紅花黃色素協同抗蛇毒血清對重型蝮蛇咬傷患者炎癥及安全性的影響

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(長沙市第四醫院急診科，湖南 長沙 41000)

湖南地處亞熱帶，氣候溫和，適宜蛇類繁衍，因此蛇類眾多，在毒蛇咬傷這一類急癥中，以蝮蛇咬傷為主。蝮蛇咬傷若不及時就診，將會導致心、肝、腎等重要器官功能受到嚴重損害，會出現臟器功能衰竭的癥狀甚至死亡[1]。抗蛇毒血清是目前毒蛇咬傷首選特效藥[2]，有效地提高了患者的生存率及治愈率。蛇毒作為一種毒素，一旦侵入機體，在血液循環中擴散，釋放的毒素可誘導細胞因子釋放，引起全身感染、中毒和全身炎癥反應[3]。毒蛇咬傷的預后與機體免疫應答有著重要的關聯，抑制毒蛇咬傷患者免疫反應可能有助于改善該癥的預后[4]。藥理學表明，紅花的有效成分紅花黃色素具有活血化瘀、清除自由基、降低炎癥反應等藥理作用[5]，目前主要應用于心血管疾病及神經疾病的治療，取得了較好的臨床療效，但尚未見到應用于腹蛇咬傷的報道。本研究主要觀察紅花黃色素治療蝮蛇咬傷患者后血清炎癥因子的變化、凝血功能、總有效率及不良反應發生率等差異，探討紅花黃色素治療腹蛇咬傷的機制及療效。

1 資料和方法

1.1一般資料我科2014年3月～2017年8月收治蝮蛇咬傷患者1454例，按第4屆全國蛇傷學術會議臨床病情分型標準分為輕型、重型、危重型，將其中重型及危重型病例125例納入本研究作為研究對象。有嚴重心、肝和腎損害者和不能配合治療者被排除入組。入組病例有男性74例，女性51例，年齡最大59歲，最小8歲，平均年齡37.4±13.2歲；咬傷至就診時間最短25分鐘，最長9小時，平均時間4.33±2.81 h；被咬傷部位中，足部48例，踝部46例，小腿25例和手部6例。按照隨機數字法分為2組，對照組48例采取抗蛇毒血清注射為主，輔以常規抗過敏、抗破傷風、利尿及抗感染綜合治療，實驗組77例在此基礎上，加用注射用紅花黃色素(浙江永寧藥業)。兩組患者在性別、年齡、咬傷至就診時間等一般資料的比較上無顯著性差異(P>0.05)，具有可比性。本研究經醫院醫學倫理道德委員會批準，受試者已充分知情同意并簽訂知情同意書。

1.2方法兩組病例入院后，均常規采取傷口急診清創處理，于傷口牙痕處作“十”字切口，清洗后碘伏徹底消毒。常規進行全身系統性積極治療，包括腎上腺皮質激素行抗過敏、抗破傷風、利尿及抗感染治療，必要時采取其它對癥處理。

對照組：抗蝮蛇毒血清6000U加入生理鹽水100 mL中靜滴，1次/d，根據癥狀嚴重程度可酌情重復使用1次。若血清過敏試驗陽性，則將地塞米松注射液10 mg加入生理鹽水100 mL中靜滴行脫敏治療，然后再輸注抗蝮蛇毒血清。

實驗組：在對照組的基礎上，將注射用紅花黃色素100 mg溶于生理鹽水250 mL，靜滴1次/d。連續治療7天。

1.3觀察指標

1.3.1 所有患者分別于治療前、治療1天、3天和7天抽取外周靜脈血5 mL，1000 g離心15 min后，ELISA法(試劑盒購自南京森貝伽生物科技有限公司)測定TNF-α、IL-6和IL-10水平，并評估兩組總有效率及總不良反應發生率差異。

1.3.2 凝血功能比較 入組病例于治療前、治療3天后抽取靜脈血檢測凝血功能，采用SysmexCA-500全自動血栓/止血分析儀檢測兩組凝血功能指標凝血酶原時間(PT)、血漿凝血酶時間(TT)、活化部分凝血活酶時間(APTT)和纖維蛋白原(FIB)，并對其差異進行比較。

1.3.3 療效評價標準 痊愈：患者癥狀完全消失，肢體功能基木恢復；顯效：患者傷口局部腫痛顯著緩解，全身癥狀消失，但肢體功能有一定限制；有效：患者癥狀有所減輕，但肢體功能嚴重受限或截肢；無效：病情無改善甚至惡化或者死亡。總有效率=顯效率+痊愈率。15天后評估有效率。

1.3.4 不良反應發生率 主要研究用藥過程中可能出現的不良反應，如過敏性反應、血清病等。

2 結 果

2.1兩組患者血清細胞因子的變化治療前TNF-α、IL-6、IL-10兩組對比無顯著性差異(P>0.05)；治療1天后，兩組TNF-α、IL-6均達到高峰，且兩組對比差異無統計學意義(P>0.05)；隨后兩組TNF-α、IL-6均逐漸降低，治療3天后，觀察組IL-6較對照組顯著降低(P<0.05)，而治療3天、7天后，觀察組TN F-α較對照組顯著降低(P<0.05)。隨疾病進展，IL-10持續上升，對照組和觀察組分別于治療3天、治療1天后達到高峰，兩組隨后均逐步下降，治療3天、7天后觀察組IL-10均顯著低于對照組(P<0.05)。詳見表1.

表1 兩組治療前后TNF-α、IL-6和IL-10水平

與對照組對比，aP<0.05

2.2比較兩種療法對腹蛇咬傷患者凝血功能的影響從表2可以得知，治療前后兩組PT、TT、APTT和FIB比較均無顯著性差別。詳見表2。

表2 兩組患者治療前后凝血功能指標的比較[n(%)]

2.3兩種療法對腹蛇咬傷患者有效率的對比對照組總有效率85.4%；觀察組總有效率96.1%。觀察組總有效率顯著高于對照組(χ2=4.552，P=0.033)。詳情見表3。

表3 兩組患者治療總有效率比較

與對照組相比，aP<0.05

2.4兩種療法對腹蛇咬傷患者不良反應發生率的對比對照組總不良反應發生率4.2%，觀察組總不良反應發生率5.2%。兩組總不良反應發生率對比無統計學意義(χ2=0.068，P=0.795)。詳見表4。

表4 兩組患者治療總不良反應發生率比較[n(%)]

3 討 論

毒蛇咬傷的主要致病因素為凝血毒素、心臟毒素、出血毒素等血循環毒為主的混合毒，然而除了毒素直接作用外，蛇毒可活化機體細胞免疫應答，促進炎性因子釋放，導致全身性炎癥反應，這種毒蛇咬傷后炎癥反應可引起該癥出現機體嚴重損傷[6]，而這種炎癥反應僅用抗蛇毒血清不能中和，應用相關細胞因子拮抗劑可有效抑制[6-7]。采取有效措施，降低毒蛇咬傷后炎癥反應，可能有助于增強治療效果，改善該癥的預后。

紅花黃色素是從紅花中提取得到的多種水溶性查爾酮成分的混合物，為紅花主要活性成分。李秋宇等[8]發現紅花黃色素能降低膿毒血癥大鼠血清IL1-a、TNF-α水平，起到降低炎癥反應的作用。紅花黃色素對急性肺損傷小鼠的TNF-α，IL-1β及IL-6表達升高有抑制作用，且呈現一定的量效趨勢[9]。還有學者研究指出[10]，紅花黃色素通過抑制動脈內皮細胞中TNFR1/NF-κB信號通路而發揮抗炎作用。新近有一篇文獻[11]報道紅花黃色素對膿毒癥有治療作用，可減輕炎癥介質導致的損傷，抑制亢進的炎癥反應。

蝮蛇咬傷作為一種有害刺激源，作用于機體后，TNF-α水平迅速升高，并很快達到峰值，誘導產生多種炎癥因子，這些促炎因子之間相互作用后可形成許多正反饋，導致“炎癥級聯效應”的發生[11]。炎癥因子越高，往往機體損傷越嚴重，提示炎性因子水平與病情嚴重程度一致，可以作為評估蛇傷患者就診時病情嚴重程度的客觀指標[4]。有報道指出，IL-6表達的上調代表著不受控制的強烈炎癥反應[12]，其表達水平與炎癥反應的損傷程度存在一致性[13]。本研究中，隨著疾病進展，蝮蛇咬傷后TNF-α、IL-6急速增高，于咬傷1天后達到高峰，隨著治療的進行，TNF-α、IL-6隨后逐漸下降，實驗數據表明，蝮蛇咬傷后，常規處理能有效地降低TNF-α、IL-6的表達水平，然而加用紅花黃色素后，TNF-α、IL-6降幅更明顯，提示紅花黃色素在抗炎癥反應中起到了一定積極作用。IL-10在炎癥反應中能抑制促炎因子合成分泌從而抑制炎癥反應，然而，臨床試驗證實[14]，毒蛇咬傷早期，應用有效抗炎藥物治療后，機體IL-10顯著增高，因此認為IL-10過度表達可能激發了機體的非特異性免疫紊亂。本研究結果中，應用紅花黃色素后，IL-10上升趨勢于治療1天后得到有效逆轉。紅花黃色素協同治療3天、7天后，IL-10表達水平較常規處理顯著降低，這可能有利于調節機體非特異性免疫平衡，改善蝮蛇咬傷預后。臨床研究中，評價一種療法是否更有優勢取決于治療后總有效率及安全性。盡管紅花具有活血化瘀的功效，理論上可能對毒蛇咬傷患者凝血功能造成一定影響，然而本研究證實，應用紅花黃色素聯合抗蛇毒血清治療蝮蛇咬傷，患者凝血功能較單用抗蛇毒血清無顯著性差異，提示應用紅花黃色素未顯著導致患者凝血功能異常，且總有效率顯著增高，而不良反應發生率并未見顯著性增加，提示紅花黃色素協同抗蛇毒血清能有效提升治療效果，且安全性高，是一種治療蝮蛇咬傷的有效的臨床用藥方案。綜上所述，

紅花黃色素治療蝮蛇咬傷上可有效降低TNF-α、IL-6表達，抑制IL-10增高，具有一定的抗炎效果，且安全性高，可成為治療蝮蛇咬傷的臨床輔助用藥。

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