糖尿病自身免疫抗體聯(lián)合檢測在糖尿病分型中的應(yīng)用研究

林駿 徐良 劉堯

[摘要] 目的 探討糖尿病（DM）自身免疫抗體在糖尿病分型中的診斷意義。方法 選取該院2017年6—12月期間收集的169例糖尿病臨床血清樣本，其中包括T1DM臨床樣本42例，T2DM2臨床樣本127例，選取同期100例非糖尿病臨床血清樣本作為對照。采用免疫印跡法檢測入選者的GADA（谷氨酸脫羧酶抗體）、IAA（胰島素自身抗體）、ICA（抗胰島素細(xì)胞抗體），同時分析不同病程及不同性別的DM患者抗體檢測的陽性率，探討DM自身免疫抗體聯(lián)合檢測在DM診斷、分型中的意義。結(jié)果 T1DM臨床樣本GADA、ICA、IAA檢測陽性率明顯高于T2DM臨床樣本和非DM臨床樣本（P<0.05）；GADA、ICA、IAA 3種抗體聯(lián)合檢測的陽性率高于單一抗體檢出陽性率（P<0.05）。結(jié)論 GADA、IAA、ICA聯(lián)合檢測在DM的診斷和DM的分型中具有重要價值，聯(lián)合檢測可進(jìn)一步提高陽性率，減少漏診，提高DM的診斷敏感性和特異性。

[關(guān)鍵詞] 糖尿病；自身免疫抗體；糖尿病分型；診斷

[中圖分類號] R587.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1672-4062（2018）02（b）-0052-02

糖尿病（Diabetes Mellitus，DM）是一組以高血糖為特征的代謝性疾病，造成高血糖的原因多與胰島素分泌缺陷、胰島素生物作用受損所致，或兩者兼有[1]。臨床可根據(jù)DM的臨床表現(xiàn)主要分為Ⅰ型糖尿病（T1DM）和2型糖尿病（T2DM）兩類，前者是因患者自身免疫系統(tǒng)損傷了胰島β細(xì)胞，導(dǎo)致胰島素合成、分泌減少、完全喪失；后者胰島素雖有產(chǎn)生，但因其作用較差，導(dǎo)致了胰島素的相對缺乏，確切來說，T2DM是一種異質(zhì)情況。由于T1DM和T2DM患者的病因存在本質(zhì)的區(qū)別，因此，明確DM分型對疾病的預(yù)防和治療具有重要意義。DM患者處于無癥狀期和發(fā)病后的一段時間內(nèi)可檢出多種血清胰島素抗體，如GADA、ICA、IAA，通過聯(lián)合檢測上述3項血清胰島素抗體，可評估T1DM的發(fā)病進(jìn)程，并鑒別DM的分型[2]。為探討DM自身免疫抗體聯(lián)合檢測在DM分型中的臨床價值，該研究采用免疫印跡法對該院2017年6—12月收集的169例糖尿病臨床血清樣本和100例非糖尿病臨床血清樣本進(jìn)行對比研究，現(xiàn)將結(jié)果匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院糖尿病臨床血清樣本，其中T1DM臨床血清樣本42例，包括男性23例，女性19例；年齡范圍11～64歲，中位年齡（37.5±3.6）歲。T2DM臨床血清樣本127例，包括男性69例，女性58例；年齡范圍14～71歲，中位年齡（42.5±3.3）歲。選取同期100例非糖尿病臨床血清樣本作為對照，其中包括男性55例，女性45例；年齡范圍10～66歲，中位年齡（38.0±3.4）歲。T1DM、T2DM、非DM患者的年齡、性別資料相仿，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。

入選標(biāo)準(zhǔn)：DM患者符合中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)會中T1DM、T2DM的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 檢測方法

選取標(biāo)本：所有研究臨床樣本為靜脈血3 mL，置試管待凝固后離分離血清，分離血清后，血清樣本存于-20℃的冰箱中待檢。

檢測試劑：所用試劑為深圳市伯勞特生物制品有限公司生產(chǎn)的糖尿病自身抗體免疫印跡試劑盒（免疫印跡法）。

檢測方法：采用免疫印跡法檢測研究對象的GADA、ICA、IAA，所有操作步驟均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 評判標(biāo)準(zhǔn)

將試驗后免疫印跡膜上起始線與試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)帶起始線對齊，觀察免疫印跡膜上面顯色位置的陽性條帶與試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)帶上面各種糖尿病自身免疫抗體的標(biāo)示位置，即可判斷GADA、ICA、IAA的陰陽性并區(qū)分為何種自身免疫抗體陽性。

1.4 統(tǒng)計方法

研究數(shù)據(jù)納入SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以百分率（%）描述計數(shù)資料，經(jīng)χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

DM患者與非DM患者GADA、ICA、IAA檢測陽性率比較，T1DM患者GADA、ICA、IAA檢測陽性率明顯高于T2DM患者和非DM患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；T2DM患者GADA、ICA、IAA檢測陽性率明顯高于非DM患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；DM患者中，GADA、ICA、IAA三種抗體檢測的陽性率比較，GADA最高，ICA其次，IAA相對較低，聯(lián)合檢測的陽性率顯著高于單項檢測的陽性率，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）

3 討論

DM屬代謝性疾病，其典型臨床癥狀表現(xiàn)為高血糖，其病因復(fù)雜，包括自身免疫、遺傳、病毒感染及接觸有毒物質(zhì)等，可引起眼、血管、神經(jīng)、心臟、腎的慢性損傷及功能障礙，還可能誘發(fā)各種并發(fā)癥。臨床可根據(jù)患者臨床表現(xiàn)分為T1DM和T2DM，T1DM是因自身免疫系統(tǒng)功能紊亂引起胰島素β細(xì)胞功能受損，從而導(dǎo)致胰島素合成、分泌減少、完全缺乏；T2DM則是以胰島素抵抗為主，并伴有胰島素分泌不足。由于兩種類型的DM病因具有本質(zhì)區(qū)別，因此，在治療方式上也存在一定差異，所以對DM患者進(jìn)行準(zhǔn)確分型對臨床制定治療方案具有指導(dǎo)意義。研究指出，T1DM患者的外周血中含有GADA、ICA、IAA胰島β自身免疫抗體，通過檢測以上指標(biāo)有助于診斷T1DM，且能與T2DM進(jìn)行鑒別診斷[3]。

GADA是T1DM的標(biāo)志性抗體，可用于緩進(jìn)型、隱匿性T1DM的診斷及鑒別診斷。GADA是最早出現(xiàn)在T1DM患者體內(nèi)的免疫抗體，甚至早于臨床癥狀出現(xiàn)前。有關(guān)研究指出，GADA在T1DM發(fā)病早期的陽性率為38%～76%，在I級親屬中，陽性率高達(dá)78%～81%，其中大部分為GADA65，GADA67的分布較少，而GADA在T2DM中陽性率為0%～4%[4]。而在該研究當(dāng)中，GADA在T1DM中的陽性檢出率為61.90%，而在T2DM中的陽性檢出率為25.98%，其結(jié)果與上述結(jié)果相符。無論是在T1DM還是T2DM患者中，GADA的陽性檢出率均顯著高于非DM患者，說明GADA是早期診斷T1DM的免疫抗體，還有助于鑒別DM類型。

ICA屬于器官特異性抗體，抗原為微粒體組分或胰島細(xì)胞漿，是胰島細(xì)胞中β細(xì)胞損傷的標(biāo)志物。ICA在DM的發(fā)病機(jī)制中起到了重要作用，該抗體主要針對胰島自身的免疫細(xì)胞，一旦胰島細(xì)胞抗體與胰島細(xì)胞表面抗原結(jié)合后，就會引起免疫反應(yīng)，使補(bǔ)體系統(tǒng)被激活，隨即誘導(dǎo)細(xì)胞溶解和死亡，從而誘發(fā)DM[5]。T1DM的初診患者中，80%的患者檢出ICA呈陽性，隨著病程延長，ICA陽性率會逐步下降，而在本研究當(dāng)中，T1DM患者ICA陽性檢出率為46.15%，而ICA在T2DM中的陽性檢出率為16.54%，兩者之間，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，說明ICA可用于DM的分型診斷。

IAA是能夠與胰島素結(jié)合的一種抗體，該抗體的出現(xiàn)有兩種情況，一種是接受外源性胰島素治療的患者，另一種則使出現(xiàn)在從未接受過胰島素治療的患者中。從本研究結(jié)果來看，在T1DM和T2DM患者中，GAGD和ICA的陽性率均高于IAA，且IAA的陽性檢出率并不高，且在非DM者中，仍有1%的檢出率，說明IAA并不是DM患者的特異性抗體。通過對比聯(lián)合檢測和單一檢測的陽性率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，GADA+ICA+IAA的陽性檢出率在T1DM中高達(dá)90.48%，而在T2DM中聯(lián)合檢測陽性率為36.22%，且存在明顯差異；另一方面，通過比較單一檢測GADA、ICA、IAA的陽性率，結(jié)果提示，GADA陽性率高于ICA，而ICA陽性率高于IAA，說明聯(lián)合檢測的陽性率最高，而單項檢測的漏診率高，聯(lián)合檢測可顯著提高T1DM的診斷敏感性及特異性。

綜上所述，GADA、IAA、ICA聯(lián)合檢測在DM的診斷和DM的分型中具有重要價值，聯(lián)合檢測可進(jìn)一步提高陽性率，減少漏診，提高DM的診斷敏感性和特異性。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 池蓮祥，聶本遂，劉香萍，等.GADA、ICA、IAA及IA-2測定在糖尿病診斷分型中的意義[J].中國實驗診斷學(xué)，2005，9（3）：406-408.

[2] 武傳龍，王寶燕，劉方達(dá).GAD-Ab、ICA、IAA聯(lián)合檢測對糖尿病臨床分型的鑒別意義[J].山東醫(yī)藥，2007，47（16）：91-92.

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[4] 楊秉潛.胰島自身抗體檢測在糖尿病分型診斷中的價值[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（20）：2741-2742.

[5] 周淑杰，李輝，高申，等.胰島素自身抗體的聯(lián)合檢測在糖尿病分型中的診斷意義[J].中國實驗診斷學(xué)，2013，17（1）：146-147.

（收稿日期：2018-01-19）