GDF 11改善老齡鼠內皮依賴性血管舒張功能的實驗研究

劉 婷，張承英，蘇靜克，韓 寧，朱 彪

動脈硬化是一類以血管管壁增厚變硬、彈性減弱和管腔縮小為特征的疾病，它嚴重威脅著人類的健康。該病變從血管內膜起始，內皮細胞是抵御病變發生的第一道防線，而內皮依賴性血管舒張功能紊亂則是本病發生的一個早期標志[1, 2]。臨床發現，年齡是該病發生、發展的一個獨立危險因素，近90%的動脈硬化和冠狀動脈硬化性心臟病發生在55歲以上的老年人[3]。 GDF 11是一種能抵抗衰老的細胞因子，屬于轉化生長因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)超家族成員[4]。最近有研究表明，通過腹腔注射重組GDF 11，能夠促進老齡小鼠腦血管內皮細胞增殖，進而增加腦血管容積、增大血流量，從而使腦血管“返老還童”[5]。動脈硬化亦屬于衰老相關性疾病，本研究探討GDF 11對老齡小鼠內皮依賴性血管舒張功能的影響，以期為臨床上治療動脈硬化提供新靶點。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑 選擇18個月齡雄性SPF級C57BL/6J小鼠20只，購自軍事醫學科學院實驗動物中心。重組人GDF 11(Pepro Tech，美國)；去甲腎上腺素(norepinephrine，NE)、乙酰膽堿(acetylcholine，Ach)、硝普鈉(sodium nitroprusside，SNP)[Sigma，美國]；脂聯素(adiponectin)ELISA試劑盒(R&D，美國)；Krebs液自行配制(2.0 L三蒸水中加入氯化鈉13.5 g，氯化鉀685.4 mg，磷酸鎂278.4 mg，磷酸二氫鈉278.4 mg，碳酸氫鈉3.7 g，氯化鈣555.0 mg和葡萄糖4.0 g)；一抗[兔抗人單克隆Smad2/3，磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)抗體]、二抗[山羊抗兔單克隆抗體(辣根過氧化物酶標記)](CST，美國)；BCA測定試劑盒(南京建成，中國)；PVDF膜(Millipore，美國)。

BL-420S型生物信號采集系統、JH-2型張力換能器與HV-4恒溫灌流系統(成都泰盟，中國)；7600-020型全自動生化分析儀(日本日立公司)；340型酶標儀(BDSL，英國)；DYY-7C型電泳儀、DYCZ-40型轉膜儀(北京六一，中國)。……