血清補體C1q/腫瘤壞死因子相關蛋白12與非酒精性脂肪性肝病相關性研究

沈德峰，張　磊，倪小英，傅聿明，龐東岳，蘇長春，劉　婧

非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD） 是最常見的慢性肝臟疾病之一［1］，NAFLD涵蓋了不同階段的肝臟疾病，從單純性脂肪變性、脂肪性肝炎到纖維化和肝硬化［2］。NAFLD被廣泛認為是代謝綜合征的肝臟表現［3］。胰島素抵抗、炎癥、肝臟脂肪代謝紊亂是NAFLD重要的發病機制，而2型糖尿病和肥胖是其重要的危險因素［4］。

研究表明，眾多脂肪因子與胰島素抵抗相關性疾病關系密切，并參與了NAFLD的發生和發展［5］。脂肪因子補體C1q/腫瘤壞死因子相關蛋白12（serum complement C1q/tumor necrosis factor related protein 12，CTRP12）屬于CTRPs家族，具有胰島素增敏和抗炎作用，并在肥胖和糖尿病小鼠血清和脂肪組織中水平下降［6］。此外，也有研究發現血清CTRP12在糖尿病患者中較對照組濃度下降［7］。該研究旨在測定NAFLD患者血清CTRP12水平，并探討其與NAFLD患者臨床代謝參數及胰島素抵抗的關系。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2016年10月—2016年11月在興化市人民醫院體檢中心通過彩色超聲篩選出臨床資料完整的NAFLD患者86例，其中男56例，女30例；年齡34～69歲；均符合2002年中華醫學會肝臟病學分會《非酒精性脂肪性肝病診斷標準》。另選同期該醫院健康體檢者86例為對照組，男54例，女32例；年齡33～71歲。NAFLD入選者乙醇攝入男性每周<140 g，女性每周<70 g，并排除自身免疫性肝病、病毒性肝炎、藥物及毒物引起的肝病。所有入選者均排除糖尿病、嚴重肝腎疾病、心力衰竭、惡性腫瘤、庫欣綜合征、急性感染等，無吸煙史。該研究通過醫院倫理委員會批準，所有觀察對象均簽署知情同意書。

1.2研究方法

1.2.1體質參數的測定所有受試者均穿單衣單褲，脫鞋襪，測量腰圍（WC）、臀圍（HC），并計算腰臀比（WHR），WHR=WC/HC。測量身高體質量，并計算體質量指數 BMI。 BMI=體質量/身高2（kg/m2）；由體檢中心護士測量3次血壓取平均值，受試者測血壓前靜坐至少15 min。

1.2.2生化指標測定空腹至少10 h后，所有研究對象采集晨起靜脈血15 ml，3000 r/min離心10 min后分離血清，部分存于-80℃冰箱待測定CTRP12（ELISA，Aviscera，Santa，USA）。 其余血清用于總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、空腹血糖（FBG）、血尿酸（UA）、空腹胰島素 （FIns）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）的測定。FIns采用化學發光法測定 （AIA-2000ST，TOSOH company，Japan）。

1.2.3穩態模型評估法測定胰島素抵抗指數（HOMAIR）HOMA-IR=FIns（mIU/L）×FBG（mmol/L）/22.5。

1.3統計學處理采用SPSS 17統計軟件，計量資料以均數±標準差（x±s）表示。計數資料比較采用χ2檢驗，兩組連續變量比較采用獨立樣本t檢驗。CTRP12與其他變量分別進行Spearman相關、多元線性逐步回歸分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1臨床代謝指標及血清CTRP12水平比較兩組一般臨床資料及血清CTRP12水平比較見表1。兩組間年齡、性別、血壓、TC、LDL-C無統計學差異，WC、BMI、WHR、HDL-C、UA、HOMA-IR、TC、FBG、CTRP12 差異有統計學意義（P＜0.01 或 P＜0.05）。

2.2IMT與臨床指標的相關分析在NAFLD組中 Spearman相關分析顯示，CTRP12與 WC （r=0.312，P＜0.01）、WHR（r=0.361，P＜0.01）、BMI （r=0.357，P＜0.01）、FBG （r=0.342，P＜0.01）、HOMA-IR（r=0.265，P＜0.01）、TG（r=0.242，P＜0.01）呈正相關，與其他指標相關性無統計學意義（表2）。

2.3多元線性逐步回歸分析為明確CTRP12的獨立相關因素，進一步以CTRP12作為因變量，以年齡、性別、血壓、UA、FBG、血脂譜、HOMA-IR、BMI、WC、WHR等作為自變量，結果發現 FBG、BMI、WC是NAFLD患者血清CTRP12的獨立影響因子（表 3）。

3　討論

越來越多的證據表明，脂肪組織分泌的脂肪因子參與了能量代謝、炎癥調節等病理生理過程。脂肪因子分泌調節的紊亂和肥胖相關性疾病關系極為密切，瘦素、脂聯素、抵抗素等脂肪因子在糖尿病、代謝綜合征、NAFLD等代謝性疾病中的作用已得到廣泛認可［5］。CTRPs家族成員 CTRP1 和CTRP13已被證實參與了NAFLD的病理過程，血清CTRP1有可能成為 NAFLD 新的預測手段［8，9］。

表 1　兩組一般資料的比較

表 1　兩組一般資料的比較（續）

表 2　CTRP12與其他指標的相關性分析

表 3　CTRP12的獨立影響因素

NAFLD病因復雜，研究較多的有“二次打擊”學說、肥胖基因的多態性、炎癥機制、胃腸微生物群體變化等［4］。在“二次打擊”學說中，胰島素抵抗所致的肝臟脂質代謝紊亂是NAFLD發病的始動因素。胰島素抵抗時胰島素對脂肪代謝的調節作用減弱，導致脂肪的脂解作用增強，釋放游離脂肪酸（FFA）增多，致使循環中FFA增加，增多的FFA一方面通過血糖、血脂循環干擾肌肉組織對胰島素的敏感性，另一方面通過其在肝臟的β氧化途徑刺激糖異生，誘導肝糖輸出，并降低肝對胰島素的滅活能力，加重胰島素抵抗，形成惡性循環［10］。該研究中NAFLD組肥胖指標、糖脂參數、HOMA-IR明顯高于對照組，與NAFLD的臨床表現相吻合。

CTRP12作為CTRP家族中的一員，和其他成員類似，擁有Clq/腫瘤壞死因子樣球形結構域，其氨基酸序列與脂聯素同源性為20%［6］。研究表明，CTRP12能夠抑制肝糖異生，促進脂肪細胞糖攝取，改善胰島素抵抗。Enomoto等［6］發現 CTRP12能在胰島素濃度不變的前提下增加肥胖小鼠的糖耐量，改善其胰島素敏感性。該研究還發現肥胖小鼠經CTRP12干預后，其體重下降，脂肪細胞體積較對照組明顯減小。進一步研究表明，CTRP12主要是通過激活PI3K-Akt信號通路，抑制肝糖異生，促進脂肪細胞對葡萄糖攝取。該研究首次發現，NAFLD組血清CTRP12濃度明顯高于對照組，且與血糖、TG、HOMA-IR、肥胖指標有顯著相關性。多元線性回歸分析提示血糖、WC、BMI是CTRP的獨立影響因素。由此可見，CTRP12可能通過改善糖脂代謝及胰島素敏感性，參與NAFLD的病理生理過程。類似于瘦素和脂聯素抵抗，筆者推測CTRP12濃度升高可能是胰島素抵抗發生時的代償作用。

作為一項觀察性實驗，筆者未能觀察CTRP12在NAFLD不同病理階段的變化，并不能明確血清CTRP12和NAFLD發生的因果關系，研究結果需在前瞻性隊列研究及基礎實驗中證實。

綜上所述，脂肪因子CTRP12血清濃度在NAFLD患者中顯著升高，可能在NAFLD發病進程中發揮作用。但具體機制亟待更加深入的研究。