不同產地黃芩對小鼠急性肝損傷保護作用的實驗研究

劉巖　計小清　趙印濤　辛思源　杜英杰　孔令娟　高占華

摘要：本文通過四氯化碳（CCl4）對實驗小鼠造成急性肝損傷，觀察不同產地、不同用量的黃芩保護小鼠實驗性肝損傷作用的區別，結果證明黃芩對CCl4所致小鼠的肝損傷，可能通過增加了小鼠肝細胞的抗損傷能力起到相應的保護作用。

關鍵詞：黃芩；CCl4；急性肝損傷；小鼠

中圖分類號：G642.423 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2018）27-0264-02

黃芩[1]是唇形科Labiatae植物黃芩的干燥根，最早收載于《神農本草經》，味苦性寒，具有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎等功效。現代藥理學研究證明，其具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗腫瘤、保肝、利膽等功效。肝臟是有毒物質或藥物在人體內代謝、轉化的重要場所，是人體重要的代謝器官，因此外源性物質很容易攻擊肝臟，從而引發慢性或急性的肝損傷。人肝臟損傷的特點，與CCl4所導致的肝損傷動物模型十分相近，因為CCl4引起的急性肝損傷，與人類肝臟受損的實際情況非常相似，在實驗中應用較為廣泛。因此，本研究通過CCl4對實驗小鼠造成急性肝損傷，觀察不同產地、不同用量的黃芩保護小鼠實驗性肝損傷作用的區別。

一、材料與方法

（一）藥品及試劑

黃芩分別取自河北省承德市、山西省運城市、山東省臨沂市、甘肅省定西市。取各產地黃芩均為15g，分別制成100ml藥液作為高劑量組（150mg﹒ml-1）；取高劑量藥液50ml稀釋至100ml作為中劑量組（75mg﹒ml-1）；取中劑量藥液50ml稀釋至100ml作為低劑量組（37.5mg﹒ml-1）。橄欖油化學純（成都市鑫龍試劑廠，生產批號20140615）；CCl4分析純（成都市鑫龍試劑廠，生產批號20140809）。SOD（生產批號20141021）、MDA（生產批號20141019）試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，ALT（生產批號211448G）、AST（生產批號211106G）試劑盒由北京利德曼生化股份有限公司提供。

（二）實驗動物

健康昆明種小鼠共112只，雌雄各半，體重為（25±3）g，[許可證號：SCXK（京）2012-0001]，由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供。小鼠常溫飼養，常規飲食、飲水，適應性飼養1周。

（三）主要儀器設備

日立7600-020全自動生化分析儀；722分光光度劑（上海欣茂儀器有限公司）；LDZ5-2低速自動平衡離心機（北京醫用離心機廠）。

（四）方法

取實驗小鼠隨機分為14組，每組8只，分別為實驗對照組、模型組、山西運城（低、中、高）、河北承德（低、中、高）、山東臨沂（低、中、高）和甘肅定西（低、中、高）劑量組。實驗對照組和模型組小鼠用生理鹽水灌胃，各給藥組按照0.2ml﹒10g-1灌胃，各組小鼠均給藥1周。末次給藥后2h，實驗對照組按10ml﹒kg-1給予橄欖油腹腔注射，模型組和各給藥組小鼠腹腔注射0.1%的CCl4橄欖油溶液，造模后實驗小鼠禁食不禁水24小時。各組實驗小鼠禁食不禁水24小時后斷頭取血，常規制備血清。然后按照各試劑盒說明書方法，分別檢測各組小鼠血清ALT、AST活性和SOD、MDA含量。

（五）數據處理

數據以X±S表示，應用SPSS—17.0統計軟件進行方差分析。

二、結果

模型組小鼠血清ALT、AST含量顯著高于實驗對照組（P<0.01）。各給藥組小鼠血清ALT、AST含量均低于與模型組，其中山西運城（中、高）、承德（低、中、高）、山東臨沂（高）、甘肅定西（高）劑量組小鼠血清ALT含量與模型組比較均顯著下降（P<0.01），山西運城（中、高）、承德（中、高）、山東臨沂（高）、甘肅定西（高）劑量組小鼠血清AST含量與模型組比較均有顯著性差異（P<0.01）。模型組小鼠血清SOD含量明顯低于實驗對照組（P<0.05），各給藥組小鼠血清SOD含量均高于模型組，其中山西運城（高）、河北承德（中、高）、甘肅定西（高）劑量組小鼠血清SOD含量明顯高于模型組（P<0.05）。模型組小鼠血清MDA含量與實驗對照組比較明顯升高（P<0.01），各給藥組小鼠血清MDA含量與模型組比較均有所降低，其中山西運城（高）、河北承德（中、高）、山東臨沂（高）、甘肅定西（高）劑量組小鼠血清MDA含量與模型組比較均存在顯著性差異（P<0.01）。

三、討論與結論

肝臟的主要功能是以代謝為主，在人體內，以儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成、去氧化等為主要作用，肝臟一旦出現損傷，人體的物質代謝等功能將發生紊亂，甚至會危及生命[2]。因此，肝臟對人體至關重要。

本實驗結果顯示，模型組與實驗對照組小鼠比較，血清ALT、AST含量均明顯升高，說明CCl4對肝細胞造成了明顯的損傷作用。不同產地、不同劑量給藥組小鼠血清ALT、AST含量均低于模型組，且產自河北承德的黃芩效果尤為明顯，并呈劑量相關性。因此，表明黃芩能增加小鼠肝細胞的抗損傷能力，在一定程度上對肝臟具有保護作用。

肝損害的程度及治療后肝功能恢復的情況，可由肝組織內MDA含量的變化來反映。自由基是人體正常生化過程的中間產物，同時機人體還含有一些清除氧自由基的酶，如SOD，疾病的發生可能是由自由基產生過多或者機體內的酶含量過少導致，SOD能抑制自由基啟動的脂質過氧化反應，并能清除自由基，但是當抗氧化酶活力不足時，清除機體自由基時就會產生障礙，最終自由基含量升高，從而引起細胞膜破裂和細胞功能的喪失，因此SOD的變化可以間接地反應疾病情況下自由基的變化。本研究結果表明，各給藥組SOD含量較模型組均有所升高，而MDA含量均有所下降，而產自河北承德的黃芩效果更為明顯，且呈劑量相關性。表明黃芩的保肝作用與其能抑制自由基脂質過氧化存在一定相關性。

綜上所述，黃芩對CCl4所致小鼠的肝損傷，可能通過增加了小鼠肝細胞的抗損傷能力起到相應的保護作用。在不同產地的黃芩中，山西運城和河北承德中、高劑量組的黃芩保肝作用比低劑量組效果更好，說明黃芩對肝損傷小鼠的保護作用與其產地及劑量均呈一定相關性。同時，黃芩對小鼠肝損傷的保護作用與其能夠提高肝臟的抗氧化能力也具有一定關系。

參考文獻：

[1]黨珍，張艷萍，王西芳，等.陜西子洲地產黃芩資源調查研究[J].現代中醫藥，2017，5（37）：79-81.

[2]夏娜，陳義磊，陶海燕，等.藥桑多糖對四氯化碳所致大鼠肝損傷的保護作用[J].食品科學，2015，36（13）：247-251.