CD14 C(-260)T基因多態性與心肌梗死易感性關系的Meta分析

李麗娟 劉 敏

(大理大學公共衛生學院，云南 大理 671000)

心肌梗死發生是由于冠狀動脈堵塞，心肌血液供應中斷，導致心肌持續性缺血而發生局部壞死。大的冠狀動脈如發生缺血超過40 min，即可發生急性心肌梗死(AMI)〔1〕。AMI的發生基礎多是冠狀動脈硬化狹窄，加之人體內部或外部的各種原因，冠狀動脈內粥樣斑點發生破裂，血小板迅速凝集，在血管內形成血栓，阻礙血液的流通，導致心肌缺血繼而發生壞死〔2〕。近年來，由于國內生活水平的提高，心肌梗死的發生率也隨之升高。如果可以早期識別心肌梗死的高危因素，則對于心肌梗死的早期處理和AMI病死率的降低有很大的幫助。而研究表明動脈粥樣硬化屬于慢性炎癥疾病，其發生與多種細胞因子有關，如腫瘤壞死因子(TNF)-α、白細胞介素(IL)-6、IL-8和轉化生長因子(TGF)-β等〔3～5〕。 這些炎癥因子的產生和釋放，可以直接促使炎癥的發生，進而誘發心肌梗死。因此，從炎癥因子的遺傳學角度來闡述心肌梗死的發生機制，成為近年來心肌梗死研究的熱點。CD14是一種由單核細胞、巨噬細胞表達的糖蛋白，可與多種抗原相結合，并將信號傳遞給免疫細胞，促使各種細胞因子的釋放，進而導致炎癥的發生與發展。編碼CD14的基因位于5號染色體的長臂3區1帶。多項研究表明CD14 C(-260)T(rs2569190)的基因多態性與心肌梗死的易感性具有顯著相關性〔6～9〕，但也有研究存在爭議性的結論〔7,10～16〕。由于研究中樣本量和其他因素的影響，二者的相關性一直無法得到定論。此次Meta分析旨在探討CD14 C(-260)T的基因多態性與心肌梗死的易感性的具體關聯。

1 材料與方法

1.1檢索策略 檢索PubMed、Web of Science、中國知網數據庫(CNKI)、維普數據庫及萬方數據庫，收集2016年5月之前發表的關于CD14 C(-260)T基因多態性與心肌梗死易感性關聯性分析的病例對照研究或隊列研究。檢索中文關鍵詞為： “心肌梗死”、“急性心肌梗死”、“基因多態性”、“易感性”、“病例對照研究”、“隊列研究”；英文關鍵詞有：“CD14”、“C(-260)T”、“rs2569190”、“polymorphism”、“SNP”、“mutation”、“myocardial infarction”。主題詞檢索策略為：(“Antigens,CD14”〔Mesh〕) AND(“Myocardial Infarction”〔Mesh〕)。

1.2文獻資料納入和剔除標準 納入標準：①CD14 C(-260)T基因多態性和心肌梗死易感性的研究；②病例對照研究或隊列研究；③等位基因、基因型數據完整；④對照組基因型頻率Hardy-Weinberg平衡。剔除標準：①基因型數據不完整或沒有基因型數據；②重復發表、收錄的數據信息；③基因型數據不符合Hardy-Weiberg平衡的研究；④Meta分析、綜述。

1.3文獻篩選和數據提取 根據文獻納入標準，提取納入文獻的信息，包括：第一作者的姓名、發表年限、國家、種族、腫瘤類型、對照組來源、基因分型方法、病例和對照組基因型頻數。兩個研究者分別獨立提取信息，如有分歧，與其他研究者商討決定。

1.4評分標準 對所納入文獻進行質量評價，評分標準采用Newcastle-Ottawa Scale(NOS)文獻質量評價表。評價內容包括：病例的定義是否充分(1分)、病例的代表性(1分)、對照的選擇(1分)、對照的定義(1分)、病例與對照的可比性(2分)、研究對象暴露的確定方法(1分)、病例與對照的暴露是否采用了相同的確定方法(1分)和兩組應答率是否相同(1分)。得分7～9分的文獻為高質量文獻，4～6分的文獻為中等質量文獻，1～3分的文獻為低質量文獻。

1.5統計分析 信息提取以后，首先用SPSS19.0軟件計算所納入研究的對照組基因型數據Hardy-Weinberg平衡P值，剔除掉不符合Hardy-Weinberg平衡的研究。然后利用Stata12.0軟件進行Meta分析。利用CochranQ檢驗和I2檢驗方法評價各研究之間是否存在明顯異質性。當P>0.05，I2<50%時，異質性不明顯，采用固定效應模型；若P<0.05，I2>50%時，說明研究之間異質性明顯，則采用隨機效應模型〔17,18〕。本次研究中，利用5種等位基因模型來評價CD14 C(-260)T基因多態性與心肌梗死易感性之間的關聯性，并繪制出森林圖。此外，采用Begg漏斗圖檢測來觀察是否存在發表偏倚，利用Egger法線性回歸驗證漏斗圖的對稱性〔19〕。除總體分析外，根據人種和心肌梗死類型進行分層分析，以排除這些因素給Meta分析帶來的影響。通過敏感性分析，逐一刪除每項研究，觀察結果是否發生大的變化，剔除異質性較大的研究，保證最終結果的穩定。

2 結 果

2.1文獻檢索結果 初檢文獻為51篇，包括1篇成果快訊和2篇綜述。將綜述類型的文章剔除后，剩余49篇文獻。通過閱讀題目和摘要，得到相關文獻16篇。閱讀全文后，有3篇文獻沒有C(-260)T基因型數據或數據不全，篩選得到13篇文獻。對剩余研究提取基因型信息并計算Hardy-Weinberg平衡，發現有1篇文獻對照組基因型數據不符合Hardy-Weinberg平衡，因此最終的Meta分析共納入12篇文獻15項研究，其中包括5 433例心肌梗死患者，5 631例正常對照組，3項研究與AMI相關，12項研究沒有區分AMI和慢性心肌梗死 (表1)。

表1 納入文獻基本特征

2.2Meta分析結果 總體分析結果顯示，心肌梗死的易感性與CD14 C(-260)T基因多態性存在顯著相關性，4種基因模型的χ2檢驗P值都<0.05〔等位基因模型C vs TOR=1.08,95%CI:1.02～1.14,P=0.005;純合基因模型CC vs TTOR=1.16,95%CI:1.04～1.29,P=0.006;顯性基因模型 CC vs(CT + TT):OR=1.10,95%CI:1.01～1.20,P=0.02;隱性基因模型(CC +CA) vs AA:OR=1.11,95%CI:1.01～1.21,P=0.02〕。森林圖的結果顯示攜帶T等位基因的人群比攜帶C等位基因的人群，擁有更高的心肌梗死發病風險。但在總體分析時，有異質性存在，除采取隨機效應模型外，該次分析把人種和疾病類型作為自變量，進行了分組分析。根據森林圖，分組以后，在各亞組中，不再有異質性存在。

亞組的分析結果顯示，CD14 C(-260)T基因多態性與AMI易感性具有顯著的關聯性。而在人種的亞組分析中，結果顯示心肌梗死易感性在亞洲人群中與CD14 C(-260)T基因多態性存在顯著相關性，在高加索人群中沒有顯著相關性。根據Newcastle-Ottawa Scale(NOS)文獻質量評價表，本次Meta分析包含的研究，評分≥7分，屬于高質量文獻(表2)。

2.3異質性敏感性分析結果 在繪制森林圖過程中，基因模型(C vs T)和等位基因模型(CC vs TT)有異質性存在，因此采用隨機效應模型。當按照人種和疾病類型進行亞組分析時，發現可以消除異質性。因此，CD14 C(-260)T基因多態性與心肌梗死易感性之間的關聯性分析，進行了人種和疾病類型的亞組分析。發表偏倚用Begg漏斗圖顯示，并用Egger檢驗驗證漏斗圖對稱性，結果顯示沒有明顯發表偏倚存在。敏感性分析則顯示，在依次刪除每項研究時，研究結果并未發生明顯變化(圖1，圖2，圖3)。

表2 CD14 C(-260)T基因多態性與心肌梗死易感性關系Meta分析

圖1 CD14 C(-260)T基因多態性與心肌梗死易感性關系Meta分析漏斗圖(CC vs TT)

圖2 CD14 C(-260)T基因多態性與心肌梗死易感性關系Meta分析漏斗圖(C vs T)

圖3 CD14 C(-260)T基因多態性與心肌梗死易感性關系敏感性分析圖(CC vs TT)

3 討 論

CD14主要分為兩種，一種分布在單核細胞、巨噬細胞和中性白細胞的膜外側，這種類型以糖基磷脂酰肌醇的方式結合在細胞膜上，成為膜結合型CD14〔21〕；另一種分布在人的血液中。這兩種類型的CD14來源于同一轉錄本。研究發現，當人體發生炎癥時，CD14的含量會升高，而且會隨炎癥的發展逐漸升高〔22〕。CD14可以與多種抗原結合，但是缺乏膜內部分，不能將信號傳遞到細胞內，但是TLRs受體可以，而CD14可以與TLR2、TLR4作用，傳遞抗原信號，激活單核細胞及T細胞，釋放TNFα、IL-6、IL-8和IL-1β等炎癥因子。這些抗原包括脂多糖(LPS)、肽聚糖(PGN)、脂磷壁酸(LTA)、脂蛋白(BLP)、病毒及甘露糖等〔23〕。CD14除可以識別上述抗原并呈遞信號外，還具有其他功能，如：CD14可中和、清除LPS從而減輕炎癥反應；促進單核細胞黏附在活化的上皮細胞上；能夠與活化的淋巴細胞表面的CD14配體相互作用，抑制T細胞增殖和B細胞產生抗體；可促使巨噬細胞與活化的內皮細胞和T細胞的黏附；可識別革蘭陽性菌細胞壁成分中的肽聚糖(PGN)，并將信號呈遞給細胞。CD14 C(-260)T位于轉錄起始位點上游的啟動子 260位點(野生型為CC)，當C突變為T時，人體內的血清CD14濃度會升高。血清CD14是體內脂聯素的主要結合受體，與TLR2/TLR4受體形成復合物，參與炎癥的發生與發展。有研究發現，CD14 C(-260)T的基因多態性與冠狀動脈的不穩定斑塊形成有關〔24〕。Koenig等〔25〕的研究顯示，血清CD14可能導致冠心病和心肌梗死的發病風險增高。

本研究表明CD14 C(-260)T基因多態性是導致心肌梗死發生的一個危險因素。雖然CD14 C(-260)T基因多態性在心肌梗死的發生發展過程中的功能仍不十分明確，但CD14作為炎癥發生的一個重要趨化因子，其表達水平的增高是可以促進炎癥的發生與發展的〔26〕。本研究結果顯示，CD14 C(-260)T基因多態性與心肌梗死易感性在亞洲人群中存在明顯關聯性。

在已有的各種多態性分析中，限制結論準確性的因素主要有樣本量、民族、環境因素、臨床信息等。由于這些因素的影響，Meta分析所納入的研究可能存在發表偏倚。本研究通過繪制漏斗圖和敏感性分析圖顯示，沒有明顯的發表偏倚存在。但是仍可能存在以下一些缺陷：①關于亞洲人群和AMI人群的研究較少，導致基因型數據偏少，分析結果缺少說服力。②研究中并沒有涉及與心肌梗死相關的其他環境因素或臨床信息，也沒有排除這些因素的影響。③各項研究的校正因素不一致，研究對象的納入標準不一致，而且心肌梗死的發生有年輕化的趨勢。④本次Meta分析納入研究對照組人群多來自于醫院，分型方法多為酶切分型，未做分層分析。因此，具有臨床信息的大樣本量的多態性研究仍需要進行，而環境因素和遺傳因素的共同作用也將是研究的重點。