牛病毒性腹瀉的危害及防控建議

文/王天梓 王 艷 唐 宇 郭 宇 李秀嶺＊

（1 北京市大興區動物疾病控制中心；2 北京市大興區采育鎮畜牧動物水產推廣站）

牛病毒性腹瀉病（Bovine Viral Diarrhea，BVD），也稱牛病毒性腹瀉-黏膜病（BVD-MD），是由牛病毒性腹瀉病毒（Bovine Viral Diarrhea Viral，BVDV）引起的一種臨床表現復雜的高接觸性傳染病。1946年該病首次被發現能感染牛、羊、豬等多種動物，造成呼吸和生殖系統等多項機體功能障礙[1，2]。該病流行廣泛，對我國奶牛養殖業，乃至世界范圍內的奶牛產業、肉牛產業均造成了巨大損失。世界衛生組織（WHO）將其列為必須通報疫病，且被列為重要的傳染病檢疫對象。目前，我國已經在多種偶蹄動物體內檢測到BVDV的攜帶，并呈現高發趨勢，我國將其列為三類動物疫病[1]。

1 病原學

B V D V屬于黃病毒科（F l a v i v i r i d a e）瘟病毒屬（Pestivirus），單股正鏈RNA病毒，有囊膜。在分類上與豬瘟病毒（Classical Swinefever Virus，CSFV）和邊界病毒（Border diseasevirus，BDV）同屬，同源性較高，抗原有交叉性。BVDV與CSFV的核苷酸序列同源性約為60%，氨基酸同源性約為85%[2]。因而兩者可以引發交叉感染，在防控工作上需要引起重視。

1.1 基因型

BVDV基因組全長12.5 kb，由5’端非編碼區、1 個開放閱讀框架（Open Reading Frame，ORF）以及3’端非編碼區組成。在該基因5’端的208～223 nt和294～323 nt位置變異較大，根據變異差異可將其分為BVDV-Ⅰ和BVDV-Ⅱ兩種基因型。

1.2 生物型

自然狀態下根據BVDV能否引起細胞病變（CPE）將其分為兩個生物型：致細胞病變型（CP）與非細胞病變型（NCP），且NCP型可以轉化為CP型，兩種生物型相互轉化，是BVDV得已在自然界生存的方式。不同生物型與分子型的BVDV對牛發病情況的影響不同。在自然界中分離得到的BVDV毒株大多為NCP型，研究表明，BVDV感染牛產生持續性感染（Persistent Infection，PI）是由NCP型病毒引起的，而CP型不產生持續感染，但會導致黏膜病的發生[3]。

1.3 保存及培養特性

BVDV對外界環境抵抗力較弱，對乙醚、氯仿和胰酶等均敏感。在36～37 ℃條件下滅活較慢，常用消毒藥能很快將其滅活。真空凍干病毒在 -70～-60 ℃下可保存多年[4]。目前常用胎牛腎細胞株（Madin Darby Bovine Kidney cells，MDBK）培養，鼻甲骨細胞也曾用于該病毒的增殖及疫苗制備[5]。

2 發病機理及臨床癥狀

2.1 亞臨床感染

自然界中最常見的BVDV感染類型即為亞臨床感染。某些未感染過BVDV的健康牛感染BVDV后多數不會出現臨床癥狀，或者僅出現一過性臨床癥狀。通過對亞臨床感染牛的臨床癥狀進行觀察，發現牛感染病毒后僅表現出溫和型發熱且持續時間不超過2 天，感染牛的白細胞數中度下降，病毒在感染后第13天所有的淋巴組織即檢測不到抗原[6]。亞臨床感染的存在解釋了自然界中牛場沒有接種疫苗，但牛BVDV抗體水平和陽性率卻依然很高的原因。

2.2 急性感染

急性感染發病率相對較高，致死率低，某些毒株可引起急性死亡病例。急性感染通常發生在育成牛和青年牛，臨床表現為高熱，體溫達40 ℃，可持續2～3 天并伴有白細胞數減少；食欲減退、反芻停止；精神沉郁；流涎流淚；腹瀉以及產奶性能下降等。新生犢牛急性感染后臨床表現相對溫和，會出現腸炎和肺炎癥狀，輕微發熱、流涎、食欲廢絕及白細胞數減少。由于犢牛母源抗體水平低，不能完全保護犢牛，導致BVDV感染引起了犢牛的免疫抑制，容易繼發其他細菌或病毒感染，加重疾病的臨床癥狀，從而造成犢牛的病死率增加。奶牛主要表現為產奶量下降，妊娠母牛可發生死胎、流產、木乃伊胎或引起持續性感染（PI）牛的產生。

2.3 持續感染

持續性感染（Persistent infection，PI）是BVDV感染最特殊的一種臨床表現，其形成機理是妊娠母牛在懷孕早期（懷孕150 天前）感染了NCP型的BVDV，病毒通過胎盤屏障感染胎兒，可發生流產、死胎、木乃伊胎等，若正常產下胎兒則形成持續性感染。由于在母體中的胎兒免疫系統尚未發育成熟，不能識別BVDV而產生相應抗體，這種胎兒出生后即成為持續感染牛（PI牛），處于免疫耐受狀態。PI牛本身沒有臨床癥狀，但終身帶毒并排毒，且其體內病毒能夠復制，因此會造成BVDV在牛群中的傳播，是BVDV主要的傳染源，在BVDV傳播過程中起重要作用。健康牛群引進PI牛后會導致牛群中患有呼吸道疾病和繁殖障礙的病例增加，若母牛在配種時體內缺乏BVDV抗體或抗體活性不足就會被感染而產出PI犢牛；若引入PI種公牛的精液也會造成母牛感染從而產出PI牛。因此PI牛為BVDV感染的最大威脅，發現后應立即淘汰。

2.4 黏膜病

黏膜病（Mucosal Disease，MD）是牛病毒性腹瀉最嚴重的臨床類型，發病率不超過5%，但死亡率接近100%[7]。目前普遍認為，黏膜病的發病機理是持續感染的繼續發病，即懷孕母牛感染NCP型BVDV毒株后產出PI牛，PI牛在發育階段再次感染抗原性相同或同源的CP型BVDV毒株后繼發MD。主要表現為腹瀉，糞便呈噴射狀排出，灰白色，黏稠狀或水狀，并伴有黏膜、血便以及惡臭味，脫水、白細胞減少、流涎、流淚，部分患病牛在蹄趾間或口腔淺表出現糜爛。感染BVDV導致黏膜病的病牛在出現臨床癥狀后幾天內死亡。通過觀察病牛腹瀉癥狀，是否出現間歇性腹瀉和漸進性消瘦，口腔、蹄趾間是否出現潰瘍，即可判斷病牛是否為BVDV感染引起的腹瀉。

3 危害

BVDV感染帶來的危害主要體現在三方面：一是臨床癥狀導致生產性能下降所帶來的經濟損失；二是引起牛的繁殖障礙；三是亞臨床感染、持續感染的存在導致診斷困難，致使病毒會在牛群中傳播擴散，造成持續性的威脅。

3.1 生產性能下降

牛感染BVDV后發病，伴隨發熱、腹瀉、白細胞數下降、食欲減退、精神沉郁等癥狀。此類癥狀均會影響牛的生產性能，導致產奶量下降、牛乳品質降低等，發病嚴重者會出現流產、早產甚至死亡，最為嚴重的情況是BVDV慢性感染引起的黏膜病，雖然發病率低但致死率100%。以上均可造成較大的直接經濟損失。

3.2 牛的繁殖障礙

BVDV感染公牛后，會造成精液質量下降；若種公牛精液中存在BVDV，在配種過程中會造成病毒的傳播，引起母牛感染甚至PI牛的產出。

BVDV對母牛發情期和孕期不同時期會產生不同的影響。在發情初期感染BVDV會使母牛的卵巢功能受到影響，造成卵泡的大小和生長速度均下降，次級卵泡數減少等[8]，同時病毒會破壞性腺類固醇的生成機制，使雌二醇、黃體酮等激素分泌紊亂[9]。在妊娠早期或受精時感染BVDV會導致卵巢感染，引起卵巢炎癥，降低受精卵的成活率以及母牛的受孕率。BVDV感染妊娠早期（30～125 天）母牛，可造成持續感染牛（PI牛）的產生[10]。BVDV感染妊娠中期（125～175 天）母牛，會造成犢牛的先天性缺陷，如小腦發育不良、腦積水、視覺系統缺陷、生長遲緩等。BVDV感染妊娠后期（175 天以后）母牛，除造成少數流產外，大多胎牛能產生正常的免疫反應，將病毒清除。這些胎牛出生后在接觸母乳前，已經產生了BVDV中和抗體，但這些先天感染了BVDV的犢牛與正常犢牛相比，更容易感染其他疾病[11]。

3.3 持續性感染與免疫抑制

正如前文所述，妊娠早期母牛感染了NCP型的BVDV會導致PI牛的產生，該類牛終身攜帶和傳播病毒，即持續性感染母牛的后代也持續感染帶毒，從而形成母性持續感染家族。部分持續感染牛會出現發育不良、產奶性能下降等現象，持續感染牛缺乏有效的免疫功能，生命周期短，沒有飼養價值，并且對牛群健康造成威脅，因而對PI牛，早發現早淘汰，是防控BVDV傳播的重要手段。

BVDV會導致病牛產生免疫抑制，損害機體的免疫機能，增強其他病原體的致病性，導致疾病多發和生產性能下降。當已感染病毒的牛免疫機能受到抑制時，無論體內是否存在病毒或抗體，都會向外界不斷排毒，即使病牛康復后也長期帶毒，成為長期的潛在傳染源。

3.4 對相關產業的危害

BVDV感染牛后，病牛的血清、凍精、胚胎等均帶毒，以此為原料生產的生物制品將給牛場、疫苗等相關產業造成巨大的經濟損失，后果不堪設想。

由于CSFV與BVDV同屬于瘟病毒屬，具有極高的同源性。BVDV-Ⅰ和BVDV-Ⅱ兩個基因型，均可以感染豬，并引起類似豬瘟感染的癥狀，BVDV對懷孕母豬和新生仔豬危害較大，主要引起流產和死胎等，新生仔豬感染后死亡率高達 57%。因而要重視BVDV對養豬業的危害，豬群中BVDV 的普遍存在還常影響豬瘟疫苗的生產和免疫效果，豬 BVDV 感染表現出類似溫和豬瘟的臨床癥狀，很難區分。接種被 BVDV 污染的疫苗是造成 BVDV 在豬群內傳播的主要途徑之一。

4 防控

牛病毒性腹瀉-黏膜病是對養牛養殖業造成經濟威脅的重要疾病，但是由于該病的臨床癥狀相對于口蹄疫等較輕微，也不會造成大面積流行而產生嚴重公共安全問題，因而該病總是不能引起養殖場（戶）的足夠重視。然而，該病在全世界范圍流行，在養牛業逐漸發展的同時，該病的影響也逐漸凸顯，并且其對生物制品和養豬業的危害也不容忽視。因此，我國要重視該病的防控，借鑒國內外防控該病的成功經驗，結合我國實際情況，因地制宜的制定合理有效的防控措施。

4.1 BVDV的國際防控措施

目前國際上針對BVDV防控措施主要有兩種：一是非免疫根除，即鑒別和撲殺持續感染動物；二是疫苗接種。非免疫根除的核心是不接種疫苗，檢測和撲殺隱性感染和持續感染牛，主要步驟是首先利用特異性好、靈敏度高的監測方法區分非感染動物和感染動物，然后對非感染動物的BVDV抗體情況進行持續監測，保證非感染動物體內不存在病毒，在非感染動物群體消滅病毒；對篩選出的感染動物（陽性牛、持續感染牛）進行撲殺，最后做好預防措施。在西班牙、瑞典、挪威、芬蘭等歐洲國家均采用非免疫根除的方法對BVDV進行防控，該方法適用于養殖密度低，養殖場（戶）能夠承受相應經濟損失或政府補貼采取合理補貼的地區[12，13]。BVDV疫苗20世紀60年代就開始使用，目前上市的品種為滅活苗和弱毒苗。研究表明，滅活苗安全性好，可以有效預防懷孕母牛感染，預防胎牛持續感染，但是滅活苗的保護期短，需要加強免疫；弱毒苗的優點是免疫期長、使用方便，但是對懷孕母牛不安全。國際上應用疫苗免疫防控BVDV的典型國家有美國、德國等，這些國家的養殖密度較大、畜牧業發達，奶牛及肉牛產業占該國農業的重要組成部分，并且美國作為最早采用疫苗防制BVDV的國家，取得了顯著的效果。

4.2 我國防制現狀

BVDV流行病學調查表明，該病幾乎遍布全國所有省市，在部分省市的牛群中BVDV抗體陽性率甚至高達80%[14]，BVDV的基因型和亞基因型呈增多趨勢。但目前我國還未使用疫苗免疫，國內無上市的商品化疫苗，部分場（戶）會自行購買進口疫苗對其進行免疫，多數牧場采取發現后淘汰、凈化的措施。

4.3 防控建議

我國幅員遼闊，不同養殖地區的環境和養殖規模等差異較大，應根據不同地區飼養特點，同時借鑒國際先進防控經驗，采取不同的防控措施進行BVD/MD防控。在實際操作中，應因地制宜，圍繞疾病的控制和根除制定針對性強的防控措施，建議如下：（1）針對養殖密度高、規模大的牛場和良種繁育基地進行BVDV流行病學調查，全面掌握疫病的流行規律和該地區的BVDV分子生物學特性，建立系統的病毒遺傳譜系，并在此基礎上研發疫苗。（2）建議有條件的牧場進行定期監測，有助于及時發現抗體陽性動物，并淘汰、凈化，避免持續感染牛群體的威脅。一經發現抗體陽性牛應立即撲殺并無害化處理，切斷傳染源，做好消毒，防止感染蔓延。（3）建議養殖密度大或曾有較大范圍發病的規模場、地區，選擇性開展BVDV滅活苗的免疫。主要針對斷奶期犢牛進行免疫，根據牛群的抗體反應制定免疫計劃，適當進行加強免疫。（4）嚴格管控進場的生物制品、動物及動物產品，控制外來途徑。（5）加強對牛場的飼養管理。（6）鼓勵國家和地區科研機構開發BVDV疫苗。（7）鼓勵地方動物衛生機構聯合高校、科研院所，依據流行病學調查結果，制定有針對性的剔除計劃，建立涵蓋引進、隔離、飼養管理、疫苗接種、抗體檢測、淘汰標準等全鏈條、多環節的BVD防疫體系。