芝麻油灌腸對大鼠潰瘍性結腸炎療效的實驗研究

高言國 陳金林 張月秋 鄧兆濱

【摘要】 目的：研究芝麻油（SO）灌腸對大鼠潰瘍性結腸炎（UC）的治療作用。方法：25只健康SD雄大鼠按隨機數字表法分為空白對照組（NC組）、空白對照+SO組（NC+SO組）、模型組（M組）、模型+低劑量SO組（M+SO1組）及模型+高劑量SO組（M+SO2組），每組5只。M組、M+SO1組、M+SO2組建造UC模型。M+SO1組結腸灌注SO 0.5 mL/100 g;NC+SO組與M+SO2組結腸灌注SO 1 mL/100 g;NC組與M組予以食用植物油灌腸0.5 mL/100 g。觀察并比較腸黏膜損傷評分及病理表現，比較超氧化物歧化酶（SOD）以及丙二醛（MDA）。結果：M組病理表現為出現明顯的炎癥反應，隱窩出現破壞現象，說明建模成功。M組結腸損傷評分高于NC組（P<0.01）;M+SO1組與M+SO2組結腸損傷評分均低于M組（P<0.01）;NC+SO組結腸損傷評分高于NC組（P<0.05）。M組中MDA含量高于NC組，而SOD含量低于NC（P<0.01）;M+SO1組與M+SO2組的MDA含量均低于M組（P<0.01）;M+SO1組與M+SO2組的SOD含量均高于M組（P<0.01）。結論：SO可通過提高UC大鼠結腸組織抗氧化能力抑制炎癥反應，發揮治療作用。

【關鍵詞】 芝麻油 潰瘍性結腸炎 超氧化物歧化酶 丙二醛

[Abstract] Objective： To explore the effect of sesame oil （SO） on ulcerative colitis （UC） in rats. Method： A total of 25 healthy SD male rats were divided into blank control group （NC group）， blank control+SO group （NC+SO group）， model group （M group）， model+low dose SO group （M+SO1 group） and model+high dose SO group （M+SO2 group） according to the random number table method， 5 rats in each group. M group， M+SO1 group， M+SO2 group were used to construct the UC model. M+SO1 group was given SO enema 0.5 mL/100 g. NC+SO group and M+SO2? group were given SO enema 1 mL/100 g. NC group and M group were given vegetable oil enema 0.5 mL/100 g. The intestinal mucosa injury score and pathological manifestations were observed and compared. Superoxide dismutase （SOD） and malondialdehyde （MDA） were compared. Result： M group showed obvious inflammatory reaction and destruction of crypt， indicating successful modeling. The intestinal mucosa injury score in M group was higher than that in NC group （P<0.01）. The intestinal mucosa injury score of M+SO1 group and M+SO2 group were lower than that of M group （P<0.01）. The intestinal mucosa injury score of NC+SO group was higher than that in NC group （P<0.05）. MDA content in M group was higher than that in NC group， while SOD content in M group was lower than that in NC group （P<0.01）. The MDA content of M+SO1 group and M+SO2 group were lower than that of M group （P<0.01）. The SOD content of M+SO1 group and M+SO2 group were higher than that of M group （P<0.01）. Conclusion： SO can play a therapeutic role by improving the antioxidant capacity of UC rats colonic tissues and inhibiting inflammatory response.

[Key words] Sesame oil Ulcerative colitis SOD MDA

First-authors address： The Affiliated Xinhua Hospital of Dalian University， Dalian 116021， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.35.003

潰瘍性結腸炎（UC）又稱非特異性潰瘍性結腸炎，臨床主要表現為腹痛、腹瀉、黏液膿血便和里急后重等。該病無特效治療，導致病情遷延反復，甚至癌變，嚴重影響患者的身心健康，隨著其發病率的逐漸增高，受到國內外學者的更多關注[1]。目前，臨床上5-氨基水楊酸、糖皮質激素及免疫抑制劑等藥物的療效不能完全達到預期的效果[2]。芝麻油（SO）主要藥效成分是芝麻素，研究發現芝麻素具有調節血脂、抗氧化、調節免疫功能及消除對機體免疫細胞有害因素等諸多作用[3]。國外研究表明服用SO能通過抑制腸道炎癥反應、酸性粘蛋白分泌和纖維化而加快炎癥腸病的愈合，SO中的芝麻酚具有抗氧化、抑制炎癥反應、清除自由基活性等，對UC的腸黏膜起著重要的作用[4-6]。對于肢體外傷的患者局部外用涂抹芝麻油可以減輕疼痛程度和減少NSAIDs藥物應用次數[7-8]。芝麻油外用可以減輕化療和胺碘酮導致的靜脈炎以及應用口腔護理方面，但SO未見對外用治療灌腸UC的研究[9-11]。本文將探究SO灌腸對潰瘍性結腸炎的治療效果及可能的作用機制，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料、儀器與試劑 健康SD雄大鼠25只，體重220～260 g，由大連大學實驗動物中心提供，動物室保持12 h晝夜循環，室溫控制在19～29 ℃，濕度40%～70%，大鼠自由攝取水和標準顆粒食物。BDY-2型恒壓恒流電泳儀：上海博通醫用儀器廠產品;雷弗BT100S恒流泵：保定雷弗流體科技有限公司產品;GF-1型時調速式高速分散器：江蘇海門麒麟醫用儀器廠產品;電泳儀及玻璃板：大連競邁生物科技有限公司（中國遼寧）Thermo 354酶標儀：Thermo Scientific（美國）;試劑：芝麻油，來自中糧集團有限公司;2，4，6-三硝基苯磺酸（2，4，6-trinitrobenzene sulfonic acid，TNBS），來自美國Sigma公司，含量≥99%;丙二醛（maleic dialdehyde，MDA）測定試劑盒、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）試劑盒（均購自南京建成生物工程研究所）。

1.2 方法 動物模型建立：25只健康SD雄大鼠按隨機數字表法分為空白對照組（NC）、空白對照+SO組（NC+SO組）、模型組（M組）、模型+低劑量SO組（M+SO1組）及模型+高劑量SO組（M+SO2組），每組5只。M組、M+SO1組、M+SO2組在乙醚麻醉狀態下，單次結腸灌注120 mg/kg?TNBS乙醇溶液。治療方法：入組后第2天予以灌腸處置，NC+SO組、M+SO1組及M+SO2組于第2～14天芝麻油灌腸 2次/d，M+SO1組結腸灌注SO 0.5 mL/100 g;NC+SO組與M+SO2組結腸灌注SO 1 mL/100 g，NC組、M組于第2～14天予以食用植物油灌腸0.5 mL/100 g，2次/d。第15天處死大鼠，獲取結腸組織。取距肛門6～8 cm處損傷最嚴重的結腸組織，其中0.5 cm病變腸組織以4%甲醛固定，常規石蠟切片，HE染色和光鏡檢查;另取濕重約200 mg組織，剪碎制成10%的組織勻漿，離心10 min，取上清液，按照ELISA試劑盒測定MDA和SOD。

1.3 觀察指標與評價標準 （1）比較腸黏膜損傷指數評分及病理表現。根據肉眼觀察及臨床癥狀綜合評定，用損傷指數表示，具體方法參見Wallce的報道。潰瘍情況：正常為0分;充血無潰瘍為1分;一處潰瘍為2分;兩處潰瘍為3分;潰瘍長度經累計>1 cm的為4分;累計>2 cm為5分。腹瀉情況：無腹瀉為0分;有腹瀉為1分。（2）比較M組、M+SO1組與M+SO2組中MDA與SOD含量。MDA與SOD含量采用ELISA測定，按試劑盒說明書操作。

1.4 統計學處理 采用SPSS 11.5軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，組間比較采用獨立樣本t檢驗，組內比較采用配對t檢驗;計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 結腸損傷評分及表現比較 M組表現為出現明顯的炎癥反應，隱窩出現破壞現象。NC組結腸損傷評分為0分，M組結腸損傷評分為（4.41±0.81）分，M組結腸損傷評分高于NC組，差異有統計學意義（P<0.01）。M+SO1組結腸損傷評分為（2.34±0.75）分，M+SO2組結腸損傷評分為（1.98±0.99）分，M+SO1組與M+SO2組結腸損傷評分均低于M組，差異均有統計學意義（P<0.01）。NC+SO組結腸損傷評分為（0.83±0.41）分。NC+SO組結腸損傷評分高于NC組，差異有統計學意義（P<0.05）。見圖1。

2.2 不同劑量SO對潰瘍性結腸炎大鼠腸組織的MDA、SOD的影響 NC組中MDA含量為（0.84±0.14）U/mg，SOD組的含量為（57.61±10.22）nmol/mg。M組中MDA含量為（2.92±0.56）U/mg，SOD的含量（31.00±5.63）nmol/mg。M組中MDA含量高于NC組，而SOD含量低于NC組，差異均有統計學意義（P<0.01）。M+SO1組中MDA含量為（1.79±0.26）U/mg，M+SO2組中MDA含量為（0.99±0.18）U/mg。M+SO1組與M+SO2組的MDA含量均低于M組，差異均有統計學意義（P<0.01）。M+SO1組中SOD含量為（44.97±4.98）nmol/mg，M+SO2組中SOD含量為（54.64±9.88）nmol/mg。M+SO1組與M組+SO2的SOD含量均高于M組，差異均有統計學意義（P<0.01）。見圖2。

3 討論

芝麻油與其他食用油相比具有獨特的強大的抗氧化能力和抑制炎癥反應性質，強大的抗氧化活性主要因為芝麻中木脂素類物質（含量0.5%～1.0%），包括芝麻素、芝麻林素、芝麻酚所發揮的作用，芝麻中的木酚脂素類和生育酚類等抗氧化性物質能有效地清除細胞內的自由基，阻止其引發的細胞膜內不飽和脂質的過氧化反應[12-14]。UC是一種慢性復發性的非特異性腸道炎癥，其確切病因和發病機制尚不明確，一般認為與遺傳、免疫、感染和精神心理因素等有關，其發病機制復雜，多種因素、多種成分參與了UC的發病過程[15]。近年研究發現氧自由基在UC的發病機制中起重要作用，體內氧自由基還參與脂質過氧化反應并產生脂質過氧化物，通過檢測MDA來反映脂質過氧化物程度，間接評價細胞、組織受損程度，并且SOD能有效地清除氧自由基從而抑制腸組織中的脂質過氧化反應并能穩定細胞膜，SOD活性是反映細胞膜功能和機體抗炎癥反應的主要指標[16-18]。

本研究表明，芝麻油灌腸后，大鼠出現一定腹瀉現象，相對于NC組，具有一定的副作用出現，但是芝麻素可以顯著降低UC大鼠腸組織的SOD，增加MDA水平，從而抑制大鼠腸黏膜氧化應激和炎性反應，且這種促進作用與芝麻素呈劑量依賴關系。而隨著芝麻素用量加大，組織髓過氧化物酶活力降低，說明芝麻素具有抗炎作用，并且有研究證實芝麻素可以提高SOD活性等作用達到抗氧化作用。M組中MDA含量高于NC組，而SOD含量低于NC組（P<0.01），說明UC模型大鼠結腸組織自由基清除能力下降，而給予不同劑量芝麻油后大鼠結腸組織中MDA水平均降低，SOD活力升高，機體的抗氧化能力提高，減少機體的過氧化損傷，從而減輕結腸損傷及炎癥反應。有研究表明芝麻素具有抗菌作用，而且芝麻中尿囊素還具有保護修復消化道黏膜以及止痛作用，這些因素也可能在治療上起一定作用，但是需要進一步研究[19-20]。

綜上所述，芝麻油具有較強的抗氧化活性，可以降低組織中MDA水平，提高SOD活性，減輕自由基和脂質過氧化作用對腸組織的損傷，從而對TNBS所造成的結腸炎發揮治療作用，為芝麻油用于UC的防治提供理論依據。

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（收稿日期：2019-07-16）（本文編輯：田婧）