丁蟲腈乳油的高效液相色譜分析方法研究

湯勇 吳升德 胡天良

摘要 采用高效液相色譜法，以甲醇+乙腈+水（用磷酸調pH=3.0）溶液為流動相，使用ZORBAX SB-C18 5 μm為填料的不銹鋼柱，檢測波長為220 nm，對丁蟲腈乳油進行定量分析。結果表明，該方法的標準偏差為0.14，相對標準偏差為0.91%，平均回收率為99.17%，丁蟲腈的檢測濃度在0.01～0.50 mg/mL范圍內的線性相關系數為0.999 7。

關鍵詞 高效液相色譜；丁蟲腈乳油；分析方法

中圖分類號 S657.7+2 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2018）12-0118-02

Abstract To establish a HPLC method for determination of flufiprole EC，methanol，acetonitrile and water（pH was adjusted to 3.0 with phosphoric acid）were used as mobile phase，with a ZORBAX SB-C18 5 μm as chromatographic column，and UV detection wavelength was set at 220 nm. The standard deviation of this method was 0.14， the variation coefficient was 0.91%，and the average recovery rate was 99.17%.The standard curve was linear over the range of 0.01-0.50 mg/mL with linear correlation coefficient as 0.999 7.

Key words HPLC；flufiprole EC；analysis method

丁蟲腈（flufiprole，CAS號：704886-18-0）是一種新型苯基吡唑類廣譜殺蟲劑，對半翅目、鱗翅目、纓翅目害蟲具有優異防效。其殺蟲機理新穎獨特、活性高，具有胃毒、觸殺及一定的內吸作用，與菊酯類、有機磷類和氨基甲酸酯類等農藥無交互抗性，可用于防治水田稻飛虱、二化螟、稻縱卷葉螟以及蔬菜田中的小菜蛾[1-2]。目前，關于丁蟲腈乳油的分析方法未見公開報道。本文采用高效液相色譜法測定乳油制劑中的丁蟲腈含量，該方法操作簡單、快速、準確，可用于產品生產過程質量控制。

1 材料與方法

1.1 儀器及試劑

1.1.1 儀器設備。Agilent 1260高效液相色譜儀（美國安捷倫公司），具有可變波長紫外檢測器和自動進樣器；Agilent色譜工作站；色譜柱：150.0 mm×4.6 mm（i.d.）不銹鋼柱，內裝ZORBAX SB-C18 5 μm填充物；Milli-Q超純水儀。

1.1.2 試劑。甲醇、乙腈為色譜純；磷酸為分析純；丁蟲腈標樣（購于德國Dr Ehrenstorser GmbH，純度99.0%）；丁蟲腈乳油（企業提供）。

1.2 色譜條件

流動相為甲醇∶乙腈∶水=40∶30∶30（v/v/v，用磷酸調pH=3.0），檢測波長220 nm，流速1.0 mL/min，進樣體積20 μL，柱溫30 ℃。

1.3 試驗方法

1.3.1 標樣溶液的配制。準確稱取丁蟲腈標準品50 mg（精確至0.000 2 g）于50 mL容量瓶中，用乙腈定容搖勻。

1.3.2 供試品溶液的配制。準確稱取0.07 g（精確至0.000 2 g）丁蟲腈乳油試樣，置于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解定容搖勻后待測。

1.3.3 測定。在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰2針標樣溶液峰面積相對變化<1.5%后按標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液順序進行分析。

通過比較標樣和樣品的保留時間進行定性分析，將測得的2針試樣溶液及試樣前后2針標樣溶液中丁蟲腈的峰面積分別進行平均，試樣中丁蟲腈的質量分數（X）按下式計算：

式中，m1為試樣的質量（g）；m2為標樣的質量（g）；A1為2針試樣溶液中丁蟲腈峰面積的平均值；A2為2針標樣溶液中丁蟲腈峰面積的平均值；P為標樣中丁蟲腈的質量分數（%）。

1.4 方法學驗證

1.4.1 檢出限及定量限。按照1.3.1所述，逐級稀釋丁蟲腈標樣溶液進行測定，按3倍信噪比和10倍信噪比分別計算檢出限和定量限[3]。

1.4.2 線性關系。將1.3.1 所述配制的標樣溶液，用乙腈稀釋成分別含0.01、0.05、0.10、0.20、0.50 mg/mL丁蟲腈的標準系列溶液，按上述的色譜條件分別進樣測定峰面積。以標準品峰面積為縱坐標（Y），以5個不同濃度點的供試液的濃度（mg/L）為橫坐標（X），擬合回歸線性方程[3]。

1.4.3 精密度。從同一批丁蟲腈乳油樣品中準確稱取5個試樣，按1.3.2配制試樣溶液，按上述色譜條件注入高效液相色譜儀，計算平均峰面積及相對標準偏差（RSD）[3]。

1.4.4 回收率。準確稱取5份已知含量的樣品，分別加入不同量丁蟲腈標準品，在上述操作條件下測定加標回收率[3]。

2 結果與分析

2.1 色譜條件的選擇

用紫外檢測器對相同條件下分離后的丁蟲腈及其雜質在190～370 nm波長范圍內進行掃描，發現丁蟲腈的最大吸收波長在220 nm，此時雜質響應也較靈敏，故選擇220 nm作為檢測波長[4]。

根據丁蟲腈的理化性質，選擇ZORBAX SB-C18為分析柱。先后考察了以甲醇-水、甲醇-磷酸溶液、乙腈-水、乙腈-磷酸溶液、甲醇-乙腈-水為流動相。當以甲醇-乙腈-水為流動相時，在保證較好分離的同時獲得了較好的峰型。經優化，當甲醇∶乙腈∶水=40∶30∶30（v/v/v）時，并用磷酸優化流動相溶液pH=3.0，流速為1.0 mL/min時，試樣溶液中丁蟲腈和雜質分離度和峰型較好，丁蟲腈的保留時間為8.099 min。丁蟲腈標樣和乳油樣品的高效液相色譜圖如圖1、2所示。

2.2 檢出限及定量限

將標樣溶液經過逐級稀釋后進樣分析，最終得出丁蟲腈的檢出限為 2.19 μg/mL，定量限為 6.98 μg/mL。

2.3 線性關系

由圖3可知，經回歸分析得到丁蟲腈的線性方程為Y=85 255X+1 714，線性相關系數為0.999 7，表明丁蟲腈在0.01～0.50 mg/mL內線性關系良好。

2.4 精密度

精密度試驗標準偏差為0.14，RSD為0.91%，表明該方法精密度良好，滿足檢測要求。

2.5 加標回收率

該檢測方法加標回收率試驗結果如表1所示，可以看出，測得方法的平均回收率為99.17%，表明在添加不同濃度標準溶液后回收率及相對標準偏差符合檢測要求。

3 結論

本試驗建立了高效液相色譜法測定丁蟲腈乳油含量的分析方法，結果表明，本方法準確可靠，專屬性強，精密度較高，線性關系和回收率良好，可用于丁蟲腈乳油產品的質量控制。

4 參考文獻

[1] 李彥龍.創制殺蟲劑丁蟲腈[J].農藥，2014，53（2）：126-128.

[2] 何健，由宗政，廖云燕，等.丁蟲腈在土壤中的吸附及移動特性[J].農藥，2012，51（10）：720-723.

[3] 國家藥典委員會.《中華人民共和國藥典》2015版二部附錄[M].北京：中國醫藥科技出版社，2016.

[4] 曹磊，顧愛國，王莉.高效液相色譜法測定0.06%甾烯醇微乳劑中有效成分含量方法研究[J].現代農業科技，2018（2）：125-126.