PCR技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用

摘要：食品安全問(wèn)題關(guān)乎著社會(huì)的穩(wěn)定以及人們的切身安全，為此國(guó)家對(duì)食品衛(wèi)生安全檢測(cè)工作十分重視。而PCR技術(shù)憑借其快捷、準(zhǔn)確的優(yōu)勢(shì)，目前已經(jīng)在食源性致病微生物檢測(cè)中取得了廣泛的應(yīng)用。面對(duì)食品檢測(cè)領(lǐng)域的擴(kuò)展趨勢(shì)，對(duì)于PCR技術(shù)的更新和完善也提出了新的挑戰(zhàn)。本文針對(duì)于此，重點(diǎn)探究PCR技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域，以期達(dá)成突顯其敏感性、特異性檢測(cè)的目標(biāo)，旨在為食品安全實(shí)際檢測(cè)提供借鑒或助力。

關(guān)鍵詞：PCR技術(shù)；食品檢測(cè)；應(yīng)用

中圖分類號(hào)： TS207 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A DOI編號(hào)： 10.14025/j.cnki.jlny.2018.22.047

PCR技術(shù)的誕生距今已經(jīng)超過(guò)了30年，憑借其不可替代的性能和功效，在食品檢測(cè)領(lǐng)域占據(jù)重要的位置并發(fā)揮了卓越的作用。食品安全問(wèn)題事關(guān)民生和社會(huì)的和諧發(fā)展，一旦出現(xiàn)大規(guī)模的食品安全事故，勢(shì)必會(huì)產(chǎn)生極大的社會(huì)反響，重則威脅人們的生命。食品安全檢測(cè)的核心在于檢測(cè)微生物和病菌，以防止其進(jìn)入人體而引發(fā)中毒事件。在目前生物技術(shù)中最為成熟的技術(shù)當(dāng)屬PCR技術(shù)，而且在食品檢測(cè)領(lǐng)域中取得了廣泛的應(yīng)用。隨著科技的發(fā)展，以及新材料的發(fā)明，在工業(yè)自動(dòng)化的驅(qū)動(dòng)下，PCR改進(jìn)技術(shù)也取得了突破性進(jìn)展，并衍生出很多與時(shí)俱進(jìn)的改進(jìn)技術(shù)。

1 對(duì)食品檢測(cè)的重要性

正所謂“民以食為天，食以安為先”，食品安全問(wèn)題是確保國(guó)家可持續(xù)發(fā)展的重要基礎(chǔ)及維護(hù)力量。隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)建設(shè)的深入推進(jìn)，食品行業(yè)也取得了令人矚目的發(fā)展，不僅食品種類日益?zhèn)€性化和多元化，而且食品企業(yè)數(shù)量和規(guī)模也呈現(xiàn)出新的增長(zhǎng)趨勢(shì)。然而，一些不法商家和食品經(jīng)營(yíng)者缺乏食品安全防范意識(shí)，導(dǎo)致食品安全事件頻繁發(fā)生。為此，加大對(duì)食品安全檢測(cè)的重視和投入十分必要，且迫在眉睫。只有妥善解決食品安全問(wèn)題，才會(huì)讓民眾增強(qiáng)對(duì)政府的公信力，并確保社會(huì)全局穩(wěn)定發(fā)展。

2 探析PCR技術(shù)的原理

PCR于20世紀(jì)80年代誕生之后，就成為了食品安全檢測(cè)中的重要組成部分，進(jìn)而廣泛應(yīng)用于微生物檢測(cè)領(lǐng)域。PCR的原理是基于DNA體外擴(kuò)增技術(shù)，通過(guò)對(duì)食品微生物的核酸序列的檢測(cè)，進(jìn)而有效復(fù)制出被檢測(cè)微生物的DNA。當(dāng)然檢測(cè)過(guò)程需要三個(gè)階段不同溫度的支撐，即高溫變性、低溫退火和適溫延伸三個(gè)環(huán)節(jié)。最終確保即使存在一個(gè)微生物，都能夠借助PCR技術(shù)進(jìn)而檢測(cè)出來(lái)。此外，PCR技術(shù)的自動(dòng)化程度較高，可以簡(jiǎn)化檢測(cè)步驟，不僅提升了檢測(cè)質(zhì)量和效率，而且能夠降低人力和成本投入。此外，PCR技術(shù)使得機(jī)械化程度隨之提升，在檢測(cè)速度方面展現(xiàn)出無(wú)與倫比的優(yōu)勢(shì)。最后，PCR技術(shù)十分精準(zhǔn)，不需過(guò)多的人為操作，極大地減少了間接污染或失誤操作，最終實(shí)現(xiàn)了檢測(cè)效果的科學(xué)性和準(zhǔn)確性。

3 PCR技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用

3.1 轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)

目前，PCR技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于食品轉(zhuǎn)基因成分的檢測(cè)，而且隨著國(guó)家和農(nóng)業(yè)部門(mén)提升了對(duì)轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)，使得PCR技術(shù)在該領(lǐng)域的優(yōu)勢(shì)隨之突顯，而且呈現(xiàn)出不可替代的價(jià)值效應(yīng)。例如，在玉米、油菜、小麥、大豆、水稻等食品生產(chǎn)原料中，PCR技術(shù)基本都能有效涵蓋，且能夠?yàn)槎鄠€(gè)轉(zhuǎn)基因測(cè)試位點(diǎn)提供保障。

3.2 在常規(guī)食品檢測(cè)中的應(yīng)用

傳統(tǒng)的PCR技術(shù)主要應(yīng)用于常規(guī)食品檢測(cè)，這也是其最初發(fā)明后的應(yīng)用領(lǐng)域，近年來(lái)隨著應(yīng)用領(lǐng)域的分化，才逐漸衍生出新的功能。但是這些常規(guī)檢測(cè)仍然非常重要，尤其是在檢測(cè)食源性致病菌方面，具有著精確、快速等諸多特點(diǎn)。該檢測(cè)流程相對(duì)簡(jiǎn)單，一般可分為兩個(gè)步驟，一是使用過(guò)濾或離心的途徑在食品樣本中獲取細(xì)菌細(xì)胞，進(jìn)而準(zhǔn)備提取DNA；二是在將細(xì)胞裂解之后，使其充分核酸純化，并與PCR的技術(shù)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)保持吻合。此外，常規(guī)PCR檢測(cè)技術(shù)還可以對(duì)病原微生物起到很好的檢測(cè)作用。

3.3 沙氏門(mén)菌的檢驗(yàn)

沙氏門(mén)菌的危害性不言而喻，輕者可以造成人體腸道不適，重者能夠產(chǎn)生致命威脅。以往檢測(cè)技術(shù)在檢驗(yàn)過(guò)程中存在著外源性DNA污染的潛在風(fēng)險(xiǎn)，使得其準(zhǔn)確性難以保證。而PCR技術(shù)的敏感程度十分高，可以快速檢驗(yàn)任何食品中的沙氏門(mén)菌，尤其是本身能夠進(jìn)行特異性設(shè)計(jì)，可以最大限度地減少檢驗(yàn)誤差。當(dāng)然PCR技術(shù)在沙氏門(mén)菌的檢驗(yàn)方面也并不是完美無(wú)缺的，例如，在引物的選取上，也容易出現(xiàn)運(yùn)用錯(cuò)誤的可能，為此優(yōu)化和完善PCR技術(shù)勢(shì)在必行。

4 多重PCR技術(shù)

在原有PCR技術(shù)的基礎(chǔ)上，將其他模板和引物加入到綜合反應(yīng)系統(tǒng)內(nèi)，可以實(shí)現(xiàn)不同片斷的擴(kuò)增處理，該法在擴(kuò)增超長(zhǎng)片斷中具有顯著的效應(yīng)，是以往單一運(yùn)用PCR技術(shù)所無(wú)法比擬的。此外，多重PCR技術(shù)作為一種改良的新型技術(shù)，能夠有效降低綜合成本，而且使得系統(tǒng)運(yùn)行更加高效完美。

5 對(duì)食品中有效成分的檢測(cè)

隨著社會(huì)和民眾對(duì)食品質(zhì)量安全意識(shí)的提升，消費(fèi)者對(duì)于檢測(cè)食品中有效成分的鑒定十分重視。由于加工食品要經(jīng)過(guò)眾多環(huán)節(jié)和程序，使得原料在失去原有屬性和面貌的同時(shí)，其原料品質(zhì)的優(yōu)劣與否便很難通過(guò)肉眼辨別。尤其是一些不法商家在生產(chǎn)過(guò)程中以次充好的現(xiàn)象屢見(jiàn)不鮮。而通過(guò)PCR檢測(cè)技術(shù)，可以有效達(dá)成對(duì)食品中有效成分的檢測(cè)，目前在飲料、乳制品行業(yè)已經(jīng)取得了成熟的應(yīng)用。

6 結(jié)語(yǔ)

總之，食品安全問(wèn)題不容忽視，是關(guān)乎國(guó)計(jì)民生的大事，為此加大食品檢測(cè)力度勢(shì)在必行，而PCR技術(shù)憑借其擴(kuò)增效率高和靈敏度高的優(yōu)勢(shì)成為了目前十分可靠且實(shí)用的技術(shù)。當(dāng)然PCR技術(shù)也存在一定的不足，為此要加大創(chuàng)新和完善力度，使其效率和準(zhǔn)確度能夠進(jìn)一步提升。

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作者簡(jiǎn)介：龍宇航，碩士，助教，研究方向：食品科學(xué)與工程。