嚴重燒傷并發多器官功能障礙綜合征患者高遷移率族蛋白B1的水平變化及臨床意義分析

李 崢

(四川省人民醫院，四川 成都 610072)

高遷移率族蛋白B1(HMGB1)為細胞內廣泛存在的一種DNA結合蛋白，能夠由巨噬細胞、單核細胞等通過囊泡介導的分泌通路分泌到細胞外[1]。相關研究報道，細胞外的HMGB1是炎癥因子之一，可以選擇性地與Toll受體、糖基化終末產物受體等多種受體相結合，激活內皮細胞、T細胞、樹突細胞、表皮細胞、成纖維細胞以及自然殺傷細胞等，導致趨化因子、炎性因子等多種細胞因子的產生，參與免疫、炎癥等相關疾病的發生發展過程[2-3]。亦有研究指出，HMGB1參與了燒傷后患者多器官功能障礙綜合征(MODS)、膿毒癥的病理過程，有可能成為改善患者預后的一個重要干預靶標[4]。本研究探討了嚴重燒傷并發MODS患者血清HMGB1水平的變化，并分析了HMGB1與患者細胞免疫功能的關系。現將結果報道如下。

1 臨床資料

1.1一般資料 選取醫院2014年1月—2017年1月收治的46例嚴重燒傷患者作為研究對象，年齡均在18歲以上，燒傷面積均在30%以上，受傷之前均無嚴重心、肝、腎等臟器疾患。MODS的診斷參照Marshall標準進行[5]：①循環功能衰竭，收縮壓在12 kPa，且持續時間在1 h以上或者需要應用血管活性類藥物以維持血壓；②中樞神經系統功能衰竭，哥斯拉昏迷評分在7分以下；③胃腸功能衰竭：出現明顯上消化道出血，且24 h出血量在400 mL以上；④肝功能衰竭，谷丙轉氨酶高于正常值2倍，膽紅素>34.2 μmol/L；⑤腎衰竭，血肌酐>176.8 μmol/L；⑥呼吸系統衰竭，氧合指數<200 mmHg，肺動脈楔壓<2.4 kPa，X射線胸片可見雙肺存在斑片狀陰影。46例患者中，男34例，女12例；年齡20～65(39.29±8.47)歲；并發MODS 17例，無MODS 29例。根據是否并發MODS分為MODS組和無MODS組，MODS組男13例，女4例；年齡21～63(39.06±8.51)歲；燒傷面積35%～90%。無MODS組男21例，女8例；年齡20～65(39.67±8.79)歲；燒傷面積32%～93%。2組患者性別、年齡、燒傷面積比較差異均無統計學意義(P均>0.05)。選取同時期門診健康體檢者40例作為對照組，男24例，女16例；年齡20～65(40.12±8.61)歲。本研究經醫院倫理委員會研究同意，并與患者及家屬簽署知情同意書。

1.2方法 分別于傷后第1，3，5，7，14天抽取患者空腹靜脈血5 mL，對照組則于體檢時抽取空腹靜脈血5 mL，抗凝后以2 500 r/min離心，離心20 min后提取血清，放置于-20 ℃ 冰箱中保存待檢。采用酶聯免疫吸附試驗法測定HMGB1水平，試劑盒購自美國R&D公司，嚴格按參照試劑盒說明進行操作。采用噻唑藍法測定T淋巴細胞增殖活性，酶標儀為美國Bio-Rad伯樂-680型全自動酶標儀。通過美國BD公司生產流式細胞儀及其熒光標記抗體測定受試者的CD4+、CD8+，計算CD4+/CD8+比值。

2 結 果

2.13組血清HMGB1、T淋巴細胞增殖活性及CD4+/CD8+比較 3組間血清HMGB1、T淋巴細胞增殖活性及CD4+/CD8+均存在明顯差異(P均<0.05)；MODS組、無MODS組血清HMGB1水平均明顯高于對照組(P均<0.05)，T淋巴細胞增殖活性、CD4+/CD8+均明顯低于對照組(P均<0.05)；MODS組血清HMGB1水平明顯高于無MODS組(P<0.05)，T淋巴細胞增殖活性、CD4+/CD8+均明顯低于MODS組(P均<0.05)。見表1。

表1 3組血清HMGB1、T淋巴細胞增殖活性及CD4+/CD8+比較

注：①與對照組比較，P<0.05；②與MODS組比較，P<0.05。

2.2患者組不同時間點血清HMGB1水平比較患者組傷后第3天血清HMGB1水平均明顯高于第1天(P<0.05)；MODS組傷后第1，3，5，7，14天血清HMGB1水平均明顯高于無MODS組(P均<0.05)。見表2。

表2 患者組不同時間點血清HMGB1水平比較

注：①與第1天比較，P<0.05。

2.3患者組不同時間點T淋巴細胞增殖活性比較患者組傷后第3天T淋巴細胞增殖活性均明顯低于第1天(P均<0.05)；MODS組傷后第1，3，5，7，14天T淋巴細胞增殖活性均明顯低于無MODS組(P均<0.05)。見表3。

2.4患者組不同時間點CD4+/CD8+比較 MODS組傷后第1，3，5，7，14天CD4+/CD8+均明顯低于無MODS組(P均<0.05)。見表4。

表3 患者組不同時間點T淋巴細胞增殖活性比較

注：①與第1天比較，P<0.05。

表4 患者組不同時間點CD4+/CD8+比較

2.5HMGB1與T淋巴細胞增殖活性、CD4+/CD8+的相關性分析 Spearman相關分析結果顯示，HMGB1與T淋巴細胞增殖活性、CD4+/CD8+均呈顯著負相關性(r=-2.796，-3.042；P均<0.05)。

3 討 論

MODS是嚴重燒傷患者常見的一種并發癥，是導致患者死亡的主要原因。隨著對燒傷患者病理生理認識以及燒傷救治水平的不斷提高，整體燒傷治愈率明顯提高，但是燒傷后并發MODS的預防及治療仍然需要不斷地總結及探索。臨床研究指出，HMGB1參與了膿毒癥發生發展過程，是細菌以及其他毒素致死效應的一個重要細胞因子[6]。由于膿毒癥會進一步加重造成MODS的發生，因而這為燒傷并發MODS發生發展機制以及干預治療提供了新的思路。

本研究中，嚴重燒傷患者血清HMGB1水平明顯升高，且在傷后第3天時達到高峰。進一步分析發現，隨著干預治療的開展，患者組血清HMGB1水平均明顯降低，不過在傷后的第1，3，5，7，14天，MODS組患者血清HMGB1水平均顯著高于無MODS組患者，無MODS組患者血清HMGB1水平降低程度更加明顯，而MODS組患者血清HMGB1水平則相對處于較高水平，提示血清HMGB1水平與嚴重燒傷患者并發MODS有密切關系。嚴重燒傷引起的細菌感染以及休克等因素，使得體內中性粒細胞、巨噬細胞等炎性細胞被激活，導致大量炎癥因子生成和釋放，進而促進了血管內皮細胞、樹突狀細胞等大量分泌HMGB1并進入血液中，從而提高了血清HMGB1水平；同時，燒傷之后造成組織缺血缺氧，進而使得受損或者壞死的細胞核內的HMGB1分泌至細胞外，從而引起血清HMGB1水平在傷后的第1，3天內不斷升高[7-8]。早期相關動物實驗研究亦指出，通過給予HMGB1抑制劑治療，可顯著降低膿毒癥大鼠HMGB1表達水平，有助于防治膿毒癥及MODS[9]。因此，HMGB1可能在嚴重燒傷患者MODS發生發展過程中起到了重要作用。

本研究中，MODS組患者傷后第1，3，5，7，14天T淋巴細胞增殖活性以及CD4+/CD8+均明顯低于無MODS組，提示燒傷后并發MODS的患者體內細胞免疫功能受到嚴重損害。進一步分析發現，HMGB1與T淋巴細胞增殖活性、CD4+/CD8+均呈顯著負相關性，即血清HMGB1水平越高，患者細胞免疫功能越差，提示HMGB1與嚴重燒傷患者細胞免疫功能紊亂有密切關系，但其具體作用機制需要進一步研究證實。李俊聰等[10]的研究指出，通過抑制HMGB1過表達，可減輕嚴重燒傷大鼠脾臟的T細胞免疫功能。由于免疫功能紊亂是造成嚴重燒創傷患者發生全身炎癥反應綜合征、膿毒癥以及MODS的重要因素，因而在臨床中對于嚴重燒傷患者可給予HMGB1抑制劑類藥物，以改善免疫功能，減少膿毒癥及MODS的發生，從而改善患者預后[11]。

綜上所述，嚴重燒傷并發MODS患者血清HMGB1水平明顯升高，HMGB1可能參與了嚴重燒傷患者MODS及細胞免疫功能損傷的發生發展過程。