深低溫保存紅細胞技術的研究及臨床應用

何國松 曾波

【摘 要】

冰凍紅細胞是針對稀有血型開展的項目，解凍去甘油紅細胞是稀有血型患者急救輸血最常用的成分血。

【關鍵詞】 深低溫；紅細胞；臨床應用

【中圖分類號】R181.3+2 【文獻標志碼】

B 【文章編號】1005-0019（2018）14-206-01

冰凍紅細胞是針對稀有血型開展的項目，解凍去甘油紅細胞是稀有血型患者急救輸血最常用的成分血。本次實驗在保證血液質量的前提下，盡量縮短手工制備解凍去甘油紅細胞的耗時，延長血液保存期限，及時、有效的為病人提供所需血液成分。

成立14年來，稀有血型庫建立在冊的稀有血型獻血者A型81人，5人無聯系；B型65人，7人無聯系；O型89人，8人無聯系；AB型19人，3人無聯系，稀有血型獻血者分布文山8縣市，急需血液時不能及時采集。臨時在緊急情況下一袋RH（D）陰性血用到患者身上之前要經歷一個漫長的過程，所以開展冰凍紅細胞項目勢在必行，解凍去甘油紅細胞制備過程研究應用是稀有血型患者的福音。

1 項目研究的目的及意義

1.1 RH（D）陰性患者的緊急輸血 由于RH（D）陰性血型在我國所占的比例極少（0.3%），常規低溫保存的血液期限短，所以在病人需要時都不能及時供應[1]，但在開展冰凍紅細胞項目后，所有采集到的RH（D）陰性血液在規定時間內都進行冰凍保存，在病人需要時解凍去甘油后就能及時輸入患者體內。

1.2 新生兒溶血病換血治療由抗-D抗體引起的新生兒溶血病，是所有血型抗體引起溶血病中最嚴重的一種，它發病快、病程短、愈后差，如果不及時進行血液置換甚至會有生命危險[2]。項目的開展也為新生兒溶血病患者帶來了更多的福音。

1.3 自然災害和戰略儲備開展冰凍紅細胞項目后血液的保持期限由35天延長至了十年，在遇到特大自然災害或非常時期時可以及時供給血液挽救生命，是自然災害和戰備的堅強后盾。

2 采取的技術措施和方法步驟

2.1 所需細胞保護劑和細胞洗滌劑 ①復方甘油②9%濃氯化鈉③0.9%注射用生理鹽水

2.2 采取的技術措施項目開展后由于去甘油化時間過長，在緊急情況下不能給病人及時的供應血液，所以結合我站實際情況，著手從試劑滴速、離心力、離心時間等關鍵控制點進行了反復的試驗，每袋試驗的血液都經過質量檢測，通過試驗分析得出：試劑加入的快慢對血液質量沒有顯著變化；但是由于紅細胞的可塑變形性，提高離心力、縮短離心時間反而得到了滿意的結果，不但沒有增加紅細胞的破壞率還提高了紅細胞的回收率。

2.3 方法步驟

2.3.1 紅細胞甘油化：

①用無菌接管機將要冰凍的紅細胞與轉移袋聯接。

②將轉移完畢的紅細胞及紅細胞空袋一起離心（程序12）。

③ 將離心完畢的紅細胞的上清液用分漿夾引流入紅細胞空袋中，再用無菌接管機去掉紅細胞空袋同時聯接輸血器及復方甘油溶液（1U：160ml，2u： 320ml）。

④將紅細胞放在旋轉儀上，用輸血器將復方甘油溶液由慢到快（每袋15-20分鐘）滴入紅細胞轉移袋，滴加完畢后，熱合、斷袋。靜置平衡30分鐘。

⑤用計算機進行血液轉化錄入，打印《血液交接單》交供血科包裝入庫放置入-80℃低溫冰箱保存。

2.3.2 解凍去甘油紅細胞：

①從冰箱取出冰凍紅細胞，放入37℃干式融化箱（或水浴箱）中振搖融化15分鐘。

②將融化后的冰凍紅細胞連接一空袋后離心（程序12）， 離心完畢后，將紅細胞上清液用分漿夾引流回空袋中，熱合去掉空袋。

③用無菌接管機將去甘油紅細胞與輸血器及濃氯化鈉溶液聯接。

④將紅細胞放在旋轉儀或采血稱上，用輸血器將濃氯化鈉溶液以6ml/分（120滴/分）的速度加入紅細胞中（1U：80ml，2u： 160ml），加入完畢后，平衡3分鐘。

⑤再用無菌接管機去掉濃氯化鈉溶液袋，同時聯接一次性使用鹽水聯袋，以80ml/分的速度加氯化鈉注射液300ml，平衡5分鐘。

⑥ 將平衡后的紅細胞取出離心（程序12）。離心完畢后，將紅細胞上清液引流入空聯袋中。

⑦以80ml/分的速度加入氯化鈉注射液300ml，平衡5分鐘。將平衡后的紅細胞取出離心（程序12）。離心完畢后，將上清液引流入空聯袋中，熱合、斷袋。

⑧無菌接合上一套三聯袋生理鹽水，按每次加入200ml生理鹽水洗滌紅細胞數次，一般在3至7次之間，直到上清液清亮為止。

⑨洗滌完畢后加入生理鹽水至紅細胞溶液為200ml±10%，并引流一截至少20cm血辮。

⑩用計算機進行血液轉化錄入，打印《血液交接單》交供血科包裝、入庫。

3 解凍去甘油紅細胞的臨床應用及療效觀察

項目開展三年多以來，做了RH（D）陰性血型冰凍紅細胞196袋。隨機抽取輸用解凍去甘油紅細胞48例患者分析，分別為顱腦損傷、新生兒溶血病、外傷、消化道出血四種疾病類型各12例，通過回訪發現輸血前血紅蛋白分別為71g/l、100g/l、73g/l、50g/l，輸血后24小時血紅蛋白分別為92g/l、177g/l、89g/l、71g/l，輸血量分別為3U、2U、5U、2U，輸血均有效。

4 實施結果

我站在2013討論決定開展冰凍紅細胞項目，通過項目計劃、外出學習、反復試驗，得到質量保證后，在2014年2月使解凍去甘油的過程從7小時縮短到了3個小時，達到了我們預期的效果。改良法解凍去甘油紅細胞縮短洗滌時間，及時提供RH（D）陰性血液、輸注效果好，讓病人和醫生都能夠很快的接受，能得到更快的推廣。所以深低溫保存紅細胞技術的開展是一件利國利民的好事，不但節約稀有RH（D）陰性血液資源，又能及時、有效提供給RH（D）陰性病人使用，為危重病人提供生命的保障。

5 結束語

在開展冰凍紅細胞項目之前，RH（D）陰性患者在需要輸注血液時要提前預約，血液到達醫院輸入病人體內也需要10小時左右。對于病人來說，時間就是生命，在緊急搶救時如果血液能及時輸入病人體內，那就是贏得了時間、贏得了生命的希望，對于后期治療來說會愈后更好，特別是新生兒溶血的病人，及早得到換血治療，留下的后遺癥就會更少、更輕。

參考文獻

[1] 張新龍，劉海英.少數民族地區RhD（-）血液冰凍保存洗滌復蘇技術及臨床應用[J].臨床醫藥文獻電子雜志，2017，4（5）：803-804.

[2] 湛玉武，李康生.惠州市稀有血型Rh陰性冰凍血庫的建立及臨床意義[J].青島醫藥衛生，2018，50（3）：220-222.