妊娠期糖尿病孕婦IGF-1表達與新生兒免疫球蛋白和T細胞亞群的相關性分析

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(中山大學附屬第八醫院(深圳福田)婦產科,廣東 深圳 518033)

妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus，GDM)是指妊娠期首次診斷的糖尿病，流行病學研究顯示我國GDM 發病率已高達17.5%[1]。目前，GDM發病機制尚未明確，但是大多數研究認為其發病與肥胖、高齡、營養過剩、運動缺乏等因素有關[2]。GDM與自然流產、巨大兒、新生兒低血糖、新生兒畸形等多種不良妊娠結局有關，孕婦產后2型糖尿病發生率高達25%～70%[3]。關于胰島素生長因子-1 (insulin-like growth factor-1，IGF-1)在胎盤生長和胎兒發育中的作用研究，近年來備受關注。研究顯示，胎盤組織IGF-1表達強度對妊娠結局有直接影響[4]。然而有關GDM孕婦胎盤組織IGF-1表達強度對新生兒免疫功能的研究報道甚少。本研究旨在探討GDM孕婦胎盤組織IGF-1表達及對新生兒免疫球蛋白和T細胞亞群的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2015年12月～2017年12月我院婦產科收治的120例GDM孕婦作為觀察組。GDM診斷標準參照人民衛生出版社第八版婦產科學：在妊娠24～28周以后進行口服葡萄糖耐量試驗，空腹及服糖后1、2小時的血糖值分別為5.1mol·L-1、10.0mol·L-1、8.5mol·L-1，任一時間點的血糖值達到或超過上述標準就確診為GDM。排除妊娠期高血壓、原有糖尿病、先天性心臟病、雙胎妊娠、早產、妊娠合并內科疾病、產前發熱等炎癥急性期孕婦。另選取同期分娩的無任何并發癥無任何內外科疾病的孕婦30例作為對照組。觀察組年齡21～38歲，平均(27.5±3.2)歲，孕周35～41周，平均(37.5±3.2)周，平均體重指數(27.4±2.9)kg/m2，初產婦73例，經產婦47例；對照組年齡22～40歲，平均(28.3±3.3)歲，孕周36～40周，平均(36.8±3.0)周，平均體重指數(26.8±3.4)kg/m2，初產婦19例，經產婦11例。兩組孕婦的基線資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。所有孕婦及其家屬均簽署知情同意書，經本院醫學倫理委員會批準。

1.2標本采集(1)胎盤娩出后，取1.0×1.0×1.0 cm胎盤組織，注意避開鈣化和壞死區域，用無菌生理鹽水沖洗干凈。一份胎盤組織經10%中性甲醛固定，石蠟包埋，連續切片4 μm，采用免疫組織化學法檢測IGF-1表達。(2)采集新生兒外周靜脈血，采用流式細胞儀檢測T細胞亞群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8)，采用免疫比濁法檢測血清IgG、IgA和IgM。

1.3免疫組織化學法檢測IGF-1表達取出1.2中保存的胎盤組織石蠟切片，參照文獻[5]的方法行免疫組織化學檢測，以PBS代替一抗作為陰性對照。從陽性細胞比例和染色強度兩方面進行評分：陽性細胞比例低于5%，計0分；陽性細胞比例占5%～30%，計1分；陽性細胞比例占31%～60%，計2分；陽性細胞比例大于60%，計3分。棕色染色計3分，淺棕色染色計2分，淺黃色染色計1分，無染色計0分。兩項評分相乘，0分為陰性(-)，1～2分為弱陽性(+)，3～4分為陽性(++)，6～9分為強陽性(+++)。

2 結 果

2.1兩組孕婦胎盤組織IGF-1表達比較Kruskal-WallisH秩和檢驗顯示，觀察組IGF-1表達強度大于對照組(P<0.05)，詳見表1。IGF-1呈棕黃色，主要存在于滋養層上皮細胞漿，詳見圖1。

表2 兩組孕婦胎盤組織IGF-1表達比較

圖1 免疫組織化學法檢測兩組孕婦胎盤組織IGF-1表達(400×)A：對照組胎盤組織IGF-1表達，B：觀察組胎盤組織IGF-1表達

2.2兩組新生兒外周血免疫球蛋白比較觀察組新生兒外周血IgG水平低于對照組(P<0.05)；兩組IgA和IgM水平比較差異無統計學意義(P>0.05)。

表2 兩組新生兒外周血免疫球蛋白比較(g/L)

2.3兩組新生兒外周血T細胞亞群比較觀察組新生兒外周血CD3、CD4和CD4/CD8低于對照組(P<0.05)，而CD8高于對照組(P<0.05)。

表3 兩組新生兒外周血T細胞亞群比較(%)

2.4 IGF-1表達強度與免疫球蛋白和T細胞亞群的相關性Spearman分析顯示，IGF-1表達強度與IgG、CD3、CD4、CD4/CD8呈負相關(Rs=-0.539，-0.421，-0.389，-0.503，P<0.05)，而與CD8呈正相關(Rs=0.412，P<0.05)。

3 討 論

胰島素樣生長因子和胰島素樣生長因子結合蛋白，在調節人類卵巢和子宮內膜的功能方面發揮作用[6]。同時IGF-1具有胰島素樣作用，IGF-1可影響孕婦血糖水平，在胎兒生長發育過程中發揮重要調控作用，胎盤組織IGF-1表達強度對妊娠結局有直接影響。錢敏,等[7]報道顯示IGF-1可通過影響胎盤的轉運和代謝繼而影響胎盤生長和胎兒發育。孟曉瑜,等[8]認為GDM孕婦胎盤組織IGF-1水平顯著升高，且存在明顯的糖脂代謝紊亂，IGF-表達強度與新生兒體質量和三酰甘油呈正相關。湯栩文,等[9]研究顯示GDM血糖控制不良孕婦胎盤組織中IGF-1表達強度明顯大于GDM血糖控制良好孕婦及正常妊娠孕婦。本研究通過對比分析觀察組和對照組孕婦胎盤組織IGF-1表達的差異，結果發現：觀察組胎盤組織IGF-1表達強度顯著大于對照組，IGF-1呈棕黃色主要存在于滋養層上皮細胞漿。這與已有的研究基本一致，提示IGF-1與GDM的發病密切相關。

有關IGF-1表達強度與GDM發病、巨大兒等研究報道較多[10-11]，而IGF-1對新生兒免疫功能的影響研究，報道甚少。程麗琴等[12]通過研究發現GDM胎盤組織中的IGF-1表達水平較健康孕婦高，GDM胎盤組織中的高IGF-1表達可顯著影響新生兒T淋巴細胞亞群，導致新生兒免疫功能低下。新生兒免疫功能不同于兒童和成人，其血清IgG主要來自母體，約占所有血清免疫球蛋白總量的75%，在預防白喉、麻疹、脊髓灰質炎等感染方面發揮重要作用[13-14]。CD3和CD4主要誘導和輔助免疫，CD8又稱為抑制性T細胞，主要平衡CD3和CD4功能。CD4/CD8比值是衡量機體免疫功能的最主要指標，其比值過低說明機體處于 “免疫抑制” 狀態[15]。本研究對比分析觀察組和對照組孕婦分娩的新生兒免疫球蛋白和T細胞亞群的差異，結果發現：觀察組新生兒外周血IgG、CD3、CD4和CD4/CD8較對照組顯著降低，而CD8明顯增加；Spearman分析顯示IGF-1表達強度與IgG、CD3、CD4、CD4/CD8呈負相關，而與CD8呈正相關。本研究結果說明GDM孕婦胎盤組織IGF-1表達強度可影響新生兒外周血免疫球蛋白和T細胞亞群，導致其免疫功能低下，抗感染能力降低。此外，本研究中兩組新生兒外周血IgA和IgM比較差異無統計學意義，究其原因可能是因為IgA和IgM無法通過胎盤屏障[16]，所以兩組新生兒IgA和IgM整體水平均很低。張凌云,等[17]研究證實GDM孕婦有效控制血糖有利于增強新生兒免疫功能，而血糖控制不良有可能引起新生兒免疫功能低下。盡管該研究并未直接論證IGF-1對新生兒免疫功能的影響，但推測二者可能存在一定的相關性。

綜上所述，妊娠期糖尿病孕婦胎盤組織IGF-1表達強度明顯增加，并影響新生兒外周血免疫球蛋白和T細胞亞群，引起新生兒免疫功能低下。尚需進一步研究證實。

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