寧夏回族高血壓過氧化物酶體增殖物激活受體γ2基因多態(tài)性與血脂關(guān)系的探討

劉海燕 張曉伏 徐清斌

【摘要】 目的：探討寧夏回族高血壓PPARγ2基因多態(tài)性與血脂的關(guān)系。方法：收集寧夏回族146例EH患者、回族112例NT者，采用聚合酶鏈反應(yīng)限制性片段長度（PCRRFLP）多態(tài)性技術(shù)檢測PPARγ2 Pro12Ala基因多態(tài)性，進(jìn)一步分析寧夏回族高血壓各基因型與血脂的關(guān)系。結(jié)果：寧夏回族人群Ala12攜帶者（PA/AA）的基因型分布及A等位基因頻率在EH組和NT組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），寧夏回族高血壓PA/AA基因型組甘油三酯水平低于PP基因型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），在TC、HDLC、LDLC、BMI上差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：PPARγ2 Pro12Ala基因變異與寧夏回族高血壓病無顯著關(guān)聯(lián)；PA/AA型高血壓患者甘油三酯水平顯著低于PP型者。

【關(guān)鍵詞】 過氧化物酶體增殖物激活受體；多態(tài)性；寧夏回族；血脂

過氧化物酶體增殖物激活受體（PPAR）是人類重要的核轉(zhuǎn)錄因子之一，其亞型PPARγ是參與調(diào)節(jié)糖、脂質(zhì)代謝重要因子，PPARγ基因是一種遺傳易感基因，Pro12Ala為PPARγ基因最常見的多態(tài)位點(diǎn)[1]，此變異與代謝綜合征的關(guān)系是當(dāng)今研究的熱點(diǎn)之一，不同的種群研究結(jié)果不一，在此筆者關(guān)注的是PPARγ2基因Pro12Ala突變與寧夏回族高血壓人群血脂的關(guān)系。

1材料與方法

1.1研究對象

研究對象來自2009年12月至2010年10月在寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院門診體檢及住院且長期居住于寧夏的回族個體。高血壓組（EH組）146例，男74例、女72例，平均年齡（48.28±16.03）歲。正常對照組（NT組）112例，男63例、女49例，平均年齡（45.1±16.16）歲。

1.2方法

1.2.1收集一般臨床資料，如姓名、年齡、性別、民族、家族史等。測量身高、體質(zhì)量，計算體質(zhì)量指數(shù)BMI。

1.2.2生化指標(biāo)清晨空腹12h抽取外周的靜脈血，行生化檢查檢測血尿酸（UA）、空腹血糖（GLU）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）等。

1.2.3外周血抽提DNA靜脈血EDTA-Na抗凝使用DNA小量抽提試劑盒提取血液基因組DNA。

1.2.4PCR擴(kuò)增引物利用Premier5.0軟件設(shè)計，上游引物為5CAAGCCCAGTCCTTTCTGTG3，下游引物為5AG TGAAGGAATCGCTTTCCG3。PCI反應(yīng)體系20μL，反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性3min，94℃變性30s，50℃退火30s，

基金項(xiàng)目：寧夏醫(yī)科大學(xué)青年基金項(xiàng)目（XQ2012010）

72℃延伸30s，循環(huán)35次，72℃延伸10min。對PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行酶切，酶切產(chǎn)物經(jīng)電泳系統(tǒng)電泳并軟件分析電泳結(jié)果。

1.2.5PCRRFLP分析結(jié)果受檢者DNA經(jīng)PCR擴(kuò)增后，可產(chǎn)生267bp特異擴(kuò)增產(chǎn)物。擴(kuò)增產(chǎn)物HpaII酶切后，Pro12野生純合子（PP）呈二個電泳帶型224bp，43bp，A la12突變純合子（AA）呈一個電泳帶267bp，Pro12A la突變雜合子（PA）電泳帶呈三個電泳帶267bp、224bp和43bp。見圖1。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，組間計量資料用（±s）表示，計數(shù)資料以頻數(shù)表示，組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn)，方差不齊采用近似t檢驗(yàn)。計數(shù)資料頻數(shù)比較用χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)a=0.05。

2結(jié)果

2.1EH組和NT組一般臨床資料

EH組和NT組在年齡、性別、TC、HDLC、LDLC上無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）；在收縮壓、舒張壓、BMI、TG上有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。見表1。

2.2EH組和NT組PPARγ2基因型及等位基因比較

兩組PP、PA和AA三種基因型總體分布頻率無統(tǒng)計學(xué)差異（χ2=2.118，P=0.282），P、A等位基因間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=2.054，P=0.152）。見表2。

2.3寧夏回族高血壓PPARγ2不同基因型間血脂水平的比較

PA/AA基因型組和PP基因型組的TG水平有顯著差異（P<0.05），在TC、HDLC、LDLC、BMI上差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。如表3。

3討論

Pro12Ala基因多態(tài)性位于PPARγ2外顯子B上，由于第34位核苷酸C→G的替換，而造成PPARγ2特有氨基酸序列發(fā)生改變，從而引起其功能的變化。Ala等位基因頻率在不同種族中有差異，日本人為4%、薩摩亞人為8%、美國人為10%[2]。本研究發(fā)現(xiàn)寧夏回族高血壓人群與正常人群A等位基因分別為7.5%和4.5%，與上述報道亦有所差異。

回族是我國具有代表性的少數(shù)民族之一，寧夏是我國回族聚居的主要地區(qū)之一，由于回族禁止與非信仰伊斯蘭教的民族間通婚，因此形成了遺傳上相對隔離的“隔離群體”。通過比較發(fā)現(xiàn)，本研究與既往多個研究結(jié)果存在差異，可能是樣本量大小、基因多態(tài)性位點(diǎn)的作用強(qiáng)度不同、不同種群的遺傳背景差異以及疾病、飲食習(xí)慣等不同導(dǎo)致的上述差異?？傊?，全面認(rèn)識PPARγ2 Pro12Ala基因變異與寧夏回族高血壓、血脂紊亂的相關(guān)性對研究我國不同人群代謝綜合征的發(fā)病機(jī)制、早期預(yù)防及臨床治療起指導(dǎo)作用。

參考文獻(xiàn)

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[4] 張曉伏，李新茹，薛新宏，等.過氧化物酶體增殖物激活受體γ2基因Pro12Ala多態(tài)性與寧夏回、漢族原發(fā)性高血壓的關(guān)系[J].臨床心血管病雜志，2018，34（01）：4751.

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