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參景固本方抗衰老及調節血脂作用研究

2018-06-19 06:43:24柴晶美周麗雅
長春中醫藥大學學報 2018年3期
關鍵詞:劑量模型

柴晶美,周麗雅,李 欣

(長春中醫藥大學基礎醫學院,長春 130117)

參景固本方由紅景天、人參、山楂等中藥組成,補中寓清,具有增強機體免疫力及抗氧化作用,適用于亞健康人群扶正固本、延緩衰老的治療作用[1-2]。本研究采用D -半乳糖誘導致亞急性衰老模型大鼠,觀察其體質量變化、胸腺指數、脾臟指數、腦組織中MDA、SOD值及血脂含量,進一步分析參景固本方抗氧化、延緩衰老的作用機制,為其臨床應用提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 動物 SD雌性大鼠60只,體質量180~220 g,許可證號:SCXK(遼)2015-0001。

1.2 試劑與藥品 參景固本方:紅景天、人參、山楂(安徽易元堂中藥飲片有限公司)。按照常規煎煮藥材方法制成1 g生藥/mL的藥液,4 ℃冷藏備用。D -半乳糖(源葉生物);金匱腎氣丸(北京同仁堂),MOD、T-SOD、TG、T-CHO、HDL-C試劑盒(南京建成生物)。

1.3 分組、造模與給藥 將60只大鼠隨機分為6組,即正常對照組、模型組、參景固本方低(4 g/kg)、中(8 g/kg)、高(16 g/kg)劑量組及金匱腎氣丸(1 g/kg)組,各10只,自由飲食飲水。適應性喂養2 d后進行實驗,實驗前記錄大鼠初始體質量。正常對照組和模型組灌胃等量生理鹽水,參景固本方組灌胃給藥,1次/d;同時全部大鼠(除正常對照組外)按125 mg/kg劑量頸背部皮下注射D -半乳糖,正常對照組以等體積生理鹽水注射,灌胃與注射同時進行,連續42 d。

1.4 大鼠胸腺和脾臟指數的測定 末次給藥后稱量各大鼠體質量。大鼠麻醉后,完整剝離胸腺與脾臟,用生理鹽水沖洗2次后濾紙吸干水分,進行稱重。計算脾臟指數及胸腺指數。

1.5 大鼠腦組織中MDA和SOD值的測定 大鼠麻醉后迅速取腦組織,用冰冷的生理鹽水沖洗后,取部分腦組織低溫環境下勻漿取上清液備用。按照試劑盒說明書的操作步驟,測定MDA和SOD值。

1.6 大鼠體質量變化及血脂的測定 大鼠麻醉后,腹腔動脈取血,1 500 r/min離心15 min。取上清液,按照試劑盒說明書的操作步驟,測定TG、TC及HDL-C值。

1.7 統計學方法 數據采用統計學軟件SPSS 19.0進行分析,結果以均數±標準差()表示,2組間比較進行t檢驗,多組均數間比較采用方差分析,以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 6組大鼠體質量變化及增重比率變化比較 見表1。

表1 6組大鼠體質量變化及增重比率變化比較( ,n = 10) g

表1 6組大鼠體質量變化及增重比率變化比較( ,n = 10) g

注:與正常對照組比較,## P<0.01;與模型組比較,△P<0.05,△△P<0.01;與金匱組比較,▲P<0.05

組 別 第1天體質量 第42天體質量 增重比率正常對照組 197.6±4.7 295.3±17.5 0.49±0.11模型組 196.3±5.1 259.4±13.9 0.31±0.08##低劑量組 197.6±7.7 267.1±9.8 0.35±0.07△△▲中劑量組 198.7±5.2 276.3±19.6 0.40±0.11△△高劑量組 197.3±4.2 284.9±22.8 0.44±0.13△△金匱組 196.3±5.1 291.1±25.0 0.48±0.13△

2.2 6組大鼠胸腺指數和脾臟指數變化比較 見表2。與金匱組比較,參景固本方低劑量組和中劑量組胸腺指數降低(P<0.01,P<0.05),高劑量組變化不明顯,差異無統計學意義。

表2 6組大鼠胸腺指數和脾臟指數變化比較(x± ,n = 10) mg/g s

2.3 6組對大鼠腦組織中MDA含量和SOD活性比較 見表3。與模型組相比,參景固本方中劑量組SOD活性明顯升高(P<0.05),高劑量組SOD活性顯著升高,MDA含量顯著降低(P<0.01),金匱組SOD活性也顯著升高(P<0.01)。

表3 6組大鼠腦組織中MDA含量和SOD活性比較(,n = 10) mg/mL

表3 6組大鼠腦組織中MDA含量和SOD活性比較(,n = 10) mg/mL

注:與正常對照組比較,# P<0.05;與模型組比較,△P<0.05,△△P<0.01

組 別 MDA SOD正常對照組 3.41±0.14 170.57±26.97模型組 4.46±0.93# 130.23±45.98#低劑量組 4.03±0.16 151.25±56.90中劑量組 3.87±0.31△ 174.28±29.23△高劑量組 3.12±0.56△△ 194.13±49.44△△金匱組 3.76±0.20△ 180.63±12.94△△

2.4 6組大鼠血清中TG、T-CHO及HDL-C含量比較 見表4。與金匱組比較,高劑量組TG和T-CHO含量升高(P<0.01,P<0.05),HDL-C含量明顯降低(P<0.05)。

表4 6組大鼠血清中TG、T-CHO及HDL-C含量比較( ,n = 10) mmol/L

表4 6組大鼠血清中TG、T-CHO及HDL-C含量比較( ,n = 10) mmol/L

注:與正常對照組比較,# P<0.05,## P<0.01;與模型組比較,△ P<0.05,△△P<0.01;與金匱組比較,▲ P<0.05,▲▲ P<0.01

組 別 TG T-CHO HDL-C正常對照組 1.55±0.36 1.71±0.21 0.73±0.31模型組 1.31±0.19# 1.57±0.33 1.29±0.34##低劑量組 1.17±0.20## 1.69±0.12 1.25±0.43##中劑量組 1.20±0.27## 1.79±0.18△△ 0.83±0.19△△高劑量組 1.44±0.17▲▲ 1.84±0.36△△▲ 0.61±0.17△△▲金匱組 1.12±0.13## 1.51±0.26 0.96±0.29#

3 討論

研究[3-6]表明,參景固本方中紅景天、人參、山楂均具有抗氧化、抗衰老作用,同時山楂也有改善血脂的作用。免疫衰老是機體免疫系統產生的一系列極其復雜的反應過程,通常會伴有免疫指標的退行性改變[7]。胸腺和脾臟作為重要的免疫器官對 T 淋巴細胞和 B 淋巴細胞的分化、發育、免疫有重要作用,因此胸腺、脾臟指數常用來評價機體的免疫功能[8-9]。MDA是常用的膜脂過氧化指標,其含量可間接反映機體衰老的程度[10]。SOD 是機體中重要的抗氧化酶,可清除機體內超氧陰離子自由基,從而保護細胞膜免受氧自由基的損傷[11]。

本實驗研究發現,在連續42 d的藥物注射后D -半乳糖致亞急性衰老模型的大鼠的增重率、胸腺指數及脾臟指數明顯低于正常對照組,同時腦組織中MDA含量顯著增加,SOD、T-AOC活性明顯減低。實驗結果表明,經參景固本方治療后,增重率有所提高,說明參景固本方可改善衰老模型大鼠的營養不良及形體消瘦情況。胸腺指數和脾臟指數的增加表明參景固本方對衰老大鼠的胸腺、脾臟的萎縮有一定的延緩作用。用參景固本方干預后可提高腦組織中SOD活性,進而減少MDA含量。結果提示,參景固本方可通過提高抗氧化酶的活力來減少脂質過氧化物的生成,從而提升機體抗氧化、抗衰老的作用。在血脂調節方面,模型組TG、HDL-C含量明顯低于正常對照組,這與D -半乳糖干預致衰老大鼠五臟功能下降,功能障礙導致的營養不良有關,實驗結果表明,參景固本方高劑量組與正常對照組TG、T-CHO及HDL-C含量均無顯著性差異,說明參景固本方具有一定的改善血脂平衡的作用,為參景固本方的臨床應用提供了藥理學依據。

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