泛素特異肽酶3作為膀胱癌新型預后標記物的研究

尤洪科 尹永華 文博

1廣州醫科大學附屬深圳沙井醫院泌尿外科 518104 廣東深圳

膀胱癌(bladder cancer)在我國發病率遠高于前列腺癌和腎癌，位于泌尿生殖系統腫瘤第一位[1]。針對膀胱癌的分子預后研究可以進一步制定腫瘤的個體化治療和隨訪監測方案。然而，由于既往腫瘤分子預后研究需要大樣本量的腫瘤標本進行檢測，工作量大、時間長而且研究成本非常高，因此，目前臨床上能用于判斷膀胱癌預后的生物標記物比較少。生物信息學是近年來非常熱門的研究工具，結合龐大且可信度高的基因檢測和腫瘤信息數據庫，為探索膀胱癌預后分子標記提供了極大的方便[2, 3]。

泛素特異肽酶3(ubiquitin specific peptidase 3, USP3)最早于1999年被發現，基因定位于人類染色體15q22.3，分子量為59 kd，它也是目前已知的第二個能夠裂解泛素-脯氨酸結合的泛素特異蛋白酶，維持基因組的穩定性[4, 5]。研究表明，USP3可以通過去泛素化調節目的蛋白的表達水平，與腫瘤的發生發展密切相關[6, 7]。然而，到目前為止關于USP3在膀胱癌中的表達和作用尚未見相關研究報道。本課題首先運用Oncomine數據庫比較USP3基因在正常膀胱組織和膀胱癌中的差異性表達，并利用免疫印跡試驗、定量PCR和免疫組化進行驗證，結合美國癌癥基因組圖譜(TCGA)數據，分析USP3預測膀胱癌預后的作用以及作用機制，為后續研究提供基礎。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

人膀胱癌細胞系T24和J82以及人正常尿路上皮細胞SV-HUC-1購自中國科學院上海典型培養物保藏中心。胎牛血清、Opti-DMEM高糖無血清培養基購自美國Gibco公司；……