楊梅采前防落果藥劑篩選

劉銀蘭，趙慧宇*，楊桂玲，黃茜斌，葉海萍

(1.浙江省農業科學院農產品質量標準研究所 農業農村部農產品質量安全風險評估實驗室(杭州)農業農村部農藥 殘留檢測重點實驗室，浙江 杭州 310021； 2.黃巖區農業林業局，浙江 臺州 318020)

楊梅[Myricarubra(Lour.) S. et Zucc.]是我國特色水果之一，不僅具有觀賞價值和食用價值，而且富含纖維素、礦質元素、維生素、糖類、蛋白質、脂肪、果膠，以及鈣、磷、鐵等元素，具有較好的藥用價值，深受消費者喜愛[1-2]。楊梅在我國華東，以及湖南、貴州、廣東等地均有分布，我國總種植面積占全世界的99%[3]。楊梅采收前落果在較大程度上降低了果實的商品性和生產者的經濟效益，影響了楊梅產業的健康發展。楊梅果實自然脫落的內在原因主要是脫落酸、吲哚乙酸、赤霉素等內源激素的調控作用[4-5]，大風、降雨[6]等天氣因素，以及果蠅和白腐病等病蟲害因素[7-9]也是造成楊梅落果的重要原因。

2,4-滴鈉鹽，又名2,4-二氯苯氧乙酸鈉鹽，是一種選擇性內吸傳導激素型化學制劑，主要用作除草劑和植物生長調節劑，是防止落果的常用農藥。2,4-滴鈉鹽作為楊梅防落果劑使用已非常普遍，在成熟采收期噴施低濃度的2,4-滴鈉鹽，可以有效減輕采前落果造成的產量損失[10-11]。

對氯苯氧乙酸鈉是一種植物生長調節劑，目前我國僅在番茄上登記。研究表明，對氯苯氧乙酸鈉可抑制作物體內脫落酸的形成，致果柄間不易產生分離層，從而有效地減少落果、提高產量[12-13]。試驗結果也顯示，對氯苯氧乙酸鈉處理可提高番茄坐果率[14-16]。

2016年，原農業部農產品質量安全風險評估實驗室(杭州)從市場環節采集了來自云南、福建和浙江的共63批次的楊梅，監測結果顯示，2,4-滴鈉鹽和對氯苯氧乙酸鈉的檢出率分別為22.4%和25.4%，說明2,4-滴鈉鹽和對氯苯氧乙酸鈉在楊梅主產區使用普遍。為此，特開展2,4-滴鈉鹽和對氯苯氧乙酸鈉對楊梅防落果的藥效試驗，旨在篩選出適用的防落果藥劑，并給出合理使用的準則建議。

1 材料與方法

1.1 供試材料

LCMS 8050型液相色譜串聯質譜儀(LC-MS-MS)，GCMS 8040型氣相色譜串聯質譜儀(GC-MS-MS)，日本島津公司；ST16R型離心機，賽默飛世爾公司；BSA2202S型電子天平，德國賽多利斯公司；漩渦混合器，美國Talboys公司；KQ5200E型超聲波清洗器，昆山舒美超聲儀器有限公司；MTN-5800型氮吹儀，天津奧特賽恩斯儀器有限公司。

2,4-D(純度98.6%)標準品(上海市農藥研究所)、對氯苯氧乙酸鈉(純度98.0%)標準品(上海市農藥研究所)，以甲醇為溶劑，將標準品配制成1 000 mg·L-1儲備液，置于0～4 ℃冰箱中保存。再將儲備液用甲醇配制成5.00 mg·L-1的工作液，置于0～4 ℃冰箱中保存。85% 2,4-滴鈉鹽可濕性粉劑、8%對氯苯氧乙酸鈉可濕性粉劑均購自四川國光股份有限公司。

試驗用楊梅品種系兩種代表性楊梅品種，東魁楊梅和荸薺楊梅。

1.2 處理設計

試驗組1，2016年在浙江黃巖以東魁楊梅作為試驗對象，噴藥后通過統計施藥前后每個枝條的果實數量(個)計算落果率。具體地：選擇長勢相同的楊梅樹，每3棵作為一組處理，分別在采收前40、30、15 d噴施3.3 mg·L-1的85% 2,4-滴鈉鹽或250 mg·L-1的8%對氯苯氧乙酸鈉，另在采收前15 d分別噴施5、10 mg·L-1的85% 2,4-滴鈉鹽，以及375、125 mg·L-1的8%對氯苯氧乙酸鈉，共10組處理。另取3棵作為空白對照組(CK)，噴施相同體積的水。分別在東南西北4個方向標定側枝進行調查，每側枝坐果枝條數不應少于10個，分別于施藥前和采收前調查標定枝上面的果實數量。每個處理隨機采集上、中、下、里、外等不同部位的生長正常、無病害、成熟的樣品(不少于1 kg)，每個處理采集3個平行樣品，計算不同施藥條件下楊梅的落果率。

試驗組2，2015年在江西峽江采用荸薺種楊梅作為試驗對象，噴藥后通過統計單位面積(1 m2)的落果數量(個)計算落果率。具體地：選擇長勢相同的楊梅樹，每3棵作為一組處理，處理設計同試驗1。另取3棵作為空白對照組(CK)，噴施相同體積的水。采收時統計每個處理組地面每平方米的落果數量(個)。

1.3 殘留分析

1.3.1 樣品提取凈化

稱取楊梅樣品15 g(精確到0.01 g)于50 mL離心管中，加入15 mL乙腈，用多管振蕩器2 500 r·min-1渦漩1 min，超聲提取20 min。向50 mL離心管中加入1.00 g氯化鈉、4.00 g無水硫酸鎂，渦旋1 min，8 000 r·min-1離心3 min。提前稱取C180.30 g、PSA(前列腺特異抗原)0.30 g、無水硫酸鎂0.9 g于15 mL的離心管中，移取約5 mL上述提取液至15 mL凈化管中，渦漩1 min，8 000 r·min-1離心3 min，取1.00 mL凈化液過0.22 μm濾膜，待進LC-MS-MS。準確移取3 mL凈化液于10 mL刻度管中，氮吹至近干，用正己烷定容至3.0 mL，過0.22 μm濾膜，待進GC-MS-MS。

1.3.2 高效液相色譜-質譜條件

色譜柱：Kinetex 2.6 μm XB-C18100 A(100 mm×2.1 mm)；流動相：0.1%甲酸、0.1%甲酸乙腈，二者體積比20∶80；柱溫：30 ℃；進樣量：2 μL；流動相流速：0.25 mL·min-1。

質譜條件：毛細管電壓4.0 kV(+)/3.0 kV(-)，霧化氣流量3.0 L·min-1，加熱氣流量10.0 L·min-1，加熱塊溫度400 ℃，進樣口溫度250 ℃，接口溫度300 ℃，定量模式為MRM(多反應監測模式)，電離方式為負離子電噴霧電離(ESI)。離子條件(m/z)：2，4-D，定量離子對219.00/161.15，定性離子對219.00/125.10；對氯苯氧乙酸鈉，定量離子對185.00/126.95，定性離子對185.00/91.00。

2 結果與分析

2.1 防落果效果

如圖1所示，采前15 d施用10 mg·L-12,4-滴鈉鹽或250 mg·L-1對氯苯氧乙酸或375 mg·L-1對氯苯氧乙酸，對防治楊梅落果效果較好，單位面積落果數量分別為4、2和2個，明顯優于對照區(11個)。2016年在浙江黃巖開展試驗的結果(圖2)顯示，采前15 d施用10 mg·L-12,4-滴鈉鹽或375 mg·L-1對氯苯氧乙酸，防落果效果較好，落果率分別為13.4%和17.6%，明顯優于對照區的34.0%。綜合2 a的試驗結果，采前15 d施用10 mg·L-12,4-滴鈉鹽或375 mg·L-1對氯苯氧乙酸對防治楊梅落果效果較好。

圖1 2015年不同藥劑處理單位面積楊梅的落果數

圖2 2016年不同藥劑處理楊梅的落果率

2.2 生長安全性

試驗結果表明，采收前15 d施用375 mg·L-1的8%對氯苯氧乙酸鈉，具有理想的防楊梅落果的作用，且試劑消解迅速(3.1 d)，15 d后采收的楊梅均未檢出對氯苯氧乙酸鈉。采前15 d施用10 mg·L-1的85% 2,4-滴鈉鹽對防治楊梅落果同樣具有良好的效果，但當施用劑量超過20 mg·L-1時，會對新葉片造成卷曲藥害(圖3)。

圖3 高劑量2,4-滴鈉鹽對楊梅新稍葉片的 藥害效果

2.3 殘留風險

根據“第四次中國總膳食研究”發布的不同年齡人群體重和水果消費量數據[17]，和國家標準GB 2763—2014中對2,4-滴、對氯苯氧乙酸鈉ADI(每日容許攝入量)的規定，基于文獻[18]中的方法，測算2,4-滴鈉鹽和對氯苯氧乙酸鈉的慢性膳食暴露風險。根據本試驗確定的推薦施藥劑量，測算結果顯示：當2,4-滴鈉鹽的施用濃度為10 mg·L-1、采收間隔期為15 d時，平均殘留量為0.05 mg·kg-1，慢性風險商為0.033 9%，顯示對兒童和成年人無慢性膳食暴露風險；當對氯苯氧乙酸鈉的施用濃度為375 mg·L-1、采收間隔期為15 d時，樣品中未檢出試劑殘留，對兒童和成年人無慢性膳食暴露風險。

3 小結

針對楊梅落果問題，開展不同藥劑及其使用方法的篩選試驗，結果顯示，采收前15 d施用375 mg·L-1的8%對氯苯氧乙酸鈉可溶性粉劑1次，具有理想的防落果作用，采收間隔期15 d時，楊梅上未檢出對氯苯氧乙酸鈉，對兒童和成年人無慢性膳食暴露風險，值得在生產中推廣應用。采收前15 d施用2,4-滴鈉鹽對防治楊梅也具有較好的效果，但當劑量超過20 mg·L-1時，容易造成新稍葉片藥害，因此在使用過程中應該嚴格控制劑量(5～10 mg·L-1)，施用次數不超過1次。