.0）、（13.9±5.2）分， 慢性腎臟疾病發生率37.50%明顯高于一般膿毒癥組的12.50%， 差異均具有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2. 2 觀察組與對照組血清miRNA-122表達量比較 觀察組入組第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表達量均明顯低于對照組， 差異均具有統計學意義（P<0.05）。見表2。

2. 3 一般膿毒癥組與重癥膿毒癥組血清miRNA-122表達量比較 同時間， 重癥膿毒癥組患者血清miRNA-122表達量均明顯高于一般膿毒癥組， 差異均具有統計學意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

膿毒癥是一種由于感染而引起的極其復雜的炎性反應， 其造成的病死率是非常高的， 所以對膿毒癥的早期診斷和預后都極為重要。miRNA是一種極其微小的分子RNA， 其可以對蛋白碼的基因表達進行調節[5-9]。蘇明環等[10]通過多年的研究證實了miRNA-122可以作為膿毒癥患者的血清標志物。在本次研究中， 通過對不同程度膿毒癥患者和健康人的血清miRNA-122的表達量進行觀察后發現， 一般膿毒癥組和重癥膿毒癥組SOFA評分、APECHEⅡ評分、慢性腎臟疾病發生情況比較差異均具有統計學意義（P<0.05）;觀察組入組第1、3、5、7、14天血清miRNA-122表達量均明顯低于對照組， 差異均具有統計學意義（P<0.05）。這也進一步說明了血清miRNA-122可以作為早期膿毒癥的特異性診斷標志物。另外， 同時間， 重癥膿毒癥組患者血清miRNA-122表達量均明顯高于一般膿毒癥組， 差異均具有統計學意義（P<0.05）， 也就間接的說明了血清miRNA-122的表達量在對膿毒癥患者疾病的嚴重程度進行預警方面具有非常重要的意義， 但本文未對其在膿毒癥中的功能機制做進一步研究。

綜上所述， 血清中MicroRNA-122的表達量可以作為膿毒癥診斷的特異性標志物， 還能夠對膿毒癥患者的疾病嚴重程度做出預警， 具有推廣應用的價值。

參考文獻

[1] 劉旭輝， 王韌， 張獻玲， 等. 血清miR-146a作為膿毒癥診斷標記物的研究. 實用醫學雜志， 2017， 33（7）：1103-1105.

[2] 羅友軍， 譚轉歡， 李新君， 等. 血清cTnI、 CK-MB、 NT-proBNP聯合檢驗在膿毒癥患兒中的作用探討. 中國現代醫生， 2016， 54（11）：107-109.

[3] 顏瑤， 郭曉芳， 施青山， 等. 血清降鈣素原在細菌性膿毒癥合并急性腎損傷患者的診斷價值. 中國中西醫結合腎病雜志， 2016， 17（3）：243-246.

[4] 焦京， 蔣宇， 高敏， 等. 脂多糖結合蛋白在膿毒癥患者診斷和預后預測中的作用. 中國病理生理雜志， 2015， 31（7）：1294-1299.

[5] 鄧婕， 王慧娟， 蘇龍翔， 等. 血清MicroRNA-122作為膿毒癥診斷特異性標志物的研究. 武警醫學， 2013， 24（5）：383-386.

[6] 劉志強， 梁璐， 薛華， 等. 血漿miRNA-122a miRNA-146a miRNA-155a對膿毒癥診斷及預后評估價值的研究. 中國急救醫學， 2017， 37（6）：492-496.

[7] 張云， 庹敏， 劉勝武. 血清外泌體來源的miRNA-122對肝癌診斷的研究. 檢驗醫學與臨床， 2017， 14（9）：1260-1261.

[8] 王慧娟. 血清miRNAs作為膿毒癥標記物研究. 南開大學， 2014.

[9] 駱海倫. 膿毒癥相關血清MicroRNA的篩選及其診斷價值初步研究. 中國人民解放軍醫學院， 2014.

[10] 蘇明環， 壽松濤. 血presepsin對膿毒癥診斷及病情判斷的臨床價值. 臨床檢驗雜志， 2014， 32（2）：106-108， 111.

[收稿日期：2017-11-28]