ADAM-17抑制劑TNF484對肝癌細胞增殖、遷移和侵襲的影響

張東升，周方正，陳 潔，郭思言，聶 龍，李艷梅

肝細胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是一種常見惡性腫瘤，其惡性程度高，臨床診斷往往都已較晚，嚴重威脅著人類的健康，抑制和控制腫瘤的轉移是治療和預防癌癥的主要策略[1,2]。腫瘤的侵襲和轉移是多基因、多步驟相互作用的過程。目前有研究認為細胞外基質降解酶系統：基質金屬蛋白酶家族和去整合素-金屬蛋白酶家族(a disintegrin and metalloproteases，ADAMs)參與了腫瘤侵襲及轉移過程。

ADAM-17被稱為α腫瘤壞死因子轉換酶(tumor necrosis factor-alpha converting enzyme, TACE)，ADAM-17可以剪切脫落雙調蛋白、轉化生長因子等多種表皮生長因子受體的配體，直接間接激活表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor, EGFR)相關通路來影響腫瘤細胞的發生、發展及轉移[3]。許多研究表明，ADAM-17在許多腫瘤中過表達，促進腫瘤細胞的侵襲和轉移過程，提示該基因可能在腫瘤進展中起重要作用，ADAM-17和其他ADAM蛋白酶可能是治療癌癥和其他疾病的潛在靶標[4]。由于其許多家族成員的結構復雜，且在不同的腫瘤中表達不同，對ADAM-17抑制劑的研究尚在早期階段，因此ADAM-17對腫瘤的抑制作用需要進一步研究，這可能使ADAM-17成為新的潛在臨床治療靶點。本研究旨在探討ADAM-17抑制劑TNF484對肝癌細胞增殖、遷移和侵襲的影響。

1 材料與方法

1.1 細胞培養及抑制劑 將人肝癌HepG2細胞株和Bel7402細胞在DMEM培養液(GIBCO，USA)中培養，10%胎牛血清(GIBCO，USA)，在37 ℃，5%CO2和75%濕度的培養箱中，培養液每3 d更換一次。

1.2 細胞活力檢測 將1×104HepG2和Bel7402細胞懸浮在96孔板中的每個孔中，加入不同濃度的抑制劑，在37 ℃培養箱中孵育72 h，正常細胞為陰性對照。孵育后，每孔加入20 μl MTT溶液(5 mg/ml)，繼續培養4 h。……