試析高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

高姍姍

【摘 要】高效液相色譜法是一種有效的分離分析技術(shù)方法，在藥品檢驗(yàn)領(lǐng)域中凸顯出應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。隨著檢測(cè)器自動(dòng)化程度的不斷提高，分離模式的日益增多，以及聯(lián)用技術(shù)的出現(xiàn)，勢(shì)必會(huì)推動(dòng)高效液相色譜法的快速發(fā)展，使其成為藥品檢驗(yàn)中的主流色譜分析方法，從而提高藥品檢測(cè)結(jié)果的可靠性，為加強(qiáng)藥品質(zhì)量控制提供有力依據(jù)。本文主要分析了高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】高效液相色譜法；藥品檢驗(yàn)；應(yīng)用

高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中迅速發(fā)展起來(lái)，現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)展成為了一種比較主流的藥品質(zhì)量控制方法。高效液相色譜法是從經(jīng)典液相色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展出來(lái)的一種效率更高、效果更好的色譜方法。這種方法采用了顆粒更細(xì)的均勻規(guī)則的固定相，傳質(zhì)阻抗小，分離效率高。同時(shí)，這種方法輸送流動(dòng)相使用了高壓輸送泵，分析所需時(shí)間更短，采用了靈敏度更高的檢測(cè)器，獲得了更高的靈敏度，為高效液相色譜法的發(fā)展帶來(lái)了更大的空間。

一、高效液相色譜法概念和特點(diǎn)

（一）高效液相色譜法概念

高效液相色譜法又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。

（二）高效液相色譜法特點(diǎn)

一，高速：分析速度快、載液流速快，較經(jīng)典液體色譜法速度快得多，通常分析一個(gè)樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成，一般小于1小時(shí)。二，高壓：流動(dòng)相為液體，流經(jīng)色譜柱時(shí)，受到的阻力較大，為了能迅速通過(guò)色譜柱，必須對(duì)載液加高壓。三，高效：分離效能高。可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到最佳分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。四，高靈敏度：紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng，進(jìn)樣量在μL數(shù)量級(jí)。五，應(yīng)用范圍廣：百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢(shì)。六，柱子可反復(fù)使用：用一根柱子可分離不同化合物；七，樣品量少、容易回收：樣品經(jīng)過(guò)色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。此外高效液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點(diǎn)，但也有缺點(diǎn)，與氣相色譜相比各有所長(zhǎng)，相互補(bǔ)充。

二、高效液相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

（一）高效液相色譜法在測(cè)定藥品含量中的應(yīng)用

在測(cè)定實(shí)驗(yàn)原料中各組分、各雜質(zhì)的含量時(shí)，可應(yīng)用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定，獲取更加可靠、準(zhǔn)確、快速的檢驗(yàn)結(jié)果。如，在螺旋霉素發(fā)酵液中有機(jī)酸含量的測(cè)定中，可應(yīng)用高效液相色譜法測(cè)定有機(jī)酸的種類，為分析螺旋霉素代謝機(jī)制奠定基礎(chǔ)；在測(cè)定鹽酸萘甲唑啉鼻用劑型凝膠中的鹽酸萘甲唑啉含量中，應(yīng)用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定，采用乙腈將高分子物質(zhì)從凝膠基質(zhì)中析出，可有效解決高分子物質(zhì)堵塞液相柱的問(wèn)題，減少測(cè)定的干擾因素；在四環(huán)素類抗生素的測(cè)定中，可應(yīng)用高效液相色譜法對(duì)四環(huán)素類抗生素及其立體異構(gòu)體進(jìn)行分離測(cè)定；在吡羅昔康含量的測(cè)定中，由于該藥物是一種酰胺類化合物，容易被氧化和水解，導(dǎo)致其水溶液的化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，所以可應(yīng)用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定。在實(shí)際操作中，溶劑選用0.01mol/L的鹽酸甲醇溶液，既可以增強(qiáng)溶劑的溶解性，又可以增加吡羅昔康溶液的穩(wěn)定性，保證了檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量；由此可見(jiàn)，利用高效液相色譜法對(duì)藥品進(jìn)行樣品抽檢，能夠準(zhǔn)確檢測(cè)到原料藥、中間體、各組分、各雜質(zhì)的含量，杜絕假冒偽劣藥品的流通，從而保證藥品質(zhì)量和安全。

（二）高效液相色譜法在檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)中的應(yīng)用

由于藥品的生產(chǎn)需要經(jīng)歷多個(gè)環(huán)節(jié)，因此，藥品在不同的環(huán)節(jié)都有可能帶入雜質(zhì)。隨著我國(guó)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的不斷提高，為了保障藥品的安全，對(duì)藥品中的有關(guān)物質(zhì)檢驗(yàn)要求也越來(lái)越高，要求檢驗(yàn)有關(guān)物質(zhì)的藥品品種大幅增加。但由于這些有關(guān)物質(zhì)的含量較低，難以通過(guò)傳統(tǒng)的色譜分析方法進(jìn)行檢測(cè)。例如，在對(duì)13批卡托普利片有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)時(shí)，傳統(tǒng)檢測(cè)方法的檢出率也同樣小于采用高效液相色譜法檢出率，且高效液相色譜法的檢測(cè)較為便利，因此，對(duì)于藥物的日常檢測(cè)具有較為明顯的優(yōu)勢(shì)。

（三）高效液相色譜法在藥物鑒別中的應(yīng)用

運(yùn)用高效液相色譜法法鑒別藥物，可通過(guò)保留時(shí)間與組分結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，將其作為藥物定性的參數(shù)。如，在南北五味子的鑒別中，運(yùn)用高效液相色譜法法對(duì)兩種五味子中組分含量進(jìn)行測(cè)定，采用C18柱，流動(dòng)相為配比是65：35的甲醇-水，流速控制在每分鐘1.0mL，檢測(cè)波長(zhǎng)控制在250nm，能夠快速鑒別出南北五味子的組分含量。因此，將高效液相色譜法法應(yīng)用在藥物鑒別中，能夠開(kāi)辟藥物鑒別的新方法和新思路。

（四）高效液相色譜法在檢驗(yàn)抗生素藥品中的應(yīng)用

對(duì)于抗生素含量的檢測(cè)，高效液相色譜法檢測(cè)主要體現(xiàn)在三方面：一，對(duì)非抗生素藥物中抗生素含量的檢測(cè)，有效地防止抗生素的濫用。目前，我國(guó)對(duì)于抗生素使用具有嚴(yán)格的限制，因抗生素易使人體對(duì)其產(chǎn)生一定的耐藥性，不利于患者自身疾病的治療，為了有效的避免抗生素的濫用對(duì)于人或動(dòng)物產(chǎn)生過(guò)度的耐藥，必須嚴(yán)格限制使用。通過(guò)高效液相色譜法檢測(cè)技術(shù)，可以有效地檢測(cè)各類藥物當(dāng)中抗生素的含量，將其控制在合理范圍之內(nèi)，這樣就能更好地控制抗生素的使用；二，有效的檢測(cè)動(dòng)物性食品中抗生素的含量，可有效防止抗生素的濫用。此外，高效液相色譜檢測(cè)技術(shù)也被廣泛應(yīng)用到對(duì)于動(dòng)物性食品的檢測(cè)中，通過(guò)對(duì)這種技術(shù)的應(yīng)用可有效地檢測(cè)出動(dòng)物性食品當(dāng)中抗生素的殘留量，有效避免了人使用了含有抗生素的肉蛋白和奶質(zhì)品后，攝入了一定的抗生素，從而使得人體對(duì)抗生素產(chǎn)生了耐藥性；三，對(duì)抗生素藥物當(dāng)中的雜質(zhì)進(jìn)行限制，有效確保抗生素的藥效達(dá)標(biāo)。通過(guò)高效液相色譜檢測(cè)技術(shù)能夠更好地對(duì)抗生素藥物進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)雜質(zhì)的限量進(jìn)行控制，也具有較為重要的意義。臨床上采用抗生素對(duì)于其所存在的不良反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)，分析主要原因，這是因原料中的中間體和降解產(chǎn)物，特別是聚合物而引起藥物使用者會(huì)出現(xiàn)不良反應(yīng)，且有時(shí)會(huì)產(chǎn)生非常嚴(yán)重的后果，甚至?xí)?duì)患者的生命安全產(chǎn)生較嚴(yán)重的威脅。

（五）高效液相色譜法在檢測(cè)中藥質(zhì)量中的應(yīng)用

中藥成分的特點(diǎn)呈多樣化和復(fù)雜性，這給分析中藥成分帶來(lái)了重重阻力，中藥所含成分既多又復(fù)雜，只有各成分之間組合得當(dāng)，才能發(fā)揮療效。高效液相色譜法的出現(xiàn)，能夠?qū)⒅兴幹懈鞒煞只虼郎y(cè)成分與其他雜質(zhì)進(jìn)行有效地、快速地脫軌、剝離，進(jìn)而把中藥中所含成分搞得清清楚楚。

三、結(jié)束語(yǔ)

高效液相色譜法能夠有效、準(zhǔn)確、高效率的進(jìn)行藥品含量的測(cè)定，還能夠進(jìn)行藥品相關(guān)物質(zhì)的檢查，對(duì)非法違禁成分擋風(fēng)監(jiān)控和抗生素進(jìn)行檢測(cè)。高效液相色譜法有著較高的抗干擾能力，對(duì)成分復(fù)雜的中藥以及以中藥為基礎(chǔ)的保健品中的違禁品的測(cè)量效果良好，對(duì)規(guī)范保健品市場(chǎng)有著重要的意義。

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