突觸融合蛋白6與突觸融合蛋白8的表達在胃癌預后中的價值

馬麗，仝建軍，薛建波，徐濤

（首都醫科大學大興教學醫院 消化內科，北京 102600）

胃癌（gastric cancer, GC）是導致患者死亡的第2大常見惡性腫瘤，全球每年有約80萬人因胃癌致死[1]。盡管關于胃癌的早期診斷和各種治療方法有了較大的進展，但依然存在治愈難、預后差的難題[2-3]。因此，為了提高胃癌患者的臨床療效，需要進一步的探索胃癌發生、發展進程中相關的分子機制，尋找潛在的治療靶點和預后標志。可溶性N-己基順丁烯二酰亞胺敏 感 因子（N-ethyl-maleimide-sensitive factor, NSF）附著蛋白（soluble NSF attachment proteins, SNAP）的膜受體SNARE（SNAP receptors）蛋白在腫瘤的發生、發展及侵襲轉移進程中扮演著重要的角色[4-5]。其成員突觸融合蛋白Syntaxin 6（STX6）、Syntaxin 8（STX8）蛋白分別在食管鱗癌[6]和腦膠質瘤[7]的發生、發展進程中發揮重要作用，敲低STX8基因能夠有效抑制腫瘤細胞增殖。但STX6和STX8是否與胃癌的發生、發展及預后有關，目前還不清楚。因此，本文通過Kaplan-Meier plotter（KM plotter）在線數據庫分析STX6和STX8表達與胃癌患者臨床病理特征的相關性，并探討其在胃癌患者預后中的意義和價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 KM plotter在線數據庫分析

通過在線數據庫KM plotter（http：//kmplot.com/gastric）獲得的882例胃癌患者臨床病理信息，包括臨床分級、淋巴結轉移狀態、遠處轉移狀態、Lauren分類、分化程度及HER2狀態。對STX6和STX8在胃癌患者總生存期（overall survival, OS）中的預后價值進行在線分析。根據STX6和STX8基因表達水平高于或低于中位數，分為高表達和低表達，并得出相應的風險比（hazard ratio, HR）、95%置信區間（CI）和P值。

1.2 統計學方法

數據分析采用SPSS 16.0統計軟件，采用χ2檢驗對臨床資料進行相關性分析，采用Kaplan-Meier法對患者的生存危險比及95%CI進行分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 STX6和STX8 mRNA表達與胃癌預后分析

STX6的Affymetrix ID為：212799_at。KM plotter在線數據分析發現，STX6 mRNA的高表達與胃癌患者較好的OS相關，STX6 mRNA高表達胃癌患者的OS要好于低表達患者（P＜0.05），風險比（95%CI：0.57，0.86）]。STX8的Affymetrix ID為：204690_at。STX8 mRNA的高表達與胃癌患者OS相關，STX8 mRNA高表達胃癌患者的OS要好于低表達患者（P＜0.05），風險比見附圖。

2.2 STX6和STX8 mRNA表達與胃癌患者臨床病理特征的相關性

進一步探究STX6、STX8 mRNA表達與胃癌臨床病理特征的相關性，發現STX6 mRNA表達與胃癌患者的Lauren分型中混合型、HER2狀況、淋巴結轉移、無遠處轉移相關（P＜0.05）（見表1）。STX8 mRNA表達與胃癌患者的臨床分級的Ⅱ級和Ⅳ級、Lauren分型中腸型和彌漫型、HER2陰性、無遠處轉移相關（P＜0.05）（見表2）。

附圖 STX6及STX8 mRNA表達與胃癌患者生存時間曲線圖

表1 STX6 mRNA表達與胃癌患者臨床病理特征的相關性

表2 STX8 mRNA表達與胃癌患者臨床病理特征的相關性

3 討論

隨著對幽門螺桿菌、易致癌食物等易導致胃癌發生的危險因素的不斷控制以及腫瘤治療手段的長足發展，胃癌發生率及病死率有一定程度的降低，但由于其轉移復發率依然居高不下，胃癌患者的預后及遠期生存仍是亟待解決的難題[8]。Kaplan-Meier plotter通過采用（Gene Expression Omnibus, GEO）數據庫檢測某個基因在癌癥患者中的預后價值。Kaplan-Meier plotter作為1個有效的工具，目前已經通過該平臺確定許多可以作為預后標志或潛在藥物靶點的基因[9-12]。

SNARE蛋白是作為跨膜蛋白是真核生物中調節膜融合的關鍵因子，參與細胞各種生理活動[13-14]。其中STX6和STX8是其亞家族Syntaxin的成員，STX6作為一種囊泡轉運蛋白，參與胞內蛋白質轉運，尤其是在細胞膜重建過程中發揮關鍵作用[15]。STX8在胞內主要定位于高爾基體、溶酶體和胞內體的膜上，參與細胞內物質運輸及膜融合過程[16-17]。研究表明[18]，STX8能夠與STX7蛋白、小泡運輸通過相互作用t-SNAREs同源物蛋白（vesicle transport through interaction with t-SNAREs homolog 1B, vti1b）或vti1a蛋白以及小泡相關 膜 蛋 白7（vesicle-associated membrane protein 7,VAMP7）或VAMP8蛋白在膜融合過程中形成SNARE復合體，啟動囊泡融合，促進蛋白降解。研究發現[19]，STX6在肺癌、食管癌、膀胱癌等腫瘤組織中表達異常，影響食管鱗狀細胞癌的生長和遷移。STX8在多形性腦膠質瘤中與有絲分裂誘導基因6（mitogen-inducible gene-6, MIG-6）蛋白形成復合體，參與表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor, EGFR）的降解，影響EGFR介導的促腫瘤信號，進而影響腦膠質瘤的發生發展進程[20]。但STX6及STX8在胃癌的預后中的作用和價值還未被廣泛的研究。

本研究發現，胃癌組織中STX6 mRNA的高表達與患者較好的OS密切相關，STX6 mRNA高表達的胃癌患者的OS要高于低表達患者；其表達與胃癌患者的Lauren分型中混合型、HER2狀況、淋巴結轉移、無遠處轉移密切相關。DU等[6]研究發現，STX6在食管鱗狀細胞癌中上調表達，沉默STX6能抑制食管鱗狀細胞癌細胞增殖，提示STX6具有一定的促癌作用。但本研究中，STX6 mRNA高表達的胃癌患者OS較好，提示STX6在胃癌發生、發展進程中發揮一定的抑癌作用。因此，STX6在不同的腫瘤中可能發揮不同的功能，也可能是由于存在腫瘤差異性導致，但目前有關STX6在腫瘤中具體的作用機制尚不清楚，還需要進一步的探索。本研究發現，STX8 mRNA的高表達與胃癌患者較好的總生存期OS密切相關，STX8 mRNA高表達胃癌患者的OS要好于低表達患者；其表達與胃癌患者的臨床分級的Ⅱ級和Ⅳ級、Lauren分型中腸型和彌漫型、HER2陰性、無遠處轉移密切相關。有報道稱STX8在原發性肝癌組織中表達下調，并與腫瘤的TNM分期及淋巴結轉移相關[21]，提示STX8可能在肝癌的發生發展進程中發揮抑癌基因作用；但有研究表明[7]，在腦膠質細胞瘤U251細胞中靶向敲低STX8基因能夠有效抑制細胞增殖、遷移及侵襲能力，提示STX8可能在腦膠質瘤的發生、發展進程中發揮促癌基因功能。因此，STX8基因可能在不同的腫瘤中發揮不同的作用。本研究發現STX8 mRNA高表達胃癌患者OS較好，提示STX8可能對胃癌的發生、發展產生一定的抑癌作用，但還需要進一步的研究證實。胃癌中STX6、STX8的表達水平能夠作為一種潛在的胃癌遠期預后的評價指標。但還需要大樣本的臨床數據對此進行更進一步的檢測和驗證。

綜上所述，STX6、STX8 mRNA高表達可以提高胃癌患者的OS，與胃癌較好的預后密切相關。通過檢測胃癌組織中STX6、STX8的表達水平，或許能夠作為胃癌患者預后的一種預測指標，這將有助于開發出能夠更準確地預測患者預后的工具。盡管通過統計分析表明STX6及STX8在胃癌中具有一定的抑癌作用，但有關其具體的作用機制還尚不可知，仍需要基礎研究來探討。