冷凝集導致血常規結果失真的處理方法比較

吉黎

（成都市第六人民醫院檢驗科 四川 成都 610051）

利用全自動血細胞進行血常規分析是現代醫院最基本的一項血液檢查[1]，其檢測具有高效、快速、方便的特點，大大提高了結果的及時性和準確性。但是近年來研究發現，血常規分析儀檢測結果的影響因素很多，其中冷凝集是很重要的一種干擾因素之一，其標本紅細胞結果降低，而MCV、MCH、MCHC結果假性升高。對此，研究報道中多偏向采用37℃水浴半小時來解決此類問題。但當遇見高效價冷素標本時，該方法不一定有效。據文獻報道，針對冷凝集標本還可使用血漿置換法[2]和標本試劑雙重加溫法[3]。因此，本文選取經37℃水浴半小時后血常規結果仍不能被糾正的標本進行血漿置換法和試劑標本雙重加溫法，現將結果報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年2月—2017年12月在我院檢驗科進行血細胞分析時出現冷凝集現象的標本，其中采用37℃水浴半小時后仍出現結果不能被糾正的標本共8例。該類標本不常見且不能保留，因此在發現此類標本后立即進行了相關檢查分析，并進行結果記錄。

1.2 儀器與試劑

日本希森美康公司生產的XT-2000i全自動血細胞分析儀，配套的原裝試劑和高、中、低三個水平的質控物，LDZ5-2型離心機，0.9%氯化鈉溶液，移液器及吸頭，Olympus顯微鏡。瑞氏染液購于珠海貝索。血常規儀器每年進行兩次校準，每天進行質控檢測，結果無失控，提示儀器狀態正常。

1.3 方法

進行冷凝集標本的篩選：查看血常規標本結果時紅細胞偏低，血紅蛋白偏高，明顯不成比例，MCV、MCHC偏高，將標本顛倒混勻后肉眼觀察到試管管壁有明顯的細沙樣顆粒。同時查看儀器是否有報警信息，如紅細胞凝集?、混濁/血紅蛋白干擾?等，嗜堿通道的右側出現長長的拖尾現象[4]。手工推片鏡檢，鏡下紅細胞呈片狀分布，提示篩選。將此類標本先進行37℃水浴半小時后進行上機檢測，若結果仍未被糾正，則進行血漿置換及試劑標本雙重加溫法。

1.3.1 試劑標本雙重加溫法 取一干凈試管，使用移液器精確吸取160μLSysmex CELLPACK放入37℃水浴箱中孵育30min，再加入經37℃水浴后的標本40μL，充分混勻后采用Sysmex XT-2000i血細胞分析儀的毛細管模式進行檢測分析并其記錄結果。

1.3.2 血漿置換法 將水浴后的標本3000rmp/min離心5min，用移液器慢慢吸去上層血漿，并記錄吸出的量，再加入等量的0.9%氯化鈉溶液，混勻后再次離心，吸取上層液體，反復洗滌3次后上機檢測并記錄其結果。

1.4 處理有效的判斷

儀器報警無提示，細胞散點圖無異常，紅細胞與血紅蛋白比例趨于合理。推片鏡檢時，鏡下紅細胞未見聚集。肉眼觀察標本管壁未見凝集顆粒出現。

1.5 統計學處理

應用統計軟件SPSS19.0進行數據分析，采用配對t檢驗進行組間比較，計量資料以均數±標準差表示，以P＜0.05認為差異有統計學意義。

2.結果

檢測后的結果表明，經血漿置換法和試劑標本雙重加溫法處理后的紅細胞（RBC）、平均紅細胞體積（MCV）差異具有統計學意義（P＜0.05）。兩種方法處理后的血紅蛋白（HGB）、白細胞（WBC）、血小板（PLT）差異無統計學意義（P＞0.05）。血漿置換法處理后的血小板低于處理前和試劑標本雙重加溫法。見表。

表8 例標本處理后結果比較

3.討論

冷凝集現象的出現主要是因為患者的血清中存在冷凝集素。它是一種針對紅細胞（RBC）膜抗原的IgM型自身抗體[5]。在溫度較低時可誘導自身紅細胞聚集，導致紅細胞檢測結果假性降低，同時紅細胞的相關參數，如平均紅細胞容積（MCV）、平均血紅蛋白含量（MCH）及平均血紅蛋白濃度（MCHC）水平也異常升高。部分健康人體內也會存在這種抗體，但效價低，一般不會引起紅細胞聚集。對于冷凝集現象出現的原因機制還不明確，但有文獻[6]報道，肺炎支原體感染可能會導致標本出現冷凝集現象。

在日常血常規檢測中，冷凝集現象是影響其結果準確性的主要因素之一。血細胞分析儀檢測紅細胞的原理主要為電阻抗法。在檢測冷凝集標本時，由于紅細胞聚集在一起，不能單個通過細胞通道，因此導致紅細胞計數偏低，紅細胞體積偏大。而白細胞使用熒光染料進行染色，流式細胞術進行計數，檢測原理與紅細胞不用，因此結果影響沒有紅細胞那么大。

目前，關于如何消除冷凝集標本的檢測方法研究結果不一。對于冷凝集的標本，可以首先采用37℃水浴半小時的方法進行糾正。但遇到嚴重凝集的標本，采用血漿置換法或試劑標本雙重加溫的方法，能有效的去除冷凝集素的干擾。由本文表1可以看出，冷凝集標本經兩種方法處理后與37℃水浴法比較，MCV結果低于水浴法，紅細胞（RBC）結果高于水浴法，血紅蛋白（HGB）、血小板（PLT）、白細胞（WBC）這三個結果無明顯差異。但是血漿置換過程有可能引起PLT丟失，導致PLT檢測結果均明顯降低，造成PLT結果不可信，并且操作繁瑣，手工造成的誤差大。試劑標本雙重加溫法使整個檢測過程中血液溫度接近37℃，基本消除冷凝集現象，使得結果更加準確可靠。

綜上所述，冷凝集主要影響紅細胞檢及其參數的檢測，對白細胞、血紅蛋白、血小板基本無影響。為保證檢驗質量，避免冷凝集標本對血常規檢查的干擾，對經37℃水浴后冷凝集現象不能改善的標本，采用試劑標本雙重加溫法及時檢測，能保證血常規結果準確可靠。