奧氮平含量的HPLC法測定

劉紅霞　張國哲

摘 要 目的：利用高效液相色譜法測定奧氮平片中奧氮平含量。方法：采用C8色譜柱，流動相為十二烷基硫酸鈉12g-乙腈，流速為1.5ml/min，檢測波長260nm建立色譜方法測定奧氮平含量。結果：奧氮平濃度在60 g/ml～140 g/ml范圍內，其峰面積（Y）與濃度（X）呈良好的線性關系，線性方程為Y=59133X+25872，R=1.000；其穩定性、重復性、精密度試驗均RSD<2.0。結論：該方法操作簡便、結果準確、靈敏度高、重復性好，可用于測定奧氮平含量。

關鍵詞 奧氮平 含量 高效液相色譜

中圖分類號：R927 文獻標識碼：A DOI：10.16400/j.cnki.kjdkx.2018.04.069

Determination of Olanzapine Content by HPLC

LIU Hongxia， ZHANG Guozhe

（Jiangsu Vocational College of Medicine， Yancheng， Jiangsu 224005）

Abstract Objective： to determine the content of olanzapine in olanzapine by HPLC. Methods： using C8 chromatographic column， the flow phase was 12g-acetonitrile with sodium dodecyl sulfate， and the flow rate was 1.5ml/min， and the detection wavelength of 260nm was established to determine the content of olanzapine. Results： the concentration of olanzapine was in the range of 60 mu g/ml ～140 mu g/ml， and its peak area（Y） was in good linear relation with concentration（X）.The linear equation was Y=59133X+25872，R=1.000.Its stability， repeatability and precision test are all RSD<2.0.Conclusion：the method is simple， accurate， sensitive and reproducibility， and can be used to determine the content of olanzapine.

Keywords olanzapine； content； high performance liquid chromatography

奧氮平（結構如圖1）的化學名為2-甲基-4-（4-甲基-1-哌嗪基-）-10H-噻吩并[2，3-6][1，5]苯并二氮雜，有一定的抗精神病作用，可改善精神分裂癥和其它有嚴重陽性癥狀（如：妄想、幻覺、思維障礙、敵意和猜疑）的精神病，同時也對陰性癥狀（如：情感淡漠、情感和社會退縮、言語貧乏）的急性期和維持治療有部分效果。試驗表明其治療作用顯著且副作用低，尤其是錐體外系反應和遲發性運動障礙發生率很低，廣泛用于多種精神疾病的治療。

關于奧氮平藥理作用的報道常見于文獻，但關于其含量的測定并不多，中國藥典也未收錄該藥物，因此缺乏相應的藥品標準。本實驗參加美國藥典對于奧氮平片含量的測定方法，擬采用HPLC法進行含量測定。

1 材料

1.1 儀器

LC-2010AT島津高效液相色譜儀，LC Solution色譜數據工作站；KQ-3000型數控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；BS21S型十萬分之一電子天平（德國Sartorius）。

1.2 藥品與試劑

奧氮平（110302，江蘇萬特制藥）；奧氮平對照品（100948-200801，中國藥品生物制品檢定所），雜質A（20110201，臺州市華鼎化工）；乙腈為色譜純，其余試劑為分析純，水為超純水。

2 方法和結果

2.1 色譜條件

以辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以磷酸鹽緩沖液-乙腈（50：50）為流動相；流速為每分鐘1.5ml；檢測波長為260nm。

2.2 溶液的制備

（1）磷酸鹽緩沖液：稱取磷酸二氫鈉6.9g，加水1000ml使溶解，用磷酸試液調pH至2.5，再加十二烷基硫酸鈉12g。

（2）對照品溶液：取奧氮平對照品25 mg，精密稱定，置于25ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，量取各溶液1ml分別置于10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。

（3）供試品溶液：取奧氮平樣品25mg，配制方法痛對照品溶液

說明：筆者在奧氮平有關物質方法學驗證過程中，驗證了奧氮平起始物、奧氮平雜質A（結構如圖2）與奧氮平雜質B三種物質，其中奧氮平起始物和奧氮平雜質B均未測出，為了防止奧氮平雜質A對奧氮平含量測定時對其含量產生影響，故奧氮平含量方法學驗證實驗中加入奧氮平雜質A，考察其影響。

2.3 系統適用性試驗

取奧氮平對照品25 mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻；雜質A貯備液：取雜質A25mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，量取該溶液1ml至10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻；量取奧氮平貯備液與雜質A貯備液各1ml，置同一10ml量瓶中，加流動相定容至刻度，搖勻；同法配制6份。精密量取系統適用性溶液各20l，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖（見圖3）。

結果：6份相同濃度的系統適用性溶液主峰峰面積RSD值為0.1%小于2.0%，主峰保留時間RSD值為0.79%小于1.0%；奧氮平與雜質A的分離度大于2.0，理論塔板數按奧氮平計算高于3000，奧氮平峰的拖尾因子在0.8～1.5范圍內，系統適用性好。

2.4 精密度試驗

精密量取供試品溶液20l，注入液相色譜儀，重復進樣6次，記錄色譜圖，計算主峰面積RSD值，6次進樣奧氮平峰面積的RSD值為0.26，小于2.0%，精密度良好，結果見表1。

2.5 溶液穩定性試驗

將供試品溶液在室溫條件下放置，分別于0h、2h、4h、6h、8h、10h精密量取供試品溶液20 l注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算主峰面積的RSD值。結果： 10h內，主峰面積的RSD值為0.12%，小于2.0%；說明在室溫下，本品含量測定供試品溶液室溫放置10h內穩定。

2.6 重復性試驗

同法配置供試品溶液六份，對照品溶液兩份，精密量取各溶液20 l注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算奧氮平含量。結果：按外標法以峰面積計算得到的六份奧氮平樣品含量的RSD值為0.051%，小于2.0%，重復性良好。

2.7線性關系考察

取奧氮平樣品約20mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取該貯備液3ml、4 ml、5 ml、6 ml、7 ml分別置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度為60g/ml、80g/ml、100g/ml、120g/ml、140g/ml系列濃度的溶液。精密量取供試品溶液各20l注入液相色譜儀，每個濃度點平行進兩針，記錄色譜圖；以樣品濃度為橫坐標（X），主峰峰面積的平均值為縱坐標（Y），進行線性回歸分析，奧氮平濃度在60 g/ml～140 g/ml范圍內，濃度（X）與奧氮平峰面積（Y）呈良好的線性關系R=1.0000。結果見表2。

2.8 樣品含量測定

取3批樣品各適量，分別按照2.2項下方法制備供試品溶液，再按照2.1項下色譜條件進樣測定，外標法計算樣品含量，結果見表3。

3 討論

本實驗結合著文獻及藥典的報道，形成了一種簡單的奧氮平的HPLC含量測定法，筆者最初考慮的奧氮平雜質A在本方法中不影響奧氮平含量的測定，此奧氮平方法學驗證結果表明該方法重復性好、靈敏度高、專屬性強，適合奧氮平的含量測定。

課題名稱：酒精性肝病的診斷標記物挖掘及中藥葛根葛花的防治作用研究（項目：江蘇省衛計委2017指導性課題，項目編號：Z2017017）

參考文獻

[1] 王琴.高效液相色譜法測定奧氮平原料藥及其中間體的含量[A].甘肅省化學會.甘肅省化學會第二十八屆年會暨第十屆中學化學教學經驗交流會論文集[C].甘肅省化學會，2013：6.

[2] 黃坤，郭慶東，謝芳，王增明，郭嘉，梅興國.高效液相色譜法測定奧氮平的含量[J].武漢工程大學學報，2012.34（4）：11-14+68.

[3] 袁月華.HPLC法測定奧氮平片含量[J].海峽藥學，2013.25（12）：129-130.

[4] 瞿發林，過偉，陳穎，欒忠婷，陳方斌，戴冬梅，何益民.HPLC法同時測定人血漿中氯氮平和奧氮平濃度[J]. 解放軍藥學學報，2015.31（3）：220-223.

[5] 李娜，許秀峰.奧氮平的藥理學和臨床應用[J].云南醫藥，2004（6）：520-524.

[6] 杜蓉，任力，方松.HPLC同時測定復方氟西汀奧氮平膠囊中藥物含量[J].中國藥師，2016.19（10）：1975-1977.

[7] 魏娟，謝江濤，武興興，張濤.奧氮平治療對改善老年癡呆精神行為障礙的臨床療效分析[J].國際精神病學雜志，2015.42（6）：41-44.

[8] 朱冉旭.奧氮平片在老年精神科中的應用[J].中國醫藥指南，2017（31）：185-186.

[9] 董孟君，陳瑩.奧氮平對首發精神分裂癥患者肝臟脂肪含量的影響[J].神經損傷與功能重建，2015.10（3）：266-267.

[10] 夏學軍，陶忠華.奧氮平及其片劑的HPLC測定[J].中國醫藥工業雜志，2004（1）：52-54.