遺忘型與血管型MCI患者尿AD7c-NTP水平檢測及臨床價值

劉文燦 王文靜 倪明珠 褚忠海 王 瑤

輕度認知功能障礙（MCI）是一種介于認知功能正常和癡呆之間的過渡狀態，處于這種狀態的個體，臨床常表現為復合性注意力、執行能力、學習與記憶、語言、視結構-知覺能力、社會認知等多個領域的認知障礙，常以近記憶力減退為主，但不影響正常生活，相比于認知功能正常的老人，MCI患者更容易進展為癡呆[1～2]。近年來，有研究發現阿爾茨海默病（AD）患者尿液中AD7c-NTP水平較健康老人明顯升高[3]，也有研究表明MCI患者的尿液中AD7c-NTP水平顯著升高[4]，但對MCI亞型的研究鮮有文獻報道，因此我們將進一步探討aMCI和VaMCI患者尿液中AD7c-NTP的水平差異，并分析其與認知損害程度之間的關系。

1　資料與方法

1.1研究對象 選取2017年4月-2017年10月在安徽省立醫院神經內科門診和住院就診的MCI患者70例，其中aMCI組40例，VaMCI組30例。同期選取本院認知功能檢查正常的健康體檢者27名對照，所有受試者均知情同意。

1.1.1aMCI組的診斷標準 參考Peterson RC等[5]提出的診斷標準，并加以修改：①主訴記憶或其他認知功能障礙，并由相關知情者確認。②日常生活能力保留，日常生活能力量表（ADL）得分≤26分。③按美國精神學會《精神障礙診斷與統計手冊（第5版）》（DSM-V），未達到神經認知障礙顯著的診斷標準。④Hachinski缺血指數量表（HIS）≤4分。⑤臨床癡呆評定量表（CDR）得分為0.5分。

1.1.2VaMCI的診斷標準 參照《中國血管性輕度認知損害診斷指南》提出的診斷標準[6]，具體如下：①神經心理學測評證實存在認知功能損害：1個以上認知領域確定的損害或2個以上領域臨界的損害。②頭顱MRI或CT證實有腦血管病，包括多發性腔梗、關鍵部位腦梗死及腦白質病變。③腦血管病和認知功能損害之間具有相關性或足以構成認知損害的原因（如認知損害發生在腦血管病3個月內或HIS≥7分，或無腦血管事件發生，但存在信息處理速度和/或執行功能明顯減退證據，且具步態、小便、人格異常特征之一）。④日常生活能力保留，ADL得分≤26分。⑤按DSM-V未達到神經認知障礙顯著的診斷標準。⑥CDR=0.5分。

1.1.3排除標準 ①中樞神經系統感染、癲癇、顱腦外傷、蛛網膜下腔出血、腦積水及顱內腫瘤。②各種累及中樞神經系統的嚴重內科疾病。③嚴重的精神疾病。④嗜酒及濫用抗精神病藥物者。⑤不能配合認知功能檢查者。

1.2方法

1.2.1一般檢查和神經心理評分 所有受試者均行詳細的病史采集、系統的體格檢查、常規實驗室檢查、心電圖及頭顱 CT 和（或）MRI 檢查，并由經過培訓的神經內科醫師在安靜明亮的房間內進行相關量表的評估，包括MoCA、CDR、HIS及ADL，若受試者受教育年限≤12年，則MoCA評分加上1分，糾正教育年限對認知評估結果的影響。

1.2.2尿標本采集 各組受試者均于清晨留取澄清中段尿20 mL，其中10 mL送檢尿常規，出現下列任意一種情況即為不合格標本：①尿蛋白陽性。②尿液白細胞計數和紅細胞計數異常。③尿液中有結晶。④尿比重異常。⑤pH值異常。⑥尿葡萄糖、酮體、亞硝酸鹽、尿膽原或膽紅素呈陽性。將合格的標本進行離心（2 000 r/min，離心10 min），取上清液于1 mL EP管內，后置于-79℃冰箱密封保存待測。

1.2.3標本檢測 采用ELSA法檢測尿中AD7c-NTP水平，測試前將標本在室溫下溶解，人AD7c-NTP酶聯免疫吸附檢測試劑盒由上海源葉生物技術有限公司提供，嚴格按試劑說明書操作。

1.3統計學方法 用SPSS l7.0軟件對所得數據進行統計學處理，符合正態分布的計量資料用(x± s)表示，多組間比較，滿足正態分布和方差齊性時，用單因素方差分析，方差不齊時采用秩和檢驗。計數資料比較采用χ2檢驗。尿AD7c-NTP水平與MoCA評分之間的關系采用相關性分析，P＜0.05為差異有統計學意義，繪制ROC曲線，并計算曲線下面積及各點的靈敏度和特異度。

2　結 果

2.1一般臨床資料和MoCA評分比較 3組受試者的性別、年齡及受教育年限相比，差異無統計學意義（P＞0.05）；對照組MoCA評分顯著高于aMCI組和VaMCI組，差異有統計學意義，而aMCI組與VaMCI組MoCA評分差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1　各組受試者一般資料的比較（±s）

表1　各組受試者一般資料的比較（±s）

MoCA評分（分）aMCI組　40　16/24　69.4±8.897.7±4.8422.65±3.27 VaMCI組 30　20/10　70.2±7.007.0±3.9022.33±2.82對照組　27　15/12　67.0±9.048.6±4.5925.37±3.45 F（χ2）　5.022　1.061　0.815　7.881 P 0.081　0.350　0.446　　＜0.01組別　n　　性別（女/男）年齡(歲)受教育年限（年）

2.2aMCI組、VaMCI組和對照組尿液中AD7c-NTP水平的比較 aMCI組的尿AD7c-NTP水平明顯高于VaMCI組和對照組（P＜0.05，P＜0.01）；而VaMCI組的尿AD7c-NTP水平雖高于對照組，但差異無統計學意義（P＞0.05），見表2。

表2　各組受試者尿AD7c-NTP水平的比較 （±s）

表2　各組受試者尿AD7c-NTP水平的比較 （±s）

注：與對照組比較：★P＜0.05，#P＞0.05。

組別　n　AD7c-NTP含量（ng/L）aMCI組　40　3427.63±1126.25★VaMCI組　30　2789.76±974.04#對照組　27　2289.95±656.98

2.3尿AD7c-NTP水平與認知功能評分的相關性分析 尿AD7c-NTP水平與MoCA評分呈負相關（r=-0.362，P＜0.01）；校正教育年限的影響后，尿AD7c-NTP水平與MoCA評分仍具有相關性（r=-0.366，P＜0.01）。

2.4尿AD7c-NTP水平對aMCI診斷的敏感度及特異度比較 以尿液中不同的AD7c-NTP水平為診斷界值，其診斷aMCI的敏感性隨1-特異性的增強而呈現出下降趨勢。尿AD7c-NTP對診斷aMCI有統計學意義（P＜0.01），ROC曲線下面積為0.828，95%可信區間為0.728～0.928。且尿液中AD7c-NTP水平在2 507.10 ng/L時，其診斷aMCI的敏感性為80%，同時特異性可以達到77.8%。

3　討 論

隨著全球人口的老齡化，老年性癡呆的發病率和患病率也逐年遞增。2010年全球約有3600萬人罹患癡呆，而到2050年這個數目預計將達到1.15億。癡呆患者晚年的健康狀況和生活質量不斷下降，并對其家庭和社會造成巨大的負擔[2]。目前癡呆尚無特效的治療方法和藥物，臨床治療多以推遲和延緩病情為主。

每年約有5%～20%的MCI患者轉變為癡呆，早期識別這部分患者并加以干預，對延緩癡呆的發生和發展具有重要的意義[1～2]。輕度認知功能障礙（MCI）主要分為遺忘型輕度認知功能障礙(aMCI)和非遺忘型認知功能障礙（naMCI），而非遺忘型認知功能障礙，主要以血管性輕度認知功能障礙(VaMCI)為主。aMCI被認為是AD的前驅狀態，早期通過適當的記憶訓練可以延緩甚至阻礙其向AD的轉化；而VaMCI主要是由于腦小血管病引起的認知功能障礙，其主要的治療措施是控制基礎疾病。早期對兩者進行鑒別，對指導其后續治療有重要參考意義。

AD7c-NTP是神經蛋白家族的一個成員，它由Monte SM等[7]在1997年首次從晚期AD患者的腦標本中分離出，是一種分子量為41kD的跨膜磷蛋白。隨著研究的深入，AD7c-NTP的基因被發現在早期AD患者的腦組織中過度表達，促進了神經炎的發生和細胞的死亡，從而導致早期AD患者的皮層神經元、腦組織、腦脊液和尿液中AD7c-NTP的水平均有升高，且含量與癡呆的嚴重程度具有相關性[3]。近年來也有研究發現，MCI患者的腦脊液、血液及尿液中AD7c-NTP的含量也較正常對照升高，且腦脊液與尿液檢測精度相似[4]。

本研究結果發現在aMCI組患者尿AD7c-NTP水平較VaMCI組和對照組顯著升高，并且與認知功能損害評分呈負相關，排除教育年限的影響后，這種關系仍存在，這與既往研究結果相一致[8～9]。王艷等[8]研究發現在不同類型的癡呆患者中，血管性癡呆（VaD）組與對照組的尿AD7c-NTP水平差異未達到統計學意義。本研究同樣發現VaMCI組尿中AD7c-NTP的水平與對照組的差異無統計學意義。以上結果進一步證實了尿AD7c-NTP水平變化對aMCI的診斷具有一定的臨床參考價值，并且與aMCI的嚴重程度的可能存在一定的相關性。

近年研究發現尿AD7c-NTP在診斷AD的敏感性和特異性均能達到80%～90%左右[3～4]。在本研究中，尿中AD7c-NTP的含量在2507.10 ng/L，對診斷aMCI其敏感性為80%，同時特異性可以達到77.8%，進一步證實了其對aMCI診斷的參考價值。

本研究的不足之處：本研究雖然收集清晨中段尿，但因個人尿液濃縮的差異可能會影響部分標本濃度；本研究收集的樣本量較少，且未對其進行長期隨訪，結果可能存在一定偏倚。后期需進一步改進實驗方法，同時增大樣本量，進一步對各組進行隨訪，定期對其尿AD7c-NTP及認知障礙水平進行檢測，了解其轉歸情況。

綜上所述，尿AD7c-NTP水平變化對MCI尤其是aMCI的診斷具有一定的臨床參考價值，并且與aMCI的嚴重程度的可能存在一定的相關性。