電感耦合等離子體發射光譜法檢測碘海醇原料藥中銅、鐵、鋁含量

朱 瓊 ，嚴家文 ，錢保勇 ，蔡 鵬

（1．江蘇省泰州市食品藥品檢驗所，江蘇 泰州 225300； 2．江蘇省泰州市揚子江藥業集團有限公司，江蘇 泰州 225300）

電感耦合等離子體發射光譜（ICP-OES）法不僅激發能力強、精度好，還具有線性范圍寬、化學干擾少，能同時測定多種元素等優點，是現代分析領域中不可缺少的技術。目前，該技術已廣泛應用于各種樣品中多元素的測定，涉及化工、地礦[1]、食品、醫學環保、農業等領域[2-4]。近年來，隨著分析儀器的發展，ICP-OES也開始應用于藥物分析領域，主要涉及中藥材及成藥中的重金屬檢測[5-7]，化學藥品中的金屬雜質及重金屬形態分析檢測[8]，非金屬元素的測定，生化樣品的檢測，藥物代謝動力學的檢測等。某些藥品中可能含有鎘、汞、鉛等重金屬，這些重金屬很容易在體內蓄積，影響人的新陳代謝和正常的生理功能，同時，重金屬過量還會增加系統癌癥的發生率，并引起免疫力下降等一系列問題。我國是藥品生產大國，隨著我國加入世界貿易組織和人用藥品注冊技術要求國際協調會議（ICH），藥品在國內外需求量日益增大，其質量要求也越來越高，對藥品中重金屬的控制也將成為重中之重。本研究中建立了碘海醇原料藥中銅、鐵、鋁的ICP-OES含量測定方法，并進行了初步方法學驗證，可為其他藥品中銅、鐵、鋁元素的含量測定提供參考。

1 儀器與試藥

儀器：iCAP-7400型電感耦合等離子體發射光譜儀（美國熱電）；Milli-Q型超純水系統（美國Millipore公司）。

試藥：銅標準溶液（批號為14128，質量濃度為1 000 μg/mL），鐵標準溶液（批號為 13101，質量濃度為1 000 μg/mL），鋁標準溶液（批號為 168055-1，質量濃度為1 000 μg/mL），均由中國計量科學研究院提供；鈧標準溶液（批號為 15B053，質量濃度為1 000 μg/mL，國家有色金屬及電子材料分析測試中心）；65%濃硝酸（優級純，德國Merk公司）；碘海醇原料藥（批號分別為12926308，12926302，12926317，揚子江藥業集團）。

2 方法與結果

2.1 測定條件與波長選擇

霧化氣：0．5 L/min；冷卻氣：12 L/min；輔助氣：0．5L/min；等離子體功率：1150W；蠕動泵轉速：50r/min；觀測模式：垂直；重復次數：3次。通過對譜線靈敏度的分析，銅、鐵、鋁在上述分析波長下干擾少，響應強度高，故選擇銅分析譜線波長為324．75 nm，鐵為238．20 nm，鋁為 396．15 nm。

2.2 方法學考察

線性關系考察：精密量取銅、鐵、鋁混合標準溶液（1 000 μg/mL）0．5，1．0，1．5，2．0，3．0 mL，分別置 5 個100 mL容量瓶中，加2%硝酸稀釋成質量濃度為0．25，0．50，1．00，1．50，2．00 μg/mL 的標準系列溶液，以發射信號強度（I）為縱坐標，以質量濃度（C）為橫坐標，繪制銅、鐵、鋁標準曲線，分別得 I銅=3251．8768C＋22．2621（r=0．999 7），I鐵=2 336．331 3C-1．754 2（r=1．000），I鋁=1 392．753 6 C-10．483 4（r=1．000）。

加樣回收試驗：分別精密量取混合標準溶液（100 μg/mL）1．0，0．9，1．0 mL，置 9 個 100 mL 容量瓶中，適量硝酸酸化，加入碘海醇（批號為 12926308）1．5 g，用水稀釋至刻度，進樣測定，并計算回收率。結果見表1。

檢出限（LOD）、定量限（LOQ）確定：銅，取試樣空白進樣測定8次，得標準差（SD）為0．002，線性方程斜率（k）為 3 251．876 8，得出銅 LOD=3× SD/k=1．84 ng/mL，LOQ=6．15 ng/mL。鐵，取試樣空白進樣測定 8次，得SD 為 0．001，線 性 方 程 k 為 2 336．331 3，得 出 鐵LOD=3× SD/k=1．28 ng/mL，LOQ 為 4．28 ng/mL。鋁，取試樣空白進樣測定8次，得 SD為0．008，線性方程k為 1 392．753 6，得出鋁 LOD=3× SD/k=17．23 ng/mL，LOQ 為 57．44 ng/mL。

精密度試驗：取 2．2 項下 1．0 μg/mL 銅、鐵、鋁混合標準溶液，重復測定7次。結果銅、鐵、鋁質量濃度的RSD 分別為 0．31% ，0．62% ，1．23% （n=7），表明儀器精密度良好。

2.3 樣品含量測定

取批號為 12926308，12926302，12926317碘海醇原料藥3．0 g，精密稱定，置100 mL容量瓶中，精密加入鈧標準溶液（1 000 μg/mL）1 mL，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。結果見表2。可見，3批碘海醇原料藥中銅、鐵、鋁含量均合格。

表1 各金屬元素加樣回收試驗結果（n=9）

表2 碘海醇中各金屬含量測定結果（n=3）

3 討論

本研究中建立了碘海醇中銅、鐵、鋁元素的ICP-OES分析方法，并進行了方法學驗證，結果表明，ICP-OES法適用于原料藥質量研究中銅、鐵、鋁含量的測定，方法簡單，可操作性較強，結果準確，靈敏度較高。為化學原料藥中多種金屬元素及常量元素的分析提供參考。碘海醇作為碘海醇注射液的原料藥時，應嚴格控制重金屬的含量，本研究中只針對銅、鐵、鋁的含量進行了測定，在后續研究中還應對其他元素進行測定，保障藥品質量。

本研究中選取鈧作為含量測定的內標溶液。目前最常用的內標元素是鈧、鍺、銦、鉍，選擇跟銅、鐵、鋁相對原子質量相近的鈧，有效消除了基體元素的干擾，提高了靈敏度，降低了檢出限。

ICP光源作為原子發射光譜分析的一種新型高效激發源[2]，由于不同元素的吸收譜線存在干擾，復雜的光譜干擾妨礙了該技術的進一步發展。因此，選擇譜線時要多篩選，建立合理的多元光譜擬合模型，有效校正光譜干擾，盡量選擇干擾少、靈敏度高的譜線。近年來，校正ICP-OES光譜干擾主要有人工神經網絡法、干擾因子校正法。在以后的研究中應進一步探討如何快速準確地扣除光譜干擾，這已成為ICP-OES分析中最大的難題。

由于時間有限，本研究中僅應用了ICP-OES方法，針對碘海醇這一種原料藥進行了銅、鐵、鋁含量的分析，后期可以拓展到其他藥品原料藥及制劑的檢測。另外，主要采用了OES全譜直讀光譜的掃描功能，該功能以后可用于未知樣品可能存在元素的初篩。更重要的是，從初步研究結果推斷，今后HPLC-ICP-OES聯用也可能成為金屬元素形態分析的一種新手段[9]，可有效減少光譜和非光譜干擾，更有利于對人體有害元素的價態進行工藝及有關物質的研究，進而制訂相應質量標準限度，提高藥物的安全性。因此，ICP-OES方法及其拓展應用范圍前景廣泛。

電感耦合等離子體光譜技術經過20年左右的快速發展[10-12]，儀器和技術已經很成熟，在藥物分析領域中取得了很多成果，并在不斷地局部改進和革新，特別是在中藥有害重金屬元素的分析發揮了很大的作用[13-15]，為完善藥品質量標準作出了貢獻。