膀胱癌患者TK1、DKK-1與生存關系分析

周裔 杜磊 季洋

【摘要】 目的：觀察探討TK1、Dickkopf-1（DKK-1）對膀胱癌治療、預后效果的臨床應用價值，并對其與患者生存關系進行分析研究。方法：選擇2014年1月-2015年1月吉林省一汽總醫院泌尿外科收治的84例膀胱癌患者作為研究組，又選取同期84例健康志愿者作為對照組，對比兩組TK1、DKK-1水平，分析其與患者生存的關系。結果：研究組TK1、DKK-1水平均明顯高于對照組，研究組治療干預后TK1、DKK-1水平均明顯低于治療干預前的水平（P<0.05）;3年后患者的生存率為77.38%（65/84），成功生存者TK1、DKK-1水平均明顯低于生存失敗者（P<0.05），TK1、DKK-1水平與患者生存情況均存在負相關性（r=-0.154、-0.146，P<0.01）。結論：TK1、DKK-1在膀胱癌患者治療前后水平差異顯著，且TK1、DKK-1水平與患者生存情況均存在相關性，TK1、DKK-1水平越低，患者預后情況越好，可將其作為預測預后的指標。

【關鍵詞】 胸苷激酶1 DKK-1 膀胱癌 生存關系 預后效果

[Abstract] Objective： To observe the clinical value of TK1， DKK-1 in the treatment and prognosis of patients with bladder cancer， and the relationship between it and the survival of patients was analyzed and studied. Method： From January 2014 to January 2015， 84 patients with bladder cancer treated in the Department of Urology， Jilin FAW General Hospital were selected as the study group. 84 healthy volunteers in the same period were selected as the control group. The TK1， DKK-1 levels of two groups were compared and the relationship between them and the survival of the patients was analyzed. Result： The levels of TK1， DKK-1 in the study group were significantly higher than those in the control group （P<0.05）. The levels of TK1， DKK-1 in the study group after treatment intervention were significantly lower than those of before treatment intervention （P<0.05）. The survival rate of patients after 3 years was 77.38% （65/84）. The TK1， DKK-1 levels of patients with successful survival were significantly lower than those of patients with failure of survival （P<0.05）. There was a negative correlation between the level of TK1 and DKK-1 and the survival of patients （r=-0.154， -0.146， P<0.01）. Conclusion： There are significant differences in the level of TK1， DKK-1 before and after treatment， and the TK1 and DKK-1 levels are negatively correlated with patient survival， and the level of TK1 and DKK-1 are correlated with the survival of patients， it can be used as an index to predict the prognosis of patients.

[Key words] Thymidine kinase 1 DKK-1 Bladder cancer Survival relationship Prognostic effect

First-authors address： Jilin FAW General Hospital， Changchun 130000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.35.035

膀胱癌是近幾年泌尿科中較為常見的一種疾病，對患者生命安全的威脅極大。目前臨床對患者的治療大部分集中在手術治療，但部分患者在腫瘤組織切除后，會有一定的概率出現復發。且在臨床診斷工作中，其癥狀與部分泌尿疾病較為相似，因此需要有效的腫瘤標志物幫助臨床對患者的病情進行診斷以及監控，可以及時對患者病情變化進行了解，并借此提高患者的生存率[1]。胸苷激酶1（TK1）是一種細胞增殖的標志物，參與DNA合成，細胞周期的G1晚期和S期時，胸苷激酶1表達水平上調。雖然沒有直接參與細胞增殖，但胸苷激酶1為適應腫瘤細胞的快速增殖會表現出上調的趨勢。Dickkopf-1（DKK-1）是一種分泌性蛋白，能夠參與Wnt信號通路的調控，其活性能夠抑制Wnt/β-鏈蛋白，降低腫瘤細胞的存活率[2-4]。此次研究中心是對患者的TK1、DKK-1水平進行檢測，并分析其與患者的預后、生存關系。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2014年1月-2015年1月吉林省一汽總醫院泌尿外科收治的84例膀胱癌患者作為研究組。納入標準：病理切片、影像檢查以及膀胱鏡檢查，確診為膀胱癌;未接受化療或其他治療干預。排出標準：其他惡性腫瘤;有精神疾病病史。選取同期84例健康志愿者作為對照組。該研究已經倫理學委員會批準，患者知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法 研究組采用膀胱部分切除術聯合術后化療。兩組均采集空腹靜脈血3 mL，并于EDTA處理后的抗凝管中放置樣本血液[5]。在室溫條件下，2 000 r/min離心10 min，進行纖維蛋白干擾去除[6]。離心結束后，血清待用，采取雙抗體酶聯免疫法對處理后的血清中進行TK1檢測[7]。微孔板的覆蓋用純化的TK1抗體，微孔板上固定抗體。微孔中放入兩組研究對象的血清，使血清中的TK1固定抗體結合，構成抗體-抗原-酶標抗體復合物，洗滌過后，加入反應底物TMB，顯示出的藍色深淺，與樣本血清中的TK1水平為正相關關系[8];采取雙抗體酶聯免疫法，對樣本血清中的DKK-1水平進行檢測[9]。酶標儀（生產廠家：南京德鐵實驗設備有限公司）可自動反映出每個樣品的吸光度值，在波長450 nm條件下檢測樣品的吸光度，借助標準曲線來分析樣品中的TK1水平。將吸光度值結果從電腦中拷貝出來，使用標準曲線進行分析。

1.3 觀察指標 對兩組TK1、DKK-1水平進行檢測和記錄，并比較研究組治療前后TK1、DKK-1水平。對研究組患者進行定期隨訪，檢測TK1、DKK-1水平，了解統計患者3年的生存情況、TK1、DKK-1水平。為確保數據的統一性和準確性，所有的檢測工作與數據記錄分析工作均由同一組工作人員進行。患者每月進行1次復診，檢查患者各項生命指標及TK1、DKK-1水平，直至3年隨訪結束。

1.4 統計學處理 采用SPSS 21.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，組內比較采用配對t檢驗;計數資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗;采用Pearson進行相關性分析。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組一般資料比較 研究組84例患者中，男50例，女34例，平均年齡（45.65±3.05）歲;對照組84例健康志愿者，其中男45例，女39例，平均年齡（44.57±2.54）歲。兩組性別、年齡比較，差異均無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組TK1、DKK-1水平比較 研究組TK1、DKK-1水平均高于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.3 研究組治療前后TK1、DKK-1水平比較 研究組治療后TK1、DKK-1水平均明顯下降，且均明顯低于治療前，差異均有統計學意義（P<0.05），見表2。

2.4 研究組3年生存情況比較 研究組3年生存率為77.38%（65/84），成功生存者TK1、DKK-1水平均明顯低于生存失敗者，差異均有統計學意義（P<0.05），見表3。TK1、DKK-1水平與患者生存情況均呈負相關性（r=-0.154、-0.146，P<0.01）。

3 討論

膀胱癌是泌尿科中較為常見的一種惡性腫瘤，也是目前世界十大常見惡性腫瘤之一，對患者生命的威脅極大[10]。由于膀胱癌初期的臨床癥狀不具有特異性，與其他泌尿疾病較為相似，因此大部分患者就診時病情已較為嚴重[11]。目前主要的治療方法就是手術治療，但部分患者在手術后會出現復發的情況，因此臨床上針對膀胱癌患者急需一種特異性較強的腫瘤標志物，幫助臨床對患者進行診斷，并有效檢測病情的變化，借此加強治療，提高患者的生存率[12]。

膀胱癌發病的初期，其腫瘤組織較小，僅靠B超、X線檢查是無法發現病灶的，而尿脫落細胞學檢查是無法保證檢查的準確性，因此其逐漸被淘汰，新型流式細胞學檢查對樣本、操作人員的專業技術及儀器的要求均較高，因此無法在臨床對膀胱癌患者的診斷工作中進行推廣和使用，目前臨床檢測工作中，尚缺少特異性較強的腫瘤標志物。

本研究結果顯示，研究組TK1、DKK-1水平均明顯高于對照組（P<0.05）。說明對TK1、DKK-1水平進行檢測，可在一定程度上對患者的病情進行診斷，且其具有一定的準確性，TK1、DKK-1水平越高病情越嚴重。文獻[13]報道，TK1、DKK-1水平的變化與患者的病情有著極為密切的關系。對膀胱癌患者的臨床診斷中，可對TK1、DKK-1水平進行檢測，并以此為基礎，對患者進行診斷。TK1、DKK-1水平與患者的病情呈負相關，也就是患者的病情越嚴重，則TK1、DKK-1水平越高[14-15]。胸苷激酶是一種嘧啶核苷酸代謝過程中的關鍵酶，在細胞G1和S期交界處開始升高，在細胞增殖周期中起到重要的作用，分為TK1和TK2兩個亞型，編碼TK1的基因位于17號染色體上，編碼TK2的基因位于16號染色體上。血清胸苷激酶在非增殖細胞中含量極少，只有細胞異常增殖時才呈現一個高表達狀態，被認為是極具生命潛力的腫瘤標志物，而且這種高表達主要以TK1的含量升高為主。即使是高表達，在人體內也是以pmol/L為單位，可見是一個極敏感的指標。

本研究結果顯示，研究組治療前TK1、DKK-1水平均明顯高于治療后（P<0.05）;3年生存統計中，成功生存的患者，其TK1、DKK-1水平均明顯低于生存失敗的患者（P<0.05）。胸苷激酶1是細胞增殖的標志物，參與DNA合成，在細胞周期的G1晚期與S期中，胸苷激酶1的表達水平會出現一定的上調，其雖未直接參與到細胞增殖中，但胸苷激酶1為了適應腫瘤細胞的快速增殖，其水平數值也會出現上調的情況[16-17]。DKK-1屬于分泌性蛋白的一種，DKK-1的羧基端能與人體內的低密度脂蛋白受體相關蛋白6（LRP6）結合，從而阻礙Wnt/β-鏈蛋白信號的轉導通路，與人體內的癌癥發病情況有關。可以參與到Wnt信號通路的調控中，其具有的活性可以對Wnt/β-鏈蛋白進行抑制，減少腫瘤細胞的存活率[18-19]。且DKK-1不僅可以對Wnt信號通路的調控進行參與，同時DKK-1也可以借修飾其他分子的作用，進而對另外的信號通路的調控進行參與，如DKK-1可以在修飾Slug/Snail家族的鋅指蛋白的過程中，同時發揮其調控的作用[20]。

綜上所述，膀胱癌患者的TK1、DKK-1水平均明顯高于健康人，TK1、DKK-1在血清中水平治療前后差異顯著，且TK1、DKK-1水平與患者生存均存在相關性，TK1、DKK-1水平越低，患者預后越好，將其作為診斷指標或預測預后的指標，均具有顯著的臨床價值。

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（收稿日期：2019-10-09） （本文編輯：程旭然）